一种副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidaseM15、其基因及制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidaseM15，其氨基酸序列如SEQ IDNo.3所示，核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明专利技术还公开了所述的裂解酶peptidase M15制备方法，通过大肠杆菌原核表达系统表达并纯化的裂解酶peptidaseM15同时具有裂解宿主谱广以及高效抗菌作用的优点，在针对水产以及公共卫生领域抗生素耐药的副溶血弧菌感染方面有重要的应用价值。用价值。用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidase M15、其基因及制备方法和应用


[0001]本专利技术属于重组DNA生物
，具体涉及一种副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidase M15、其基因及制备方法和应用。

技术介绍

[0002]副溶血弧菌是一种革兰氏阴性嗜盐细菌，广泛分布在海水、淤泥以及鱼虾贝类等水产动物体内，能引起虾红体病、鱼类皮肤溃烂等水产动物疾病，是水产养殖业的主要致病菌之一。同时副溶血弧菌还可以导致包括伤口感染、败血症或更常见的急性胃肠炎等多种人类疾病。由于抗生素耐药性问题愈发严重，大多数抗生素将逐渐失去作用，与此同时，新型抗生素的开发速度较为缓慢，亟需研制一种从生物安全性角度出发的有效抗菌药物。
[0003]噬菌体是一类专门侵染细菌的病毒，英文名为bacteriophage，由Twort和Felix d
’
Herelle于1917年所发现。噬菌体以细菌为宿主，并在细菌体内进行复制和增值。在感染细菌的末期，裂解性噬菌体释放细胞壁水解酶，从而释放出子代噬菌体颗粒，并导致细菌的裂解和死亡。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidaseM15，其特征在于，所述副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidaseM15的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。2.一种编码权利要求1所述的副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidaseM15的基因，其特征在于：原始核苷酸序列如SEQ ID No.1，经过大肠杆菌遗传密码偏好性进行优化，优化后的编码裂解酶的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，即为所述副溶血弧菌裂解酶的编码基因。3.一种权利要求1所述的副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidaseM15的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：S1对副溶血噬菌体vB_VpaM_VPs20所编码的裂解酶如SEQ ID No.1所示核苷酸序列进行大肠杆菌遗传密码子偏好性优化，优化后的裂解酶的核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示，即为所述副溶血弧菌裂解酶的编码基因；S2通过人工合成目的基因进行重组表达载体pCzn1
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M15的构建，对重组大肠杆菌ArcticExpress
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M15的筛选鉴定；S3对重组大肠杆菌ArcticExpress
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m15的诱导表达条件进行优化，并对产生的包涵体进行复性后通过Ni柱纯化获得大量正确折叠的重组蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNo.3所示。4.如权利要求3所述的一种副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidaseM15的制备方法，其特征在于：所述重组表达载体的NdeI和XbaI酶切位点中间插入含有SEQ ID No.2所示核苷酸序列；所述重组表达载体为原核低温诱导表达载体，具体名称为pCzn1
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M15质粒。5.如权利要求3所述的一种副溶血弧菌噬菌体裂解酶peptidaseM15的制备方法，其特征在于：大肠杆菌ArcticExpress为宿主菌，含有所述SEQ ID No.2所示核...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丽丽，刘森，徐永平，李晓宇，任媛，李根，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：