基于β-淀粉样蛋白修饰的抗原多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了基于β

【技术实现步骤摘要】
基于
β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽及其应用


[0001]本专利技术涉及生物制药
，尤其涉及基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽及其应用。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默病(Alzheimer
’
s disease，AD)，又称老年痴呆，是一种起病隐匿病程漫长的神经退行性疾病，主要临床特征为由突触及神经元缺失引起的认知和记忆功能减退。有数据统计表明，60至80岁老人老年痴呆的发病率约为4％，而80岁以上老人发病率则高至20％～40％。据世界卫生组织的最新报道，全世界已超过5000万痴呆症患者，并预计到2050年这个数字将超过1.5亿。AD造成的治疗护理等费用到2030年预计增至2万亿美元，给患者的家庭和社会造成了极大的经济负担和压力。目前，已上市治疗AD的几种药物只能在一定程度上缓解症状而不能达到根治的效果，针对中国正逐渐步入老龄化社会的现状，中国阿尔茨海默病的研究和治疗水平亟需得到提高。
[0003]AD发病机制的主流假说是淀粉样蛋白级联假说，该假说认为AD患者脑内淀粉样前体蛋白(APP)水解而产生过量β淀粉样蛋白(β
‑
amyloid，Aβ)是产生神经毒性的主要原因；Aβ还可以引起Tau蛋白过度磷酸化产生神经纤维缠结，最终导致了突触的损伤和神经元的丢失。因此，以Aβ作为治疗靶标的方法成为当前抗AD药物和疫苗研发中的热点。
[0004]AD的免疫疗法，主要分为针对Aβ和tau的免疫疗法。由于Aβ各种变体和聚集体(Aβ40，Aβ42，Aβ35，Aβ寡聚体，Aβ前纤维低聚体，Aβ纤维，Aβ斑块沉积) 是机体自身的物质，所以将单纯内源性Aβ多肽或蛋白作为抗原，会引起机体自身免疫反应，容易引发CD4 T细胞的亚群Th1细胞反应，从而导致炎症等不良反应。此外，将Aβ作为抗原免疫机体，还会引起脑微出血的不良反应，这可能是由于产生的免疫反应过度清除Aβ所致。
[0005]从1999年首次将人纤维化的Aβ42多肽用于免疫AD转基因小鼠并取得了一定的效果后，众多的I期临床研究亦取得初步性良好反应，但随后的临床II期实验出现了自身毒性T细胞免疫反应导致的脑膜炎，并且后续以选择靶向Aβ42肽的B淋巴细胞表位Aβ1
‑
15的主动免疫疫苗进入临床研究阶段仍旧可以出现副作用，并最终导致实验终止。
[0006]目前，在研的其它AD疫苗也都未能达到改善认知能力的治疗效果，可能原因是这些疫苗免疫后产生的抗体不能有效阻断Aβ的异常折叠形成对突触功能和神经元有较大毒性的寡聚体，从而无法使认知能力得到改善。因此，无论主动免疫治疗还是被动免疫治疗或预防AD都应该要求诱导产生的高水平抗体能够特异性阻断Aβ异常折叠形成毒性Aβ寡聚体，降低脑内的Aβ寡聚体水平，保护神经突触功能和认识能力，从而能产生有效的免疫预防作用。

技术实现思路

[0007]为了克服
技术介绍
中的不足，本专利技术提供了基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽以及抗原多肽在预防和治疗阿尔茨海默病中的应用；该抗原多肽不仅能够诱导机体产生抗
体，防止Aβ单体聚集，而且可以与小分子化合物配合清除Aβ聚集体，从而预防和减缓阿尔茨海默病的Aβ病理异常，实现阿尔茨海默病的预防和治疗。
[0008]具体技术方案如下：
[0009]本专利技术提供了基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽，该抗原多肽包括：A、B、C三个通过连接键或连接基团进行任意顺序连接的组分；
[0010]其中，A组分由m个成分a组合而成，B组分由n个成分b组合而成，C组分由 k个成分c组合而成；所述成分a为β
‑
淀粉样蛋白单体氨基酸片段或若干氨基酸片段组合；成分b为能够与β
‑
淀粉样蛋白单体或寡聚体结合的小分子化合物；成分c为偶联载体蛋白；m≥1，n≥1，k≥0。
[0011]进一步地，当k≠0时，A、B、C的连接形式为：A
‑
B
‑
C，C
‑
B
‑
A，A
‑
C
‑
B，C
‑
A
‑
B， B
‑
A
‑
C，B
‑
C
‑
A中的一种；当k＝0时，A、B的连接形式为A
‑
B，B
‑
A，A
‑
B
‑
A或B
‑
A
‑
B。
[0012]更进一步地，所述A、B、C的连接形式为：C
‑
A
‑
B，且m＝1，n＝1，k＝1；其中， A组分的C端羧基与B组分的羟基通过酯键连接；A组分的N端连接有巯基，C组分表面的氨基连接有马来酰亚胺基团，A组分通过N端巯基与C组分的马来酰胺基团连接。
[0013]进一步地，所述成分a中的β
‑
淀粉样蛋白单体氨基酸片段为连续片段且位于β
‑
淀粉样蛋白单体第14～29位之间，片段中的氨基酸数量为3～7；所述氨基酸片段组合为 N个相同或不同β
‑
淀粉样蛋白单体氨基酸片段的任意顺序连接，N≥2。
[0014]上文所述的β
‑
淀粉样蛋白单体的氨基酸全序列为：DAEFRHDSGYEVHHQKLVFF AEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA；其中，第14～29位的氨基酸序列为HQKLVFFAED VGSNKG。
[0015]更进一步地，所述β
‑
淀粉样蛋白单体氨基酸片段为HQK、KLV、FFA、AED、NKG、 NKGKLV、HQKAED、CFFA、CAED、CNKG、CKLVFFA、CLVFFAE中的一种。
[0016]进一步地，所述小分子化合物为姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素、高牛磺酸、3
‑
磺基丙酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、巴西木素、棉纤维素、橄榄苦苷苷元、槲皮素、白藜芦醇、迷迭香酸、6
‑
姜烯酚、丹参酮、维生素A、维生素B
12
、维生素D2、维生素D3、维生素K3中的一种。
[0017]更进一步地，所述小分子化合物为姜黄素，姜黄素衍生物，高牛磺酸，高牛磺酸衍生物中的一种。
[0018]进一步地，所述姜黄素衍生物为去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素中的一种；所述高牛磺酸衍生物为3
‑
磺基丙酸。
[0019]进一步地，所述偶联载体蛋白为血蓝蛋白、牛血清白蛋白和卵白蛋白中的一种。
[0020]更进一步地，所述抗原多肽的化学结构式如下式(1)～式(14)所示：
[0021][0022][0023][0024]其中，KLH表示血蓝蛋白。
[0025]本专利技术还提供了上述抗原多肽(以C
‑
A
‑
B的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽，其特征在于，包括：A、B、C三个通过连接键或连接基团进行任意顺序连接的组分；其中，A组分由m个成分a组合而成，B组分由n个成分b组合而成，C组分由k个成分c组合而成；所述成分a为β
‑
淀粉样蛋白单体氨基酸片段或若干氨基酸片段组合；成分b为能够与β
‑
淀粉样蛋白单体或寡聚体结合的小分子化合物；成分c为偶联载体蛋白；m≥1，n≥1，k≥0。2.如权利要求1所述的基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽，其特征在于，当k≠0时，A、B、C的连接形式为：A
‑
B
‑
C，C
‑
B
‑
A，A
‑
C
‑
B，C
‑
A
‑
B，B
‑
A
‑
C，B
‑
C
‑
A中的一种；当k＝0时，A、B的连接形式为A
‑
B，B
‑
A，A
‑
B
‑
A或B
‑
A
‑
B。3.如权利要求2所述的基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽，其特征在于，所述A、B、C的连接形式为：C
‑
A
‑
B，且m＝1，n＝1，k＝1；其中，A组分的C端羧基与B组分的羟基通过酯键连接；A组分的N端连接有巯基，C组分表面的氨基连接有马来酰亚胺基团，A组分通过N端巯基与C组分的马来酰胺基团连接。4.如权利要求1所述的基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽，其特征在于，所述成分a中的β
‑
淀粉样蛋白单体氨基酸片段为连续片段且位于β
‑
淀粉样蛋白单体第14～29位之间，片段中的氨基酸数量为3～7；所述氨基酸片段组合为N个相同或不同β
‑
淀粉样蛋白单体氨基酸片段的任意顺序连接，N≥2。5.如权利要求1所述的基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽，其特征在于，所述β
‑
淀粉样蛋白单体氨基酸片段为HQK、KLV、FFA、AED、NKG、NKGKLV、HQKAED、CFFA、CAED、CNKG、CKLVFFA、CLVFFAE中的一种。6.如权利要求1所述的基于β
‑
淀粉样蛋白修饰的抗原多肽，其特征在于，所述小分子化合物为姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素、高牛磺酸、3
‑
磺基丙酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、巴西木素、棉纤维素、橄榄苦苷苷元、槲皮素、白藜芦醇、迷迭香酸、6
‑
姜烯酚、丹参酮、维生素A、维生素B
12
、维生素D2、...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭俊，莫玲，李崧，訾聃，郑肖江，
申请(专利权)人：安域生物科技杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：