短散布核元件反义RNA抗细胞衰老培养基与细胞培养方法技术

本发明专利技术提供了一种增加正常衰老细胞培养代数的培养基与细胞培养方法。所述增加正常衰老细胞培养代数的培养基是在完全培养基中添加人短散布核元件（SINE）反义RNA或小鼠SINE反义RNA。本发明专利技术从细胞衰老的本质入手，用哺乳动物基因组中的SINE反义RNA调节细胞的基因表达，配合培养方法，达到延缓细胞衰老、增加细胞培养代数的目的，这样扩增出的细胞可以用于细胞治疗研究和细胞治疗。胞治疗研究和细胞治疗。

【技术实现步骤摘要】
短散布核元件反义RNA抗细胞衰老培养基与细胞培养方法


[0001]本专利技术涉及一种SINE反义RNA抗细胞衰老培养基的制备方法与使用方法。所针对细胞包括淋巴细胞，晶状体上皮细胞以及成纤维细胞等。

技术介绍

[0002]人或其他动物的正常细胞体外培养一定代数后，就会停止生长，称为Hayflick限制，有人认为衰老机理控制该过程。细胞治疗已有数百年历史。首次细胞治疗概念可以追溯到1493年至1541年，由菲律宾学者Auredus Paracelsus提出。细胞治疗是指利用某些具有特定功能的细胞，采用生物工程方法获取和/或通过体外扩增、特殊培养等处理后，使这些细胞具有增强免疫、杀死病原体和肿瘤细胞、促进组织器官再生和机体康复等治疗功效，从而达到治疗疾病的目的。但是人的正常细胞例如淋巴细胞或成纤维细胞在体外培养扩增的过程中会出现Hayflick现象，从而无法获得足够数量具有功能的细胞，限制了细胞治疗方法的应用(Rhinn M, Ritschka B, Keyes WM. Cellular senescence in development, rege本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种增加正常衰老细胞培养代数的培养基，其特征在于，在完全培养基中添加人SINE反义RNA或小鼠SINE反义RNA，称为SINE反义RNA抗细胞衰老培养基。2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述完全培养基是在无血清培养基中添加胎牛血清得到，其中添加量为5%
‑
15%，优选为10%。3.如权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述无血清培养基在Eagle MEM 培养基中添加5
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15 mmol/L Hepes
‑
100
ꢀµ
mol/L β巯基乙醇和20
‑
305
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mol/L维生素E，优选地添加10 mmol/L Hepes
‑
100
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mol/L β巯基乙醇
‑
25
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mol/L维生素E。4.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述人SINE反义RNA为人Alu反义RNA；优选地，所述人SINE反义RNA的DNA序列如下：GGCTGGGCGCGGTGGCTCACGCCTGTAATCCCAGCACTTTGGGAGGCCGAGGTGGGCGGATCACAAGGTCAGGAGATCAAGACCATCCTGGCTAATACGGTGAAACCCCGTCTCTACTAAAAATGCAAAAAAATTAGCCGGGTGTGGTGGCGGGTGCCTGTAGTCCCAGCTACTCAAGAGGCTGAGGCAGGAGAATGGCGTGAACCTGGGAGGTGGAGCTTGCAGTGAGCCGAGATCGCGCCACTGCACTCCAGCCTGGGCGACACAGCGAGACTCCGTCTCA；所述小鼠SINE反义RNA为小鼠B1反义RNA；优选地，所述小鼠SINE反义RNA的DNA序列如下：GCCGGGCATGGTGGCGCACGCCTTTAATCCCAGCACTTGGGAGGCAGAGGCAGGCGGATTTCTGAGTTCGAGGCCAGCCTGGTCTACANAGTGAGTTCCAGGACAGCCAGGGCTACACAGAGAAACCCTGTCTCGAAAAAAAAAA。5.如权利要求4所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王秀芳，吕占军，宋志学，吉宁，吴沛园，
申请(专利权)人：河北医科大学，
类型：发明
国别省市：