【技术实现步骤摘要】
构建BRCA1基因突变的乳腺癌模型猪核移植供体细胞的基因编辑系统及其应用
[0001]本专利技术属于生物
,具体属于基因编辑
,更具体涉及构建BRCA1基因突变的乳腺癌模型猪核移植供体细胞的基因编辑系统及其应用。
技术介绍
[0002]根据世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)发布的2020年全球最新癌症负担数据显示,2020年内新增癌症病例60%来自于最常见的10种肿瘤,其中女性乳腺癌占11.7%,在数量上首次超越了肺癌(11.4%),成为全球诊断人数最多的癌症。女性乳腺癌第一次成为最常被诊断出的癌症,是威胁女性健康的第一杀手,也成为了当今最紧迫的健康问题之一。1990年,研究者发现了一种直接与遗传性乳腺癌有关的基因,命名为乳腺癌1号易感基因(Breast cancer susceptbility gene 1,简称BRCA1)。BRCA1基因在调节人体细胞的复制、遗传物质DNA损伤修复、细胞的正常生长方面有重要作用。拥有这个基因突变的家族具有比正常人更高的乳腺癌发生率。
[0003]研究乳腺癌的发生 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种试剂盒,包括BRCA1
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gRNA3、BRCA1
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gRNA4和NCN蛋白;所述BRCA1
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gRNA3为sgRNA,其靶序列结合区如SEQ ID NO:16中第3
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22位核苷酸所示;所述BRCA1
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gRNA4为sgRNA,其靶序列结合区如SEQ ID NO:17中第3
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22位核苷酸所示;所述NCN蛋白为Cas9蛋白或具有Cas9蛋白的融合蛋白;所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c):(a)制备重组细胞;(b)制备乳腺癌模型猪;(c)制备乳腺癌细胞模型或乳腺癌组织模型或乳腺癌器官模型。2.一种试剂盒,包括BRCA1
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gRNA3、BRCA1
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gRNA4和PRONCN蛋白;BRCA1
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gRNA3为权利要求1中所述的BRCA1
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gRNA3;BRCA1
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gRNA4为权利要求1中所述的BRCA1
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gRNA4;所述PRONCN蛋白自上游至下游依次包括如下元件:信号肽、分子伴侣蛋白、蛋白标签、蛋白酶酶切位点、核定位信号、Cas9蛋白、核定位信号;所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c):(a)制备重组细胞;(b)制备乳腺癌模型猪;(c)制备乳腺癌细胞模型或乳腺癌组织模型或乳腺癌器官模型。3.一种试剂盒,包括BRCA1
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gRNA3、BRCA1
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gRNA4和特异质粒;BRCA1
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gRNA3为权利要求1中所述的BRCA1
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gRNA3;BRCA1
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gRNA4为权利要求1中所述的BRCA1
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gRNA4;所述特异质粒自上游至下游依次包括如下元件:启动子、操纵子、核糖体结合位点、PRONCN蛋白的编码基因、终止子;所述PRONCN蛋白自上游至下游依次包括如下元件:信号肽、分子伴侣蛋白、蛋白标签、蛋白酶酶切位点、核定位信号、Cas9蛋白、核定位信号;所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c):(a)制备重组细胞;(b)制备乳腺癌模型猪;(c)制备乳腺癌细胞模型或乳腺癌组织模型或乳腺癌器官模型。4.BRCA1
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gRNA3、BRCA1
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gRNA4和NCN蛋白在制备试剂盒中的应用;BRCA1
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gRNA3为权利要求1中所述的BRCA1
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gRNA3;BRCA1
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gRNA4为权利要求1中所述的BRCA1
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gRNA4;NCN蛋白为权利要求1中所述的NCN蛋白;所述试剂盒的用途为如下(a)或(b)或(c):(a)制备重组细胞;(b)制备乳腺癌模型猪;(c)制备乳腺癌细胞模型或乳腺癌组织模型或乳腺癌器官模型。5.BRCA1
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gRNA3、BRCA1
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gRNA4和PRONCN蛋白在制备试剂盒中的应用;BRCA1
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【专利技术属性】
技术研发人员:牛冬,汪滔,马翔,王磊,程锐,赵泽英,方园,胡世芳,
申请(专利权)人:南京启真基因工程有限公司,
类型:发明
国别省市:
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