【技术实现步骤摘要】
一种细胞消化终止液及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及细胞的消化终止，特别涉及一种细胞消化终止液及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]贴壁细胞在培养瓶长成致密单层后，继续生长的空间不足，培养基中的营养成份也消耗较多，同时代谢废物也有较多堆积，此时需要对细胞进行分散收集，进一步冻存或者传代。细胞消化一般使用酶消化法(胰蛋白酶消化及胶原蛋白酶消化)，此方法作用于细胞间的蛋白连接；离子螯合剂法，不破坏细胞表面分子，螯合细胞连接蛋白里的离子。对于贴壁较紧的细胞如成纤维细胞，则需要以胰酶消化后再吹散分瓶，一般过程为(以下操作均按无菌操作的要求进行)：将长成致密单层细胞的细胞瓶中原来的培养液弃去，用PBS清洗两遍培养瓶；视细胞瓶的大小加入一定体积一定浓度的胰酶溶液，以使充分浸润；一般消化时间约为1至3分钟，肉眼观察瓶壁半透明的细胞层，当见到出现细针孔空隙时，弃去胰酶溶液，并加入适量的细胞培养液终止消化。
[0003]消化对于之后的细胞状态影响很大，其中终止消化液的作用至关重要。传统方式使用PBS或生理盐水终止消化...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种细胞消化终止液，其特征在于，以磷酸盐缓冲液PBS为初始溶液，添加如下成分：CaCl
2 50
‑
300mg/L，MgCl
2 50
‑
300mg/L，胰蛋白酶抑制剂50
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300mg/L，Ⅰ型胶原蛋白100
‑
500mg/L，人血白蛋白100
‑
1000mg/L。2.权利要求1所述的细胞消化终止液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以磷酸盐缓冲液PBS分别配制CaCl2、MgCl2、胰蛋白酶抑制剂、Ⅰ型胶原蛋白和人血白蛋白；然后以磷酸盐缓冲液PBS为初始溶液，再控制溶液中的各物质满足如下浓度要求：CaCl250
‑
300mg/L，MgCl
2 50
‑...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵朝伟，张舒乐，黄青，吴定，石慧娟，李海，李鸿颖，
申请(专利权)人：湖南开启时代科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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