一种胆囊癌类器官异种移植瘤模型的构建方法及应用技术

技术编号:37308034 阅读:41 留言:0更新日期:2023-04-21 22:52
本发明专利技术涉及类器官领域,公开了一种胆囊癌类器官异种移植瘤模型的构建方法和应用,构建方法包括以下步骤:将肿瘤组织消化、清洗、红细胞裂红后,加入基质胶后,加入培养基培养得到原代胆囊癌类器官;将原代胆囊癌类器官消化、清洗、红细胞裂红后,加入基质胶,孵育、离心后,加入传代培养基培养;所述步骤S1或S2的培养基为5~25mM HEPES,15~25nM GlutaMAX,1~3%B27,50~200ng/mL A83

【技术实现步骤摘要】
一种胆囊癌类器官异种移植瘤模型的构建方法及应用


[0001]本专利技术涉及类器官领域,尤其涉及一种胆囊癌类器官异种移植瘤模型的构建方法及应用。

技术介绍

[0002]胆囊癌具有高度的侵袭性和化疗耐药性,缺少有效的化疗和靶向药治疗方案,寻找早期高敏靶标对胆囊癌的预防和治疗尤为重要,在胆囊癌中发生高频突变的有erbB、IDH、PIK3CA等。
[0003]目前没有接近于临床患者来源的胆囊癌模型,常用的模型为基于患者来源的胆囊癌异种移植物(PDX)模型,PDX虽然能够保留肿瘤的部分生物学特征,但存在成瘤周期长、失败率、无法解决穿刺等组织较小的样本建模的问题,影响胆囊癌的临床转化和基础研究。
[0004]类器官移植瘤小鼠模型(PDOX)是通过把体外扩增的类器官移植到免疫缺陷鼠建立的人源异种移植模型,可有效提高建模速度和成功率。PDOX模型主要集中在肺癌、卵巢癌、食管癌等,目前还没有含有不同突变、同步性好的胆囊癌PDOX模型。

技术实现思路

[0005]本专利技术的主要目的在于解决现有技术胆囊癌PDOX模型建模速度慢和成功本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胆囊癌类器官异种移植瘤模型的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括以下步骤:S1,将肿瘤组织消化、清洗、红细胞裂红后,加入基质胶后,加入培养基培养得到原代胆囊癌类器官;S2,将原代胆囊癌类器官消化、清洗、红细胞裂红后,加入基质胶,孵育、离心后,加入传代培养基培养;所述步骤S1或S2的培养基为5~25mM HEPES,15~25nM GlutaMAX,1~3%B27,50~200ng/mL A83

01,20~80ng/mL EGF,80~120ng/mL Noggin,300~600ng/mL commercial R

spondin1,5~15mM Y

27632,0.5~2%P/S,50~150μg/mL Primocin,200

300nM SB202190,10~15ng/mL PGE2,10~30μg/mL FGF

7,10~30μg/mL FGF

10,基础液为Advanced DMEM/F12。2.根据权利要求1所述的一种胆囊癌类器官异种移植瘤模型的构建方法,其特征在于,所述将肿瘤组织消化的消化液配方为1~3%青霉素/链霉素,0.05~0.2mg/mL庆大霉素,0.3~0.8%制酶菌素,1~4mg/mL胶原蛋白酶A,0.05~0.1mg/mL透明质酸酶以及基础液补充余量。3.根据权利要求1所述的一种胆囊癌类器官异种移植瘤模型的构建方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:王积栋冯飞灵许凤康嘉伟
申请(专利权)人:上海万何圆生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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