一种α-萘酮衍生物二聚体类化合物及其制备方法与用途技术

本发明专利技术提供一种α

【技术实现步骤摘要】
一种
α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物及其制备方法与用途


[0001]本专利技术属于生物医药
，尤其涉及一种α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物及其制备方法与用途。

技术介绍

[0002]α
‑
萘酮二聚体衍生物主要来自微生物的代谢产物，通常从枝孢属(Cladosporium)真菌中分离得到，其结构特点是以α
‑
萘酮衍生物作为结构单元，大部分通过8～4
’
碳碳键，少部分为碳氧键将两个α
‑
萘酮衍生物聚合为二聚体，连接方式通常为一分子α
‑
萘酮衍生物的苯环和另一分子α
‑
萘酮衍生物的苯环连接或一分子α
‑
萘酮衍生物的苯环与另一分子α
‑
萘酮衍生物的环己酮环连接。α
‑
萘酮二聚体衍生物具有广泛的生物活性，如抗癌、抗菌等，因此具有用于药物或作为药物前体开发的潜力，相关论文报道包括：NasiniG等发表的“Secondarymould metabolitesofCladosporiumtenuissimum,ahyperparasiteofrustfungi”，YamazakiH等发表的“Halogenatedcladosporolsproducedbythesodiumhalide
‑
supplementedfermentationofthe plant
‑
associatedfungusCladosporiumsp.TMPU1621”，等等。
[0003]随着科研人员致力于研究和开发新的活性药物，α
‑
萘酮二聚体衍生物因其广泛的生物活性越来越受到科学界的关注，但现有的α
‑
萘酮二聚体衍生物大部分通过8～4
’
碳碳键，少部分为碳氧键，将两个α
‑
萘酮聚合，即一分子α
‑
萘酮衍生物的苯环和另一分子α
‑
萘酮衍生物的苯环连接或一分子α
‑
萘酮衍生物的苯环与另一分子α
‑
萘酮衍生物的环己酮环连接。尚未发现通过一分子α
‑
萘酮衍生物的环己酮环和另一分子α
‑
萘酮衍生物的环己酮环连接方式聚合的α
‑
萘酮二聚体衍生物。因此，提供一种新聚合方式、具有抑癌活性的α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物具有重要意义。

技术实现思路

[0004]为解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供一种α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物及其制备方法与用途，该化合物是专利技术人从腐生真菌Neohelicosporiumgriseum的发酵产物中提取、分离和纯化得到，经鉴定具有罕见的3～2
’
碳碳键聚合方式(一分子α
‑
萘酮衍生物的环己酮环和另一分子α
‑
萘酮衍生物的环己酮环连接)，并经进一步的检测具有显著的抑制卵巢癌细胞株的活性，有望在制备防治卵巢癌的药物中发挥重要作用。
[0005]本专利技术所述的腐生真菌Neohelicosporiumgriseum，是由贵州理工学院真菌资源研究室分离获得并已进行了保藏，保藏单位：贵州省农业科学院保藏中心，保藏日：2019年11月20日，保藏登记号为GZAAS22
‑
2002。
[0006]本专利技术的目的将通过下面的详细描述来进一步说明。
[0007]本专利技术提供一种α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物，其结构如式Ⅰ或式Ⅱ所示：
[0008][0009]标示碳序号的式Ⅰ如下所示：
[0010][0011]相应地，本专利技术还提供所述的α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物的制备方法，包括如下步骤：A)菌种活化：取出保藏的腐生真菌Neohelicosporiumgriseum，接种，静置培养后，备用；B)发酵种子液制备：将步骤A)活化后的菌落切碎后，接种于灭菌后的液体培养基中培养8～12d；
[0012]C)接种：采用固体发酵方式，每个发酵袋装入大米50
‑
100份、水50
‑
100份，高压蒸汽灭菌后接种步骤B)所得发酵种子液，静置培养90
‑
110d后得到发酵培养基；
[0013]D)萃取：用乙酸乙酯/甲醇混合溶剂浸泡步骤C)所得发酵培养基，搅拌，离心，收集上清液于旋转蒸发仪中回收溶剂，得到粗浸膏；
[0014]E)分离纯化：将步骤D)所得粗浸膏经层析分离，得到如式Ⅰ或式Ⅱ所示的α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物；所述层析分离方法包括硅胶柱层析法、凝胶柱层析法和半制备高效液相色谱法。
[0015]优选地，所述液体培养基由如下质量份数的组分制得：麦芽糖18
‑
22份、谷氨酸钠8
‑
12份、磷酸二氢钾0.4
‑
0.6份、硫酸镁0.2
‑
0.4份、葡萄糖9
‑
11份、酵母粉2.5
‑
3.5份、甘露醇18
‑
20份、水950
‑
1050份。
[0016]优选地，所述乙酸乙酯/甲醇混合溶剂由乙酸乙酯和甲醇按8
‑
12:1的体积比组成。
[0017]优选地，所述步骤E)包括：用二氯甲烷/甲醇混合溶剂溶解所述步骤D)所得粗浸膏，与硅胶按1:1.4
‑
1.6的质量比混合均匀，待溶剂挥发后得到河沙状样品，该样品作为一次上柱样品，备用；称取硅胶粉装入分离柱中，让硅胶粉缓缓下沉直至不再下沉时，加入所述一次上柱样品，分别采用石油醚/乙酸乙酯进行梯度洗脱，每个梯度洗脱2
‑
3个柱体积，每480
‑
520mL洗脱溶剂为一份进行收集，每份洗脱样品经薄层层析点板，使用石油醚乙酸乙酯按100:0～0:100进行梯度洗脱，每个梯度洗脱2
‑
3个柱体积，每480
‑
520mL洗脱溶剂为一份进行收集，每份洗脱样品经薄层层析点板，使用石油醚乙酸乙酯体系展开，TLC分析，合并斑点颜色和R
f
值均一致的相同组分，回收溶剂，得到20个组分，将在254nm下呈红色斑点且365nm下显鲜黄色荧光的组分15用二氯甲烷/甲醇混合溶剂溶解，过SephadexLH
‑
20柱，甲醇洗脱，每个馏份收集9
‑
11mL，再用薄层层析点板，使用石油醚乙酸乙酯体系展开，TLC分析，合并斑点颜色和R
f
值均一致的相同组分，回收溶剂，得到4个组分，将在254nm下呈红色斑点
且365nm下显鲜黄色荧光的组分15
‑
3用甲醇溶解后，过半制备型RP18柱，甲醇/水以58
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物，其特征在于：其结构如式Ⅰ或式Ⅱ所示：2.根据权利要求1所述的α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：A)菌种活化：取出保藏的腐生真菌Neohelicosporium griseum，接种，静置培养后，备用；B)发酵种子液制备：将步骤A)活化后的菌落切碎后，接种于灭菌后的液体培养基中培养8～12d；C)接种：采用固体发酵方式，每个发酵袋装入大米50
‑
100份、水50
‑
100份，高压蒸汽灭菌后接种步骤B)所得发酵种子液，静置培养90
‑
110d后得到发酵培养基；D)萃取：用乙酸乙酯/甲醇混合溶剂浸泡步骤C)所得发酵培养基，搅拌，离心，收集上清液于旋转蒸发仪中回收溶剂，得到粗浸膏；E)分离纯化：将步骤D)所得粗浸膏经层析分离，得到如式Ⅰ或式Ⅱ所示的α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物；所述层析分离方法包括硅胶柱层析法、凝胶柱层析法和半制备高效液相色谱法。3.根据权利要求2所述的α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物的制备方法，其特征在于：所述液体培养基由如下质量份数的组分制得：麦芽糖18
‑
22份、谷氨酸钠8
‑
12份、磷酸二氢钾0.4
‑
0.6份、硫酸镁0.2
‑
0.4份、葡萄糖9
‑
11份、酵母粉2.5
‑
3.5份、甘露醇18
‑
20份、水950
‑
1050份。4.根据权利要求2所述的α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物的制备方法，其特征在于：所述乙酸乙酯/甲醇混合溶剂由乙酸乙酯和甲醇按8
‑
12:1的体积比组成。5.根据权利要求2所述的α
‑
萘酮衍生物二聚体类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤E)包括：用二氯甲烷/甲醇混合溶剂溶解所述步骤D)所得粗浸膏，与硅胶按1:1.4
‑
1.6的质量比混合均匀，待溶剂挥发后得到河沙状样品，该样品作为一次上柱样品，备用；称取硅胶粉装入分离柱中，让硅胶粉缓缓下沉直至不再下沉时，加入所述一次上柱样品，分别采用石油醚/乙酸乙酯按100:0～0:100进行梯度洗脱，每个梯度洗脱2
‑
3个柱体积，每480
‑
520mL洗脱溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：张丽娟，卢永仲，马建，杨明飞，马小彦，肖兴娟，
申请(专利权)人：贵州理工学院，
类型：发明
国别省市：