【技术实现步骤摘要】
用于定量检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对及检测方法
[0001]本申请主张2022年04月06日申请的中国专利申请202210356503.7的优先权,上述说明书的全部内容为本申请的参考文献。
[0002]本专利技术涉及生物检测领域,尤其涉及用于定量检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对及检测方法。
技术介绍
[0003]生物制品中的疫苗、重组蛋白药、抗体药等产品多采用连续传代的动物细胞株表达生产。MDCK(Madin
‑
Darby canine kidney)细胞系是一种连续传代的犬肾细胞系,具有病毒感染效率高、增殖快、不易变异等优点,目前欧洲药典已经批准使用此细胞系生产流感疫苗且已有相关疫苗上市。诺华(Novartis)公司分别在2007年和2009年推出MDCK细胞基质的流感疫苗Optaflu和甲型H1N1流感疫苗,相比传统的鸡胚接种培养技术,MDCK细胞培养技术大大节约了生产时间。
[0004]但是,市场对与使用MDCK细胞来生产流感疫苗仍存有顾虑。因为有文献报道,MD ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.用于定量检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对,其特征在于,至少包含4组引物对;其中:各引物对中的正向引物和反向引物分别特异性结合于MDCK细胞基因组DNA 上SEQ ID NO:1所示区段;各组引物对扩增获得的扩增产物的长度分别为100bp以下、100
‑
200bp、200
‑
500bp以及500bp以上。2.根据权利要求1所述用于定量检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对,其特征在于,所述引物对选自以下引物对:第一引物对,其中的正向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第774
‑
816位;所述反向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第832
‑
876位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为74
‑
94bp;第二引物对,其中的正向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第732
‑
773位;所述反向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第850
‑
893位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为132
‑
152bp;第三引物对,其中的正向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第746
‑
786位;所述反向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第931
‑
969位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为194
‑
214bp;第四引物对,其中的正向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第746
‑
786位;所述反向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第1227
‑
1269位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为494
‑
514bp。3.根据权利要求1或2中任意一项用于定量检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对,其特征在于,所述引物对选自以下引物对:第一引物对,其中的正向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第784
‑
806位;所述反向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第842
‑
866位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为84bp;第二引物对,其中的正向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第742
‑
763 位;所述反向引物结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第860
‑
883位,并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为142bp;第三引物...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴婉欣,袁小铃,宗伟英,吴晓双,
申请(专利权)人:湖州申科生物技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。