一种用于罗氏沼虾nanos1基因分析的引物组及方法技术

本发明专利技术提供了一种用于罗氏沼虾nanos1基因分析的引物组及方法，涉及罗氏沼虾生殖相关基因的生物技术领域。本发明专利技术获得的Nanos1基因，其cDNA序列长2811bp，编码243个氨基酸。nanos1在卵巢中特异表达，且nanso1mRNA在未受精卵中表达量最高，显著高于受精后及胚胎发育各期；在胚胎发育期间，受精时期表达最高，显著高于卵裂期且极显著高于胚胎发育后期；该基因在卵裂期的表达水平显著高于囊胚期至幼体期；而囊胚期至幼体之间表达水平较低且无差异。nanos1mRNA在卵原细胞及初级卵母细胞(Oc1，Oc2，Oc3，Oc4)的细胞质中表达。nanos1与罗氏沼虾雌性生殖细胞发育有着密切的关系，在罗氏沼虾的生殖发育中发挥着重要的作用，为罗氏沼虾生殖发育、性别鉴定等研究提供了理论依据和思路。路。路。

【技术实现步骤摘要】
一种用于罗氏沼虾nanos1基因分析的引物组及方法


[0001]本专利技术涉及罗氏沼虾生殖相关基因的生物
，特别涉及用于罗氏沼虾nanos1基因分析的引物组及方法。

技术介绍

[0002]罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)隶属长臂虾科(Palaemonidae)、沼虾属(Macrobrachium)。原产于东南亚，上世纪70年代末引进国内，因其生长快、个体大且风味鲜美，逐渐成为淡水养殖的主要品种之一。与其他甲壳类动物一样，罗氏沼虾也表现性别两态性：同龄雌、雄虾个体的大小、生长速度相差悬殊，在相同养殖条件下雄虾生长速度较雌虾快，性成熟后的个体平均体重约是雌虾的两倍；此外，经研究发现，体重仅为6克的雌虾和仅2克的雄虾也有部分个体达性成熟，这些性早熟个体提前产生配子、交配繁殖会导致大量的能量损耗，造成个体发育停滞、大小不一。因此，开展罗氏沼虾生殖发育及其调控机理的研究对罗氏沼虾产业的发展有重大意义。、nanos是一种RNA结合蛋白，具有两个高度保守的锌指结构域(CCHC)，其在生殖发育中起着至关重要的作用。作为一个具本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于罗氏沼虾nanos1基因分析的引物组，其特征在于，所述引物组包括半定量PCR扩增引物组和荧光定量PCR扩增引物组；所述半定量PCR扩增引物组由2对引物组成，分别为nanos1 F、nanos1R、β
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actin F、β
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actin R，所述nanos1 F、nanos1 R、β
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actin F、β
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actin R的核苷酸序列如SED ID NO.1～4所示；所述荧光定量PCR扩增引物组由2对引物组成，分别为nanos1 QF、nanos1 QR、β
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actin QF、β
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actin QR，所述nanos1 QF、nanos1 QR、β
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actin QF、β
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actin QR的核苷酸序列如SED ID NO.5～8所示；所述nanos1 F、nanos1 R还用于罗氏沼虾nanos1基因的PCR扩增和原位杂交。2.一种权利要求1所述用于罗氏沼虾nanos1基因分析的引物组的获取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)测序获得罗氏沼虾转录组数据，筛选出nanos1基因的预测序列；(2)随机选择罗氏沼虾健康个体的性腺，提取总RNA，逆转录后获得cDNA，验证筛选出的罗氏沼虾nanos1基因；(3)半定量PCR扩增引物组的设计：根据步骤(2)所得的nanos1基因，设计上下游特异引物及β
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actin内参引物，得到罗氏沼虾nanos1基因的半定量PCR扩增引物组；(4)荧光定量PCR扩增引物组的设计：根据步骤(2)所得的nanos1基因，进行荧光定量PCR扩增引物组的设计，得到罗氏沼虾荧光定量PCR扩增引物组。3.一种用于罗氏沼虾nanos1基因分析的方法，其特征在于，采用权利要求1所述的用于罗氏沼虾nanos1基因分析的引物组。4.根据权利要求3所述的用于罗氏沼虾na...

【专利技术属性】
技术研发人员：于凌云，王亚坤，朱新平，周南，洪坤浩，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院珠江水产研究所，
类型：发明
国别省市：