一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法技术

本发明专利技术提供一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法，涉及氢醌酯衍生物制备技术领域。一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法，具体包括以下步骤：S1.化合物1

【技术实现步骤摘要】
一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法


[0001]本专利技术涉及氢醌酯衍生物制备
，具体为一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法。

技术介绍

[0002]酚类化合物氢醌(hydroquinone)，亦称对苯二酚，是一种用途广泛的中间体，并在感光材料、染料、颜料、橡胶、塑料、涂料、医药制造以及化学检验等领域应用广泛。氢醌同时也是一种有效抑制黑色素形成的物质，是人们最早认识的皮肤脱色剂，临床作为皮肤脱色剂用于治疗色素增多性皮肤病(如黄褐斑)已有近50年的历史。氢醌的脱色机制是其分子结构与酪氨酸酶底物酪氨酸类似，从而通过竞争性地抑制酪氨酸酶活性来达到减少黑色素形成的效果，但氢醌的外用制剂化学性质不稳定易氧化变色，且有引起皮肤永久性白斑、褐黄病的报告，限制了这类药物的临床应用和开发。
[0003]酪氨酸酶在昆虫体内也称为酚氧化酶(phenoloxidase)，对昆虫的变态发育和免疫系统起着重要作用。酚氧化酶催化完成的“酯鞣化”作用对于具有“外骨骼”的昆虫生命过程至关重要，可以促进其表皮的硬化和黑化、蛹壳鞣化，参与伤害防御、加速伤口的愈合，产生具有细胞毒作用的氧自由基和具有潜在细胞毒作用的半醌及三羟酚，进一步增强寄主的防御能力。因此可将酚氧化酶作为害虫控制剂中的一个重要靶标，通过抑制害虫酚氧化酶活性，从而降低昆虫表皮的保护功能，减弱免疫反应，使害虫生命力“弱化”或死亡，表皮“软化”畸形或丧失防御能力从而达到合理控制害虫的目的。
[0004]氢醌酯衍生物因具有更高的稳定性，更好的脂溶性而受到广泛关注。文献报道氢醌单脂肪酸酯是一类很好皮肤脱色剂，氧化稳定性良好，易被皮肤吸收，甚至当其脂肪酸链碳原子数小于8时，脱色性能优于氢醌。此外，文献报道氢醌的O
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烷基衍生物4
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羟基二苯醚可用于合成卫生农药蚊蝇醚，是一种新型昆虫生长调节剂，具有较高的活性且药效长，对蚊蝇幼虫有很强的抗蜕皮作用，从而能抑制幼虫的羽化。
[0005]基于氢醌优异的酪氨酸酶抑制活性，针对其不稳定在空气中见光易变成褐色、碱性溶液中氧化更快，脂溶性较差等不足，因此，本专利技术提供了一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法，为发展新型害虫控制剂提供重要线索。

技术实现思路

[0006](一)解决的技术问题
[0007]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法，解决了现有的制备方法其产物不够稳定，毒性较高的问题。
[0008](二)技术方案
[0009]为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法，具体包括以下步骤：
[0010]S1.化合物1
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6的合成
[0011]精确称取氢醌10mmol，氩气作为保护气体的条件下，0℃溶解到25mL二氯甲烷中，加入三乙胺10mmol，反应5min后缓慢加入酰氯10
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20mmol，反应0.5
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1小时，反应结束后减压除去二氯甲烷，用乙酸乙酯和去离子水萃取3次，取乙酸乙酯层，减压旋蒸除去乙酸乙酯，用硅胶进行逐层层析，洗脱剂为石油醚和乙酸乙酯；
[0012]S2.化合物7和8的合成
[0013]精确称取氢醌10mmol，氩气作为保护气体的条件下，0℃溶解到25mL二氯甲烷中，加入三乙胺10mmol，反应5min后缓慢加入酰氯20
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35mmol，反应1.5
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2小时，反应结束后减压除去二氯甲烷，用乙酸乙酯和去离子水萃取3次，取乙酸乙酯层，减压旋蒸除去乙酸乙酯，用硅胶进行逐层层析，洗脱剂为石油醚和乙酸乙酯；
[0014]S3.化合物1
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8的酪氨酸酶活性抑制率测定
[0015]首先以pH6.8、50mmol/LPBS缓冲液配制酪氨酸酶溶液和样品溶液，然后在96孔板中，依次加入0.1mg/mL的酪氨酸40μL、PBS缓冲液80μL、不同浓度的样品溶液40μL和60U/mL的酪氨酸酶40μL，37℃孵育30分钟后，用酶标仪在475nm波长处检测，以PBS缓冲液为空白组；
[0016]S4.化合物2的酪氨酸酶活性抑制动力学研究
[0017]首先以pH6.8、50mmol/LPBS缓冲液配制1、2、3、4mol/L的化合物2溶液和0.25、0.5、1、1.5、2mmol/LL
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酪氨酸底物溶液；然后在96孔板中，依次加入0.1mg/mL的酪氨酸40μL、PBS缓冲液80μL、不同浓度的化合物2溶液40μL和60U/mL的酪氨酸酶40μL，37℃孵育30分钟后，用酶标仪在475nm波长处检测。
[0018]优选的，所述步骤S3中氢醌在样品浓度100μmol/L时抑制率最大，达78.90％。
[0019]优选的，所述步骤S3中化合物1在样品浓度75μmol/L时抑制率最大，达64.90％。
[0020]优选的，所述步骤S3中化合物2在样品浓度2.5μmol/L时抑制率最大，达90.10％。
[0021]优选的，所述步骤S3中化合物3在样品浓度100μmol/L时抑制率最大，达80.10％。
[0022]优选的，所述步骤S3中化合物4在样品浓度25μmol/L时抑制率最大，达61.50％。
[0023]优选的，所述步骤S3中化合物5在样品浓度10μmol/L时抑制率最大，达59.80％，所述化合物6在样品浓度200μmol/L时抑制率最大，达50.15％，所述化合物7在样品浓度250μmol/L时抑制率最大，达41.20％。
[0024]优选的，所述步骤S3中化合物8在样品浓度100μmol/L时抑制率最大，达73.90％。
[0025](三)有益效果
[0026]本专利技术提供了一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法。具备以下有益效果：
[0027]本专利技术提供了一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法，通过一步法合成氢醌酯衍生物，以两组分氢醌和酰氯为原料，在三乙胺的催化下，以二氯甲烷为溶剂，反应0.5
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2小时，反应结束后将反应液除溶剂、萃取、浓缩得到粗产物，进一步用柱色谱层析分离纯化即得目的化合物，本专利技术还同时提供了上述氢醌酯衍生物的用途，用作酪氨酸酶抑制剂，可应用于农业害虫防治中本专利技术目的产物对氢醌酯衍生物，较氢醌有更好的稳定性，有更低的毒性，对酪氨酸酶具有良好的抑制作用。
附图说明
[0028]图1为本专利技术的结构通式；
[0029]图2为本专利技术衍生化合物1的分子结构示意图；
[0030]图3为本专利技术衍生化合物2的分子结构示意图；
[0031]图4为本专利技术衍生化合物3的分子结构示意图；
[0032]图5为本专利技术衍生化合物4的分子结构示意图；
[0033]图6为本专利技术衍生化合物5的分子结构示意图；
[0034]图7为本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有酪氨酸酶抑制活性的氢醌酯衍生物制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：S1.化合物1
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6的合成精确称取氢醌10mmol，氩气作为保护气体的条件下，0℃溶解到25mL二氯甲烷中，加入三乙胺10mmol，反应5min后缓慢加入酰氯10
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20mmol，反应0.5
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1小时，反应结束后减压除去二氯甲烷，用乙酸乙酯和去离子水萃取3次，取乙酸乙酯层，减压旋蒸除去乙酸乙酯，用硅胶进行逐层层析，洗脱剂为石油醚和乙酸乙酯；S2.化合物7和8的合成精确称取氢醌10mmol，氩气作为保护气体的条件下，0℃溶解到25mL二氯甲烷中，加入三乙胺10mmol，反应5min后缓慢加入酰氯20
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35mmol，反应1.5
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2小时，反应结束后减压除去二氯甲烷，用乙酸乙酯和去离子水萃取3次，取乙酸乙酯层，减压旋蒸除去乙酸乙酯，用硅胶进行逐层层析，洗脱剂为石油醚和乙酸乙酯；S3.化合物1
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8的酪氨酸酶活性抑制率测定首先以pH6.8、50mmol/LPBS缓冲液配制酪氨酸酶溶液和样品溶液，然后在96孔板中，依次加入0.1mg/mL的酪氨酸40μL、PBS缓冲液80μL、不同浓度的样品溶液40μL和60U/mL的酪氨酸酶40μL，37℃孵育30分钟后，用酶标仪在475nm波长处检测，以PBS缓冲液为空白组；S4.化合物2的酪氨酸酶活性抑制动力学研究首先以pH6.8、50mmol/LPBS缓冲液配制1、2、3、4mol/L的化合物2溶液和0.25、0.5、1、1.5、2mmol/LL
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酪氨酸底物溶液；然后...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓琴，谢东，陈保森，赵平，符汶淦，解思达，姜倩，朱国磊，
申请(专利权)人：西南林业大学，
类型：发明
国别省市：