一种可用于疫苗生产的口蹄疫种毒及其制备方法技术

本发明专利技术涉及疫苗制备领域，具体涉及一种可用于疫苗生产的口蹄疫种毒及其制备方法。本发明专利技术以BHK21贴壁细胞的扁瓶细胞或细胞工厂作为宿主，接入口蹄疫病毒及病毒培养液后进行培养，待细胞病变后收获贴壁种毒，而后将所述贴壁种毒接种于悬浮细胞中培养并获得悬浮种毒；其中，所述病毒培养液中含有HEPES和碳酸氢钠，pH值为7.70～7.85。采用本发明专利技术的方法能够高效制得口蹄疫种毒，且制得的口蹄疫种毒具有效价高、裂解少、可控性强等优势，在长期保存中具有较优的稳定性。较优的稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种可用于疫苗生产的口蹄疫种毒及其制备方法


[0001]本专利技术涉及疫苗制备领域，具体涉及一种可用于疫苗生产的口蹄疫种毒及其制备方法。

技术介绍

[0002]口蹄疫是由口蹄疫病毒(foot
‑
and
‑
mouth disease virus,FMDV)引起的,发生于牛、羊、猪等偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。FMDV属于小RNA病毒科(Picornaviridae)口疮病毒属(Aphthovirus)，是偶蹄类动物高度传染性疾病(口蹄疫)的病原。在病毒的中心为一条单链的正链RNA，由大约8000个碱基组成，是感染和遗传的基础；周围包裹着蛋白质决定了病毒的抗原性、免疫性和血清学反应能力；病毒外壳为对称的20面体。
[0003]疫苗接种是特异性预防FMD的可靠和有效手段，安全有效的疫苗是成功地预防、控制乃至最终消灭FMD的先决条件，而口蹄疫病毒(FMDV)的制备对于相关疫苗的研发和生产具有重要意义。
[0004]当前，主流的生产FMDV的方法包括转瓶BHK21细胞培养法和BHK21细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种制备口蹄疫种毒的方法，其特征在于，包括：以BHK21贴壁细胞的扁瓶细胞或细胞工厂作为宿主，接入口蹄疫病毒及病毒培养液后进行培养，待细胞病变后收获贴壁种毒，而后将所述贴壁种毒接种于悬浮细胞中培养并获得悬浮种毒；其中，所述病毒培养液中含有HEPES和碳酸氢钠，pH值为7.70～7.85。2.根据权利要求1所述的制备口蹄疫种毒的方法，其特征在于，所述病毒培养液按体积百分比计含有如下组分：1
‑
1.5％的1mol/LHEPES溶液、1.5
‑
2.2％的7.50％碳酸氢钠溶液、余量为0.5％乳依液。3.根据权利要求1或2所述的制备口蹄疫种毒的方法，其特征在于，在接入口蹄疫病毒及病毒培养液时，先用病毒培养液对BHK21贴壁细胞进行涮洗，再按MOI为1:1～1:10进行接种。4.根据权利要求1所述的制备口蹄疫种毒的方法，其特征在于，待达到80～85％的病变比例后收获贴壁种毒。5.根据权利要求1所述的制备口蹄疫种毒的方法，其特征在于，所述方法还包括：将收获得到的贴壁种毒与灭菌的冷冻保护剂混合，而后对混合液进行检验冷冻；所述冷冻保护剂包括甘油和卵白蛋白液，所述冷冻保护剂与所述贴壁种毒的体积比为0.8：1.2～1.5，所述卵白蛋白液占所述混合液总体积的0.8～1.2％。6.根据权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡斌，张林冲，郭建军，刘艳霞，赵丽霞，
申请(专利权)人：金宇保灵生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：