本发明专利技术公开了一种可规模化生产的蜂蛹虫草的培育方法，属珍贵食用菌人工栽培技术领域，选用冷冻的蜜蜂在成熟幼虫期至变态期的各日龄蛹体为培养基主原料，通过常压灭菌或高压灭菌制作培养基，采用移液枪喷射法，这样每小时接种量是现有技术的20倍，蜂蛹虫草培养基染菌成功率可达98％以上，这样就解决了目前靠手工注射法接种速度慢，费工费时，染菌率差的弊端，且染菌期时间可缩短一周以上，蜂蛹虫草单瓶产量是现有技术的2倍多，安全性能高，有利于规模化生产。本发明专利技术培育出的蜂蛹虫草活性成分虫草素含量很高、药用价值大，发展前景广阔，不仅能带动更多养蜂人创收致富，还开辟了名贵药食用菌产业化生产的又一片天空。食用菌产业化生产的又一片天空。
【技术实现步骤摘要】
一种可规模化生产的蜂蛹虫草的培育方法
[0001]本专利技术涉及一种可规模化生产的蜂蛹虫草的培育方法，属于珍稀药使用菌的人工栽培
技术介绍
[0002]冬虫夏草是名贵中药材，自古以来一直被人们视为滋补中的瑰宝，随着人们生活水平的提高，健康养生意识的增强，对虫草需求量剧增。由于野生资源日渐枯竭且价格昂贵，因此，在上世纪八十年代，人们开始开发冬虫夏草替代品蛹虫草。2009年，丹阳九仙草生物科技有限公司科研人员陆九妺等人，经过不断地实践，以蜜蜂蜂蛹为虫草培养基主原料，成功培育出了蜂蛹虫草(授权公告号CN 104054504 B)。
[0003]蜂蛹又名蜂胚、蜂仔，它不经过任何加工，不受任何污染，含有丰富的高蛋白质、低脂肪、少量卵磷脂、多种维生素和微量元素，是食物中的珍品，具有提高免疫力、利尿保肾、补血益气、缓解疼痛的功效。由于它蛋白质含量高，很多人在食用过程中极易过敏，因此，蜂农很少主动生产蜂蛹。
[0004]此项专利技术采用人工培育虫草工艺，在适宜的温、光、湿、氧等环境严格调控与呵护下，将蜂蛹中易过敏的超级活性营养物质进行了生物能量转换，使之成为一种高品质、老少皆宜的药用级食用菌类蛹虫草。它含有大量的虫草素、虫草酸、腺苷、虫草多糖、蛋白质、SOD等活性成份，是高级食用菌虫草领域的佼佼者，在提高人体免疫力、润肺强肾、防癌抗瘤、延年益寿等方面效果显著。
[0005]此项专利技术拓宽了蛹虫草栽培领域，提供了一种创新型培育蛹虫草的方法，并提高了蛹虫草的功能成分含量。由于蜂蛹体积小、体质嫩，此项专利技术以新鲜的成熟蜂蛹作为宿主，在培育过程中，易感染杂菌，导致发黑、变质，而且此项专利技术采用手工注射法，通过臭氧灭菌制作培养基，费工费时、安全染菌率低，所以不利于规模化生产。
技术实现思路
[0006]本专利技术为了解决现有技术中的不足而提供一种可规模化生产的蜂蛹虫草的培育方法，选用冷冻的蜜蜂成熟幼虫期至变态期的各日龄蛹体为培养基主原料，安全性能高，不会受到环境等因素的影响；采用移液枪喷射法，通过常压灭菌或高压灭菌制作培养基，每小时接种的蜂蛹数量是现有技术的20倍，蜂蛹虫草染菌率可达98％以上，虫体发满菌时间缩短一周以上，蜂蛹虫草产量是现有技术的2倍多，便于规模化生产，该方法具有新颖的创造性和广泛的应用价值。
[0007]本专利技术提供了一种可规模化生产的蜂蛹虫草的培育方法，包括以下步骤：
[0008](1)选择蜂群群势强盛的蜂蛹作为将要培养的蛹虫草宿主；
[0009](2)优选近期保存的蛹虫草试管原种；
[0010](3)液体蛹虫草菌种的制备：
[0011]a液体蛹虫草菌种的配方：蜂蜜20g、蛋白胨8g、硫酸镁0.7g、磷酸二氢钾1.5g、水
1000ml；
[0012]b制备方法：将上述配方放入1000ml纯净水中，混合调匀，再加入蛋清打散，灌装至玻璃量杯中，采用0.137MPa、121℃灭菌30～40min，再静置10～12小时；
[0013]c将静置后的溶液，用十六层无菌纱布过滤、提纯，然后灌装继续灭菌30～40min；
[0014]d将优选的蛹虫草试管原种见光转色24～48小时，然后接入上述c中，在18～24℃静置避光培养36h，在温度17～24℃、155r/min，避光摇床培养5～7天，当液体培养基中布满菌丝后取出置于4℃冰箱中备用；
[0015](4)培养基的制作：以冷冻的蜜蜂成熟幼虫期至变态期的各日龄蛹体为原料，分装于培养瓶中，每瓶30g。采用耐高温聚丙烯薄膜封口，采用常压灭菌240～360min或高压灭菌35～45min，冷却后置于无菌室中备用；
[0016](5)接种、培养：将备用液体菌种采用移液枪操作喷射到培养瓶中，每瓶接种1.5～4mL，每只培养瓶中喷射1～2次液体菌种，封口后放入温度为15～23℃、湿度为60～65％的培养室中避光培养；
[0017](6)见光培养：
[0018]a培养室的控制条件为：18～22℃、600～800lx、湿度为65％～85％，持续18～40h见光培养；
[0019]b培养基菌丝转黄色后，采用无菌水扫除培养基表面菌丝；
[0020](7)催草：先在封口的塑膜上用医用一次性5号注射器针头扎3～5个孔作为透气孔，催草阶段培养室的控制条件为：光照时间14～16h，培养温度为20～24℃，湿度为65％～85％；夜间暗光6～10h，培养温度为15～17℃，光照与暗室温差为7～9℃，光照为白光光照：800～1000lx；2～4天；
[0021](8)当蛹虫草子实体长至0.5～1cm高时，调整光照强度为200～400lx，培养温度为18～22℃，湿度为65％～85％，每天见光12～14h；
[0022](9)收获：当蛹虫草子实体长至5～8cm，可以采收整株蛹虫草，采收后晾1～2天，然后45～60℃的温度条件下烘干，至蛹虫草全株含水量达8％以下，再收藏于冰箱中冷冻；
[0023]优选地，在步骤(1)选择蜂蛹为：冷冻的蜜蜂成熟幼虫期至变态期的各日龄蛹体；
[0024]优选地，在步骤(2)中，优选近期保存的蛹虫草试管原种，并在接种前48小时见光，选择转色较好的备用；
[0025]优选地，在步骤(3)a中，选择纯天然成熟蜂蜜；
[0026]优选地，在步骤(3)b中，将步骤(3)a中的配方放入1000ml纯净水中，混合调匀，再加入2个蛋清充分搅拌均匀，灌装至2000ml的玻璃量杯中，采用0.137MPa、121℃灭菌30～40min，再静置10～12小时；
[0027]优选地，在步骤(3)c中，将静置后的溶液，用十六层无菌纱布过滤、提纯，然后分别灌装至5只500ml的三角瓶中，继续采用0.137MPa、121℃灭菌30～40min，待冷却至95～85℃时快速取出送至接种室；
[0028]优选地，在步骤(3)d中，将优选的蛹虫草试管原种见光转色24～48小时，用75％的酒精擦拭试管外壁消毒，然后在无菌室的超净工作台，用移植铲从试管中挑取3～5块0.2
×
0.2mm的菌丝块接入步骤(3)c中，在18～24℃静置避光培养36h，在温度17～24℃、155r/min，避光摇床培养5～7天，当液体培养基中布满菌丝后取出置于4℃冰箱中备用；
[0029]优选地，在步骤(4)中，以蜂蛹为原料，分装于高10cm、直径为7cm的培养瓶中，每瓶30g。采用耐高温聚丙烯薄膜封口，常压灭菌240～360min或高压灭菌35～45min，冷却后置于无菌室中备用；
[0030]优选地，在步骤(5)中，将备用液体菌种采用移液枪操作注入到培养瓶中，每瓶接种1.5～4mL，每只培养瓶中喷射1～2次液体菌种，封口后放入温度为15～23℃、湿度为60～65％的培养室中避光培养12～15天；
[0031]优选地，在步骤(6)a中，培养室的控制条件为：18～22℃、白光光照600～800lx、湿度为65％～85％，持续18～40h见光培本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种可规模化生产的蜂蛹虫草的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选择蜂群群势强盛的蜂蛹作为将要培养的蛹虫草宿主；(2)优选近期保存的蛹虫草试管原种；(3)液体蛹虫草菌种的制备：a液体蛹虫草菌种的配方：蜂蜜20g、蛋白胨8g、硫酸镁0.7g、磷酸二氢钾1.5g、水1000ml；b制备方法：将上述配方放入1000ml纯净水中，混合调匀，再加入蛋清打散，灌装至玻璃量杯中，采用0.137MPa、121℃灭菌30～40min，再静置10～12小时；c将静置后的溶液，用十六层无菌纱布过滤、提纯，然后灌装继续灭菌30～40min；d将优选的蛹虫草试管原种见光转色24～48小时，然后接入上述c中，在18～24℃静置避光培养36h，在温度17～24℃、155r/min，避光摇床培养5～7天，当液体培养基中布满菌丝后取出置于4℃冰箱中备用；(4)培养基的制作：以冷冻的蜜蜂成熟幼虫期至变态期的各日龄蛹体为原料，分装于培养瓶中，每瓶30g。采用耐高温聚丙烯薄膜封口，采用常压灭菌240～360min或高压灭菌35～45min，冷却后置于无菌室中备用；(5)接种、培养：将备用液体菌种采用移液枪操作喷射到培养瓶中，每瓶接种1.5～4mL，每只培养瓶中喷射1～2次液体菌种，封口后放入温度为15～23℃、湿度为60～65％的培养室中避光培养；(6)见光培养：a培养室的控制条件为：18～22℃、600～800lx、湿度为65％～85％，持续18～40h见光培养；b培养基菌丝转黄色后，采用无菌水扫除培养基表面菌丝；(7)催草：先在封口的塑膜上用医用一次性5号注射器针头扎3～5个孔作为透气孔，催草阶段培养室的控制条件为：光照时间14～16h，培养温度为20～24℃，湿度为65％～85％；夜间暗光6～10h，培养温度为15～17℃，光照与暗室温差为7～9℃，光照为白光光照：800～1000lx；2～4天；(8)当蛹虫草子实体长至0.5～1cm高时，调整光照强度为200～400lx，培养温度为18～22℃，湿度为65％～85％，每天见光12～14h；(9)收获：当蛹虫草子实体长至5～8cm，可以采收整株蛹虫草，采收后晾1～2天，然后45～60℃的温度条件下烘干，至蛹虫草全株含水量达8％以下，再收藏于冰箱中冷冻。2.根据权利要求1所述的蜂蛹虫草的培育方法，其特征在于：所述的步骤(1)中，选用冷冻的蜜蜂成熟幼虫期至变态期的各日龄蛹体。3.根据权利要求1所述的蜂蛹虫草的培育方法，其特征在于：所述的步骤(2)中，优选近期保存的蛹虫草试管原种，并在接种前48小时见光，选择转色较好的备用。4.根据权利要求1所述的蜂蛹虫草的培育方法，其特征在于：在步骤(3)a中，选择纯天然成熟蜂蜜；在步骤(3)b中，将步骤(3)a中的配方放入1000ml纯净水中，混合调匀，再加入2个蛋清充分搅拌均...
【专利技术属性】
技术研发人员：陆九妹，贡成良，冷雁，
申请(专利权)人：丹阳九仙草生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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