一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin-AMP2及其编码基因和应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医学领域，具体提供了一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin

【技术实现步骤摘要】
一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2及其编码基因和应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体地说，是一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2及其编码基因和应用。

技术介绍

[0002]2017年，世卫组织公布了急需新型药物的“超级细菌”名单，这些“超级细菌”具有多重抗生素耐药性和致病性。如果没有新型药物的出现，人类将很快进入到无药可用的境地。抗菌肽一直被认为是极具潜力抗生素的替代药物，具有广谱抗菌活性，并且与传统抗生素不同，它可以通过静电作用直接影响细菌细胞膜。细菌不易在短时间内改变细胞膜结构，也就不能产生耐药性。
[0003]目前来源于陆地生物金环蛇的抗菌肽泡腾片Cathelicidins
‑
BF，已进入了临床Ⅰ期，用于治疗细菌性阴道炎。海蛇与陆地蛇类同源，作为药用动物，已被开发成了各种复方制剂，但是对海蛇中的具体成分研究较少。
[0004]本专利技术人通过对青环海蛇进行基因组测序和基因注释，得到了一条Cathelicidins家族抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2及其编码基因，以及该青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2在制备抗感染药物中的应用。
[0006]本专利技术的Hydrostatin
‑r/>AMP2具有盐稳定性和耐热性，并且杀菌作用极强，尤其对耐药细菌具有较好的活性，有望成为新一代临床候选药物。
[0007]本专利技术通过对青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2进行活性研究，发现了Hydrostatin
‑
AMP2对细菌的抑制活性，该抗菌肽在体外能够有效抑制细菌增殖，在抗感染领域具有极大的临床应用前景。
[0008]本专利技术的第一方面，提供了一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2，所述的青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2，具有如下(a)或(b)或(c)或(d)的蛋白质：
[0009](a)如SEQ ID No:1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
[0010](b)将SEQ ID NO:1的氨基酸序列经过取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸残基后所衍生的与SEQ ID NO:1具有相同活性的序列；
[0011](c)将SEQ ID NO:1中的氨基酸序列在N端或C端加上1
‑
10个氨基酸残基后所衍生的与SEQ ID NO:1具有相同活性的序列；
[0012](d)将SEQ ID NO:1中的氨基酸序列在N端或C端连接聚乙二醇进行修饰，所衍生的与SEQ ID NO:1具有相同活性的序列。
[0013]本专利技术的第二方面，提供了一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2的编码基因，为如下(
ⅰ
)或(
ⅱ
)的DNA分子：
[0014](
ⅰ
)如SEQ ID NO:2所示的DNA分子；
[0015](
ⅱ
)在严格条件下与(
ⅰ
)限定的DNA序列杂交且编码所述青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2的DNA分子。
[0016]进一步的，所述的青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2，具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，是一种线性直链多肽，分子量为4198.34道尔顿，等电点为12.34。
[0017]本专利技术的第三方面，提供了上述青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2或者其编码基因在制备抗微生物感染药物中的应用。
[0018]进一步的，所述的抗微生物感染药物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等多种微生物具有抑制或杀灭作用。
[0019]本专利技术还提供了一种抗微生物感染药物，所述药物以青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2为唯一活性成分，或包含青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2的药物组合物。
[0020]进一步的，所述药物与药剂学上的常规药用辅料制成药物制剂。
[0021]进一步的，所述药物制剂为片剂、颗粒剂、分散剂、胶囊剂、滴丸、注射剂、粉针剂或气雾剂。
[0022]本专利技术使用AlphaFold服务器对青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2进行结构和性质分析，发现它具有典型的两亲性和α
‑
螺旋结构；同时使用DBAASP服务器预测青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2的抗菌谱，结果认为它对多种革兰氏阴性菌具有抑制活性。通过微量肉汤稀释法检测青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2对常见菌株的最小抑菌浓度，证明抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2对革兰氏阳性菌和阴性菌都具有较好的抑菌能力；进一步使用结晶紫染色法分析抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2对生物膜的清除和抑制效果，证明Hydrostatin
‑
AMP2不仅可以抑制生物膜的形成，还可以显著根除已形成的成熟生物膜。同时将人血细胞与青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2进行共孵育，结果证明Hydrostatin
‑
AMP2的溶血性极低。因此，青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2可作为活性成分进行抗微生物感染药物的研究。
[0023]本专利技术采用生物信息学分析工具得到编码青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2的氨基酸序列，通过多肽合成仪合成，结构简单，便于制备。Hydrostatin
‑
AMP2毒性低，具有广谱抗菌活性。
[0024]青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2对肺炎克雷伯菌具有明显抑制作用，效果明显优于氨苄青霉素。并且对多种细菌具有活性，有潜力作为抗感染药物的候选药。
附图说明
[0025]图1是青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2的结构预测图；
[0026]图2是Hydrostatin
‑
AMP2的色谱分析结果；
[0027]图3是Hydrostatin
‑
AMP2的质谱分析结果；
[0028]图4是不同浓度的Hydrostatin
‑
AMP2对金黄色葡萄球菌的生物膜抑制效果；
[0029]图5是不同浓度的Hydrostati本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2，其特征在于：所述的青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2，具有如下(a)或(b)或(c)或(d)的蛋白质：(a)如SEQ ID No:1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将SEQ ID NO:1的氨基酸序列经过取代、缺失和/或添加一个或多个氨基酸残基后所衍生的与SEQ ID NO:1具有相同活性的序列；(c)将SEQ ID NO:1中的氨基酸序列在N端或C端加上1
‑
10个氨基酸残基后所衍生的与SEQ ID NO:1具有相同活性的序列；(d)将SEQ ID NO:1中的氨基酸序列在N端或C端连接聚乙二醇进行修饰，所衍生的与SEQ ID NO:1具有相同活性的序列。2.根据权利要求1所述的一种青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2，其特征在于：所述青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，是一种线性直链多肽，分子量为4198.34道尔顿，等电点为12.34。3.一种如权利要求1或2所述的青环海蛇抗菌肽Hydrostatin
‑
AMP2的编码基因，其特征在于：所述编码基因为如下(
ⅰ
)或(
ⅱ
)的DNA分子：(

【专利技术属性】
技术研发人员：陆一鸣，王硕存，潘涵宇，李林雪，樊李明，
申请(专利权)人：上海大学，
类型：发明
国别省市：