一种用于快速检测米氏凯伦藻的crRNA及其引物对制造技术

本发明专利技术公开了一种用于快速检测米氏凯伦藻的crRNA及其引物对。所述crRNA的序列如SE ID NO:2所示；引物对序列如SE ID NO:5和SE ID NO:6所示。本发明专利技术首次实现了基于CRISPR

【技术实现步骤摘要】
一种用于快速检测米氏凯伦藻的crRNA及其引物对


[0001]本专利技术涉及环境微生物领域，尤其涉及一种用于快速检测米氏凯伦藻的crRNA及其引物对。

技术介绍

[0002]米氏凯伦藻属于甲藻门中的裸甲藻目凯伦藻属，在世界各地均有分布，该物种能分泌溶血性毒素和鱼毒素，导致海水中鱼类与贝类大规模死亡，造成重大经济损失，并严重影响海洋生态环境。该物种具有很强的适应性并广泛分布于世界各地，据报道，新西兰，日本，印度，爱尔兰和墨西哥湾，以及中国香港、浙江和福建沿海地区都曾发生过由米氏凯伦藻引起的大规模赤潮。米氏凯伦藻在中国引发的大规模赤潮最早于1980年出现在我国香港，之后其诱发赤潮的频率和范围显著增加。目前，它已成为中国沿岸第二大赤潮种。2002年以来，米氏凯伦藻在我国长江口临近海域、东海沿岸海域至珠江口邻近海域几乎连年爆发大规模赤潮。在天津、青岛、连云港等地的近岸海域也出现过较大规模的米氏凯伦藻赤潮。
[0003]预防赤潮的最佳方法就是在赤潮藻大规模繁殖之前，对藻种进行快速、准确地鉴定并提供有效的赤潮预警信息。近年来，随着赤潮研究的逐步深入本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于快速检测米氏凯伦藻的crRNA及其引物对，其特征在于，所述crRNA的序列如SE ID NO:2所示；引物对序列如SE ID NO:5和SE ID NO:6所示。2.一种用于快速检测米氏凯伦藻的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的crRNA及其引物对。3.一种用于快速检测米氏凯伦藻的方法，其特征在于，使用了权利要求1的crRNA及其引物对或权利要求2的试剂盒。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，含有如下步骤：提取藻或环境样品的基因组；扩增：使用权利要求1的引物对或权利要求2的试剂盒得到RAA扩增产物；检测和判断。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述扩增为：使用RAA等温扩增试剂盒，根据说明书依次加入Buffer A，权利要求1的引物对和待测样品DNA后，再加入BufferB激活反应，将反应混合物置于37℃恒温仪，PCR仪或者能维持37℃的设备或环境中，扩增待检测DNA片段得到RAA扩增产物。6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述检测和判断为a或者b，其中a为将扩增得到的RAA扩增产物加入到含FQ
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ssDNA的Cas12a
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crRNA酶切反应混合液中，在37℃条件下，通过荧光定量qPCR仪或者酶标仪连续收集荧光信号，如果荧光信号接近零，则为阴性；如果随着反应的进行，荧光值持续增强或增强后到达平台期，则为阳性；反应的终产物可...

【专利技术属性】
技术研发人员：王路，陈建明，丁光茂，沈海峰，
申请(专利权)人：福建省耕地保护中心，
类型：发明
国别省市：