【技术实现步骤摘要】
PCR试剂盒、反应体系及方法
[0001]本专利技术涉及分子生物学
,特别是涉及一种PCR试剂盒、反应体系及方法。
技术介绍
[0002]真菌(学名:Fungi),是一种具真核的、产孢的、无叶绿体的真核生物。包含霉菌、酵母、蕈菌以及其他人类所熟知的菌菇类,目前已经发现了十二万多种真菌。与人类的健康密切相关,同时某些真菌还能被安全地利用于食品生产和生物化工领域。
[0003]真菌分子生物学研究是微生物研究的一个重要领域,但由于真菌的细胞壁结构特殊,抗逆性强,使得真菌的核酸提取尤其困难,使用传统的真菌基因组提取方法较为繁琐。传统的真菌DNA提取方式耗时费力,而市面上通过裂解液裂解后直接PCR的直扩法虽然操作简单,但成功率较低。现在市面上相关产品的裂解液还存在以下问题:裂解的上清中或多或少的都会存在PCR的抑制物,导致PCR反应的成功率不高和PCR产量较低。目前已有一些报道提供了裂解液和PCR预混液的配方,都可用于PCR直扩反应,成功率较高。如CN115181740A记载的一种裂解液和CN115109844A记载的一 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种PCR试剂盒,其特征在于,包含裂解液,和/或,PCR预混液;所述裂解液包含水以及10mM~100mM Tris
‑
HCl、0.5mM~1mM Na2EDTA和0.05%~0.25%(w/v)SDS;所述PCR预混液包含水以及亲和体、Taq DNA聚合酶、Mg
2+
、dNTP、Tris
‑
HCl、NH
4+
、K
+
、表面活性剂、甜味剂、dNTP、甜菜碱、牛血清白蛋白、海藻糖和甘油。2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述PCR预混液中亲和体和Taq DNA聚合酶的浓度比为1:(0.6~10)。3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述PCR预混液包含水以及100ng/μL~500ng/μL亲和体、Taq DNA聚合酶、Mg
2+
、dNTP、Tris
‑
HCl、NH
4+
、K
+
、表面活性剂、甜味剂、dNTP、甜菜碱、牛血清白蛋白、0.01M~0.1M海藻糖和0.5%~2%甘油。4.根据权利要求1~3任一项所述的试剂盒,其特征在于,所述PCR预混液包含40mM~60mM Tris
‑
HCl、1mM~4mM Mg
2+
、10mM~30mM NH
4+
...
【专利技术属性】
技术研发人员:杜军,汪江涵,曹文刚,宋辉,樊浩,许净,
申请(专利权)人:湖北擎科生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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