一种醛糖中酮糖的HPLC检测法制造技术

本发明专利技术涉及一种醛糖中酮糖的HPLC检测法。本发明专利技术所述的测定木糖中酮糖的分析方法包括步骤：(1)通过高效液相对木糖样品中的酮糖进行测定；所述的高效液相的色谱条件为：色谱柱：反相色谱柱；流动相：所述的流动相包括流动相A和流动相B；所述的流动相A包括硼酸盐缓冲液；所述的流动相B包括乙腈。本发明专利技术所述的高效液相法能够对木糖中酮糖进行定性和准确定量分析，能够用于木糖原料药及其制剂产品质量控制。制。制。

【技术实现步骤摘要】
一种醛糖中酮糖的HPLC检测法


[0001]本专利技术涉及医药和生物
，具体涉及一种醛糖中酮糖的HPLC检测法。

技术介绍

[0002]D
‑
木糖(D
‑
xylose)，分子式为C5H
10
O5，结构式为如下：
[0003][0004]D
‑
木糖由玉米芯、玉米皮、麸皮和甘蔗渣等提取纯化而来，常常含有D
‑
果糖等酮糖杂质，D
‑
果糖结构式为：
[0005][0006]酮糖如D
‑
果糖为D
‑
木糖的制备工艺杂质，为了保证木糖作为药物使用的产品质量，需要对木糖中的酮糖杂质进行定性和定量分析。单糖衍生化方法是测定单糖常用的方法，然而，现有技术中的单糖衍生化方法(如使用4
‑
氨基苯甲酸乙酯作为衍生化试剂)只能用来检测还原性醛糖，无法检测酮糖，因此，现有技术中缺乏一种能够有效检测木糖中酮糖的方法，从而限制木糖的应用。
[0007]因此，本领域需要开发一种能够有效测定木糖中酮糖的方法。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目在提供一种能够对木糖中的酮糖进行定性和定量分析的高效液相法，从而用于木糖的质量控制。
[0009]本专利技术第一方面提供一种用于测定木糖中的酮糖的HPLC方法，所述的方法包括步骤：
[0010](1)通过高效液相对木糖样品中的酮糖进行测定；
[0011]所述的高效液相的色谱条件为：
[0012]色谱柱：反相色谱柱；
[0013]流动相：所述的流动相包括流动相A和流动相B；
[0014]所述的流动相A包括硼酸盐缓冲液；所述的流动相B包括乙腈；和
[0015]流动相洗脱：所述的流动相洗脱为梯度洗脱，所述的梯度洗脱的顺序为：
[0016][0017]其中，(v/v％)是指占流动相的体积分数，0
‑
12min时，流动相A的体积分数为82％，流动相B的体积分数为18％；12
‑
13min时，流动相A的体积分数从82％匀速下降到50％，流动相B的体积分数从18％匀速上升到50％；13
‑
25min时，流动相A的体积分数为50％，流动相B的体积分数为50％；25
‑
26min时，流动相A的体积分数从50％匀速上升到82％，流动相B的体积分数从50％匀速下降到18％；26
‑
35min时，流动相A的体积分数为82％，流动相B的体积分数为18％。
[0018]优选地，所述的方法为定量和/或定性方法。
[0019]优选地，所述的方法为体外方法。
[0020]优选地，所述的方法为非诊断性和非治疗性方法。
[0021]优选地，所述样品为水性样品。
[0022]优选地，所述样品为水溶液。
[0023]优选地，所述木糖样品包括木糖原料药。
[0024]优选地，所述木糖样品含有酮糖。
[0025]优选地，所述的酮糖为所述的木糖样品的杂质。
[0026]优选地，所述的样品包括单糖衍生物水溶液。
[0027]优选地，所述的单糖衍生物水溶液包括单糖衍生物和水。
[0028]优选地，所述的木糖包括D
‑
木糖。
[0029]优选地，所述的样品中还包括选自下组的一种或多种单糖：葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、甘露糖、葡萄糖、2
‑
脱氧
‑
D
‑
核糖、鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖，或其组合。
[0030]优选地，所述的酮糖选自下组：果糖、木酮糖，或其组合。
[0031]优选地，所述的酮糖选自下组：D
‑
果糖、D
‑
木酮糖，或其组合。
[0032]优选地，所述的葡萄糖醛酸包括D
‑
葡萄糖醛酸。
[0033]优选地，所述的半乳糖醛酸包括D
‑
半乳糖醛酸。
[0034]优选地，所述的半乳糖包括D
‑
半乳糖。
[0035]优选地，所述的甘露糖包括D
‑
甘露糖。
[0036]优选地，所述的葡萄糖包括D
‑
葡萄糖。
[0037]优选地，所述的鼠李糖包括L
‑
鼠李糖。
[0038]优选地，所述的阿拉伯糖包括L
‑
阿拉伯糖。
[0039]优选地，所述的岩藻糖包括L
‑
岩藻糖。
[0040]优选地，所述的流动相A的pH为6.5
‑
7.8，较佳地6.8
‑
7.6，较佳地7.0
‑
7.4，更佳地7.1
‑
7.3，更佳地7.2。
[0041]优选地，所述的硼酸盐缓冲液的pH为6.5
‑
7.8，较佳地6.8
‑
7.6，较佳地7.0
‑
7.4，更佳地7.1
‑
7.3，更佳地7.2。
[0042]优选地，用氢氧化钠或氢氧化钾调节硼酸盐缓冲液的pH。
[0043]优选地，所述的硼酸盐缓冲液的浓度为0.05
‑
0.5mol/L，较佳地0.05
‑
0.3mol/L，更佳地0.05
‑
0.2mol/L，更佳地0.05
‑
0.15mol/L，更佳地0.1mol/L。
[0044]优选地，所述的高效液相还具有选自下组的一种或多种色谱条件：
[0045]色谱柱温度：20
‑
30℃，较佳地23
‑
27℃，更佳地25℃；
[0046]流动相流速：0.2
‑
3mL/min，较佳地0.5
‑
1.5mL/min，更佳地0.8
‑
1.2mL/min，最佳地1.0mL/min；和/或
[0047]检测器为紫外检测器，检测波长为250
‑
300nm，较佳地260
‑
290nm，更佳地270
‑
280nm，更佳地273
‑
277nm，最佳地275nm。
[0048]优选地，所述的反相色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。
[0049]优选地，所述的反相色谱柱为YMC
‑
Triart C18 EXRS。
[0050]优选地，所述的反相色谱柱的规格为4.6mm
×
250mm，5μm。
[0051]优选地，所述的进样体积为10
‑
30μl，较佳地20μl。
[0052]优选地，所述的样品用流动相A稀释后进样。
[0053]优选地，所述的步骤(1)包括：先用衍生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于测定木糖中的酮糖的HPLC方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：(1)通过高效液相对木糖样品中的酮糖进行测定；所述的高效液相的色谱条件为：色谱柱：反相色谱柱；流动相：所述的流动相包括流动相A和流动相B；所述的流动相A包括硼酸盐缓冲液；所述的流动相B包括乙腈；和流动相洗脱：所述的流动相洗脱为梯度洗脱，所述的梯度洗脱的顺序为：其中，(v/v％)是指占流动相的体积分数，0
‑
12min时，流动相A的体积分数为82％，流动相B的体积分数为18％；12
‑
13min时，流动相A的体积分数从82％匀速下降到50％，流动相B的体积分数从18％匀速上升到50％；13
‑
25min时，流动相A的体积分数为50％，流动相B的体积分数为50％；25
‑
26min时，流动相A的体积分数从50％匀速上升到82％，流动相B的体积分数从50％匀速下降到18％；26
‑
35min时，流动相A的体积分数为82％，流动相B的体积分数为18％。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的木糖包括D
‑
木糖；和/或所述的酮糖选自下组：果糖、木酮糖，或其组合。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的酮糖选自下组：D
‑
果糖、D
‑
木酮糖，或其组合。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的流动相A的pH为6.5
‑
7.8，较佳地6.8
‑
7.6，较佳地7.0
‑
7.4，更佳地7.1
‑
7.3，更佳地7.2。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的硼酸盐缓冲液的浓度为0.05
‑
0.5mol/L，较佳地0.05
‑
0...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖永成，张蕾，蔡艺玲，王羽娟，林卫军，石国良，蔡许彬，
申请(专利权)人：唐传生物科技厦门有限公司，
类型：发明
国别省市：