本发明专利技术公开了一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021，按蚊伊丽莎白菌(Elizabethkingia anophelis)JX2021菌株已于2022年04月28日保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉)，保藏编号：CCTCC NO:M 2022507。本发明专利技术按蚊伊丽莎白菌JX2021对中华鳖具有强致病性，能够引起中华鳖肝、脾、肺、肠道等组织产生不同程度的病变，引起中华鳖“细菌性败血症”，严重可致死；按蚊伊丽莎白菌JX2021还可以用于抗按蚊伊丽莎白菌中华鳖苗种的选育、动物模型构建、药物和疫苗的制备。苗的制备。苗的制备。
【技术实现步骤摘要】
一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021及应用
[0001]本专利技术涉及微生物应用
，尤其涉及一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021及应用。
技术介绍
[0002]按蚊伊丽莎白菌(Elizabethkingia anophelis)，黄杆菌科，伊丽莎白菌属，是从致病中华鳖脾脏内分离出的致病菌，主要症状表现为脖子红肿，伸缩困难，精神萎靡，不进食等，判断为“细菌性败血症”。该菌可以在中华鳖养殖生产中广泛传播，且耐药性强，发病时死亡率高。根据按蚊伊丽莎白菌全基因组，对比NFDB毒力因子数据库，预测毒力基因包括16类，246个，其中外毒素相关基因有12个，涉及可促进细菌突破血脑屏障的芳基硫酸酯酶、溶解红细胞的溶血素等相关毒力因子，能够导致肝、脾、肠道组织病变。
[0003]近年来，中华鳖养殖规模逐年扩大。在集约化养殖模式下，由于养殖密度增加，养殖水体环境变差等因素导致中华鳖抗病力降低，各种疾病频发且传播速度快。按蚊伊丽莎白菌在中华鳖上的致病研究未见报道，养殖户对该病原菌认识不足，导致生产上乱用药现象严重。因而只有做好该病原菌的分离与鉴定，进行抗生素、中草药等敏感性分析，才能选择合适的药物和合理浓度来防治该病原菌。
[0004]尽管目前未见水产动物源按蚊伊丽莎白菌感染人的报道，但是，鳖源按蚊伊丽莎白菌与人源按蚊伊丽莎白菌基因序列相似度较高。现已发现，人源按蚊伊丽莎白菌可引起人类脑膜炎、肺炎、脊髓炎、心内膜炎、皮肤软组织感染、尿路感染、腹腔感染等多种疾病，因此，需要对鳖源按蚊伊丽莎白菌的致病机理、药物敏感性等研究加以重视。
技术实现思路
[0005]1.要解决的技术问题
[0006]本专利技术的目的是为了解决现有技术中按蚊伊丽莎白菌在中华鳖上的致病研究未见报道，养殖户对该病原菌认识不足，导致生产上乱用药现象严重的问题，而提出的一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021及应用。
[0007]2.技术方案
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0009]一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021，按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株已于2022年04月28日保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉)，地址：中国武汉，保藏编号：CCTCC NO:M 2022507，分类命名为Elizabethkingiaanophelis。
[0010]本专利技术中还提出了一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021的分离方法，包括以下步骤：
[0011]步骤1：培养基的制备：LB液体培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，溶于1000mL超纯水中，121℃灭菌15min，待冷却至常温后4℃保存备用；LB固体培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，琼脂粉20g，溶于1000mL超纯水中，121℃灭菌15min，培养液
冷却至50℃倒入一次性细菌培养皿，待凝固后4℃保存备用；
[0012]步骤2：菌株的分离培养：无菌采集病鳖脾脏，划线接种于LB固体培养基上，28.5℃恒温培养24h，长出单菌落；将长出的单菌落分别接种至LB固体培养基上，30℃恒温培养24h，观察菌落形态是否一致；再次重复以上操作；确定为单菌落后，接种到LB液体培养基中，在摇床中30℃、180rpm条件下培养24h。
[0013]本专利技术中还提出了一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021在制备引发动物“细菌性败血症”的试剂中的应用。
[0014]本专利技术中还提出了一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021在动物苗种选育的应用。
[0015]本专利技术中还提出了一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021在构建“细菌性败血症”动物模型中的应用。
[0016]本专利技术中还提出了一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021在动物药物和疫苗的制备的应用。
[0017]本专利技术中上述应用动物包括中华鳖。
[0018]3.有益效果
[0019]相比于现有技术，本专利技术的优点在于：
[0020]本专利技术中，按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株对中华鳖有强致病力；同时按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株可以制备引发“细菌性败血症”试剂，构建“细菌性败血症”动物模型，开发抗鳖源按蚊伊丽莎白菌药物。
附图说明
[0021]图1：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株在LB培养基上的菌落形态；
[0022]图2：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株革兰氏染色形态；
[0023]图3：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株扫描电镜形态；
[0024]图4：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株在NCBI数据库中的序列图；
[0025]图5：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株基于16SrRNA基因序列构建的系统发育树图；
[0026]图6：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株溶血试验观察；
[0027]图7：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株致病中华鳖组织病理学观察图；其中，a.健康中华鳖肝、肺、脾、肠道组织；b.按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株致病中华鳖肝、肺、脾、肠道组织；
[0028]图8：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株敏感抗生素药敏观察；
[0029]图9：本专利技术中提出的按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株敏感中草药提取物药敏观察。
具体实施方式
[0030]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅为本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。
[0031]实施例1：
[0032]一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021，按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株已于2022年04月28日保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉)，保藏编号：CCTCC NO:M 2022507。
[0033]本专利技术中，按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株对中华鳖有强致病力；同时按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株可以制备引发“细菌性败血症”试剂，构建“细菌性败血症”动物模型，开发抗鳖源按蚊伊丽莎白菌药物。
[0034]实施例2：
[0035]其具有上述实施例的实施内容，其中，对于上述实施例的具体实施方式可参阅上述描述，此处的实施例不作重复详述；而在本申请实施例中，其与上述实施例的区别在于：
[0036]菌株的筛选及鉴定具体包括以下步骤：
[0037]步骤1：菌株的分离
[0038]1)培养基的制备：
[0039]LB液体培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，溶于1000mL超纯水中，121℃灭菌15min，待冷却至常温后4℃保存备用；
[0040]LB固体培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，琼脂粉20g，溶于1000mL超纯水中，121℃灭菌15min，培养液冷却至50℃倒入一次性细菌培养皿，待凝固后4℃保存备用；
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021，其特征在于，按蚊伊丽莎白菌JX2021菌株已于2022年04月28日保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉)，保藏编号：CCTCC NO:M 2022507。2.一株中华鳖源按蚊伊丽莎白菌JX2021的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：培养基的制备：LB液体培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，溶于1000mL超纯水中，121℃灭菌15min，待冷却至常温后4℃保存备用；LB固体培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，琼脂粉20g，溶于1000mL超纯水中，121℃灭菌15min，培养液冷却至50℃倒入一次性细菌培养皿，待凝固后4℃保存备用；步骤2：菌株的分离培养：无菌采集病鳖脾脏，划线接种于LB固体培养基上，28.5℃恒温培养24h，长出单菌落；将长出的单菌落分别接种至L...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭小泽，王玉柱，刘文舒，唐艳强，肖海红，李思明，
申请(专利权)人：江西省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
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