多肽缀合物和使用方法技术

本申请提供了一种包含GLP

【技术实现步骤摘要】
多肽缀合物和使用方法
[0001]本申请是申请号为202180006277.3、申请日为2021年9月30日、专利技术名称为“多肽缀合物和使用方法”的中国专利技术专利申请的分案申请，原申请为国际申请号为PCT/CN2021/122075的PCT国际申请的中国国家阶段申请，该国际申请分别要求申请日为2020年9月30日，申请号为PCT/CN2020/119335和申请日为2021年6月9日，申请号为PCT/CN2021/099030的PCT国际申请的优先权。
专利

[0002]本专利技术涉及多肽缀合物、其药物组合物和使用此类物质预防和/或治疗疾病的方法。

技术介绍

[0003]胰高血糖素样肽
‑
1(GLP
‑
1)的主要生物活性片段是衍生自胰高血糖素原肽的翻译后加工的30或31个氨基酸的肽片段(GLP
‑
1的氨基酸7
‑
36或7
‑
37)。最初的GLP
‑
1产品GLP
‑
1刺激胰岛素合成和分泌，并且已显示预防糖尿病，尤其2型糖尿病中的高血糖症。然而，内源性GLP
‑
1仅具有大致2分钟的半衰期，这导致GLP
‑
1的空腹血浆水平仅为0
‑
15pmol/L。
[0004]代谢病症通常与胰岛素抵抗、内脏肥胖、致动脉粥样硬化血脂异常等相关，其在世界范围内构成重大且不断升级的公共卫生和临床挑战。然而，代谢疾病的现有治疗面临如半衰期短和/或功效低的问题。
[0005]此外，现有的GLP
‑
1化合物主要通过注射给药，如果给药频率太频繁，患者可能会对自行注射给药产生恐惧。
[0006]因此，需要用于治疗代谢疾病并减少给药频率的改进的治疗方案。

技术实现思路

[0007]本文提供多肽缀合物和包含其的药物组合物，以及用于治疗/预防代谢病症的使用方法。
[0008]在第一方面，本申请提供一种多肽缀合物，其包含：与肽接头的N端连接的单个生物活性肽，和与肽接头中第一清除率降低部分(CRM)残基缀合的第一CRM，其中生物活性肽包含GLP
‑
1受体激动剂，并且第一CRM残基与GLP
‑
1受体激动剂的C端氨基酸残基相距至少5个氨基酸残基(不包括CRM残基)。
[0009]在一些实施方式中，第一CRM残基与生物活性肽的C端氨基酸相距至少10、15、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、35、38、40、45、46、50、55、58、60、65、70、75、78个氨基酸残基(不包括CRM残基)。
[0010]在某些实施方式中，多肽缀合物中GLP
‑
1受体激动剂的长度不超过70、60或50个氨基酸残基。在某些实施方式中，多肽缀合物中GLP
‑
1受体激动剂的长度不超过49、48、47、46、45、44、43、42、41、40、39、38、37、36、35、34、33、32、31或30个氨基酸残基。
[0011]在一些实施方式中，GLP
‑
1受体激动剂包含GLP
‑
1。
[0012]在一些实施方式中，生物活性肽不具有缀合的CRM。
[0013]在某些实施方式中，本文所提供的多肽缀合物是单缀合的，并且具有与肽接头缀合而非与生物活性肽(例如GLP
‑
1)缀合的CRM。在这些实施方式中的部分实施方式中，与不具有肽接头且具有在GLP
‑
1上缀合的CRM的参比多肽缀合物相比，本文所提供的此类单缀合的多肽缀合物具有更高的在人血清白蛋白(HSA)存在下的GLP
‑
1受体激动活性。在某些实施方式中，如在相同或相当的分析中所确定，本文所提供的单缀合的多肽缀合物在HSA存在下激活GLP
‑
1受体，其EC50不超过索玛鲁肽(semaglutide)在HSA存在下的EC50的50％(或不超过40％、30％、20％、10％、5％或3％)。在某些实施方式中，如在相同或相当的分析中所确定，本文所提供的单缀合的多肽缀合物在不存在HSA的情况下激活GLP
‑
1受体，其EC50与索玛鲁肽在不存在HSA的情况下的EC50相当(例如为其约20％到约300％)。存在
[0014]在某些实施方式中，在GLP
‑
1受体激活的体外实验中，HSA存在的量适合于评定HSA结合对GLP
‑
1受体激活的影响。
[0015]在某些实施方式中，如在相同或相当的分析中所确定，本文所提供的单缀合的多肽缀合物结合HSA，其结合亲和力(KD)与索玛鲁肽相当(例如为其约70％到约500％)。
[0016]在某些实施方式中，与不具有肽接头且具有在GLP
‑
1上缀合的CRM的参比多肽缀合物(如索玛鲁肽)相比，本文所提供的单缀合的多肽缀合物具有至少相当的终末半衰期，如在相当的体内研究条件下且在相同类型的实验动物中所确定。
[0017]在一些实施方式中，多肽缀合物是双缀合的多肽缀合物并且进一步包含与第二CRM残基缀合的第二CRM。
[0018]在一些实施方式中，第二CRM残基在生物活性肽中或在肽接头中。在某些实施方式中，第二CRM残基在GLP
‑
1肽的K26处。
[0019]在这些实施方式中的一些中，与不具有肽接头且具有在GLP
‑
1上缀合的CRM的参比多肽缀合物相比，本文所提供的双缀合的多肽缀合物在HSA存在下具有相当或可接受的GLP
‑
1受体激动剂活性。在某些实施方式中，本文所提供的双缀合的多肽缀合物在HSA存在下激活GLP
‑
1受体，EC50不超过不具有肽接头且具有在GLP
‑
1上缀合的CRM的参比多肽缀合物(如索玛鲁肽)在HSA存在下的EC50的2000％(或不超过1500％、1000％、900％、800％、700％、600％或500％)，如在相同或相当的分析中所确定。在某些实施方式中，本文所提供的双缀合的多肽缀合物在不存在HSA的情况下激活GLP
‑
1受体，EC50与不具有肽接头且具有在GLP
‑
1上缀合CRM的参比多肽缀合物(如索玛鲁肽)在HSA存在下的EC50相当(例如不超过其500％、400％、300％或200％，或甚至更低)，如在相同或相当的分析中所确定。在某些实施方式中，本文所提供的双缀合的多肽缀合物在HSA存在下以第一EC50，且在不存在HSA的情况下以第二EC50激活GLP
‑
1受体，并且第一EC50高于第二EC50但不超过第二EC50的1000倍，例如第一EC50(在HSA存在下)不超过第二EC50(在不存在HSA的情况下)的900倍、800倍、700倍、600倍或500倍。在某些实施方式中，在GLP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽缀合物，其包含：a)单个生物活性肽，其与肽接头的N端连接，和b)第一清除率降低部分(CRM)，其与所述肽接头中的第一CRM残基缀合，其中：所述生物活性肽包含GLP
‑
1受体激动剂，所述GLP
‑
1受体激动剂包含GLP
‑
1，所述第一CRM残基为赖氨酸残基，并且所述多肽缀合物仅包含一个赖氨酸残基，并且所述第一CRM残基与所述GLP
‑
1受体激动剂的C端氨基酸相距至少5个氨基酸残基。2.一种多肽缀合物，其包含：a)单个生物活性肽，其与肽接头的N端连接，和b)第一清除率降低部分(CRM)，其与所述肽接头中的第一CRM残基缀合，其中：所述生物活性肽包含GLP
‑
1受体激动剂，所述GLP
‑
1受体激动剂包含GLP
‑
1，其进一步包含与第二CRM残基缀合的第二CRM，所述第一CRM残基和所述第二CRM残基均为赖氨酸残基，并且所述多肽缀合物仅包含两个赖氨酸残基，并且所述第一CRM残基与所述GLP
‑
1受体激动剂的C端氨基酸相距至少5个氨基酸残基。3.根据权利要求2所述的多肽缀合物，其中第二赖氨酸残基在所述GLP
‑
1中，并且任选地选自下组：K23、K26、K27、K30和K34。4.一种多肽缀合物，其包含：a)单个生物活性肽，其与肽接头的N端连接，和b)第一清除率降低部分(CRM)，其与所述肽接头中的第一CRM残基缀合，其中：所述生物活性肽包含GLP
‑
1受体激动剂，所述GLP
‑
1受体激动剂包含GLP
‑
1，所述第一CRM残基为半胱氨酸残基，并且所述多肽缀合物仅包含一个半胱氨酸残基，并且所述第一CRM残基与所述GLP
‑
1受体激动剂的C端氨基酸相距至少5个氨基酸残基。5.一种多肽缀合物，其包含：a)单个生物活性肽，其与肽接头的N端连接，和b)第一清除率降低部分(CRM)，其与所述肽接头中的第一CRM残基缀合，其中：所述生物活性肽包含GLP
‑
1受体激动剂，所述GLP
‑
1受体激动剂包含GLP
‑
1，其进一步包含与第二CRM残基缀合的第二CRM，所述第一CRM残基和所述第二CRM残基均为半胱氨酸残基，并且所述多肽缀合物仅包含两个半胱氨酸残基，并且其中所述第一CRM残基与所述GLP
‑
1受体激动剂的C端氨基酸相距至少5个氨基酸残基。6.根据权利要求5所述的多肽缀合物，其中第二半胱氨酸残基在所述GLP
‑
1中，并且任选地选自下组：C23、C26、C27、C30和C34。7.根据权利要求1至6中任一项所述的多肽缀合物，其中所述第一CRM残基与所述生物活性肽的C端氨基酸相距至少10、15、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、35、38、40、45、46、50、55、58、60、65、70、75、78个氨基酸残基。
8.根据权利要求2、3、5、6中任一项所述的多肽缀合物，其中所述第二CRM残基在所述肽接头中。9.根据权利要求1至6中任一项所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1相对于SEQ ID NO:1包含选自下组的位置处的一个或多个突变：A8、G22、Q23、E27、K26、A30、K34、R36和H7或其任何组合。10.根据权利要求9所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1包含选自下组的一个或多个取代或由其组成：A8Aib、G22E、K26R、K34R和R36G或其任何组合。11.根据权利要求1至6中任一项所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1包含氨基酸序列X7X8EGTFTSDVSSYLEX
22 X
23
AAX
26
X
27
FI X
30
WLVX
34
GX
36
G(SEQ ID NO:2)，其中：所述X7为H、咪唑
‑4‑
乙酸(IA)或咪唑丙酸(IPA)；所述X8为A、G、S、V、Aib、T、I或L；所述X
22
为G或E；所述X
23
为Q、C或K，所述X
26
为K、R或C；所述X
27
为E、K或C；所述X
30
为A、C或K，所述X
34
为R、K或C，并且所述X
36
为R或G。12.根据权利要求11所述的多肽缀合物，其中所述X7为H，X8为G或Aib，所述X
22
为G或E；所述X
23
为Q、C或K，所述X
26
为K、R或C；所述X
27
为E、K或C；所述X
30
为A、C或K，所述X
34
为K、R或C，并且所述X
36
为R或G。13.根据权利要求12所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:1、3、5、7、8、10、12、13、15、17、18、20、22、23、25、27、28、30、32、33、35、36、38和40
‑
44。14.根据权利要求12所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:3、4
‑
6、8、9
‑
11、13
‑
16、18
‑
21、23
‑
26、28、29
‑
31、33、34、36
‑
39和184。15.根据权利要求12所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:3、8、13、18、23、28、33、36、41
‑
44、和28。16.根据权利要求12所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:5、7、10、12、15、17、20、22、25、27、30、32、35、38和40。17.根据权利要求12所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:4、6、9、11、14、16、19、21、24、26、29、31、34、37、39和184。18.根据权利要求12所述的多肽缀合物，其中所述GLP
‑
1包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:4、9、14、19、24、29、34、37和184。19.根据前述权利要求1至6中任一项所述的多肽缀合物，其中所述多肽接头的长度为至少10个氨基酸残基(例如至少12、24、32、40、48、60或80个氨基酸残基)。20.根据权利要求19所述的多肽缀合物，其中所述多肽接头的长度为12
‑
80个氨基酸残基。21.根据权利要求19所述的多肽缀合物，其中所述多肽接头的长度为至少32个氨基酸残基。22.根据权利要求19所述的多肽缀合物，其中所述肽接头包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:90
‑
1...

【专利技术属性】
技术研发人员：张媛媛，吴心乐，邹海霞，翟鹏，金耀光，吴博，陈旭，郭威，赵新宇，王作斌，曾伶俐，
申请(专利权)人：北京质肽生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：