一种聚乙二醇修饰剂的制备及纯度测定方法技术

本发明专利技术涉及一种聚乙二醇修饰剂的制备及纯度测定方法，属于化学分析技术领域。所述方法采用衍生化反应，色谱柱为Waters Atlantis T3色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，其中，流动相A为甲酸水溶液水溶液，流动相B为甲酸乙腈溶液，再经过色谱条件的优化，包括柱温、流速、波长，流动相和色谱柱的优化之后，本发明专利技术的技术方案中HPLC的纯度分析方法，步骤简单，操作简便，方法的准确度高、重复性好、灵敏度高。灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】
一种聚乙二醇修饰剂的制备及纯度测定方法


[0001]本专利技术涉及化学分析领域，具体涉及一种聚乙二醇修饰剂的制备及纯度测定方法。

技术介绍

[0002]聚乙二醇具有非常好的水溶解性和生物相容性，是经美国FDA批准的极少数能用于人体注射的聚合物之一，它可以改善药物的代谢动力学特性，普遍延长药物在人体内的半衰期，在生物医药领域备受青睐和广泛应用。PEG的工业化生产是以环氧乙烷聚合反应为基础，所以难免会随之产生一些PEG同系物杂质。在利用这种多分散PEG对药物分子进行修饰时，相应获得的产物也是一系列的混合物，这就直接导致药物在分离纯化、结构表征、质量控制和临床应用等多方面存在缺陷，进而影响药物的疗效。
[0003]3，6，9三噁十一(碳)烷二酸是一种聚乙二醇修饰剂，CAS：13887
‑
98
‑
4，其分子结构式如下所示：
[0004][0005]3，6，9三噁十一(碳)烷二酸是一种短链的单分散聚乙二醇衍生物，由二甘醇原料与溴乙酸叔丁酯发生亲核取代反应后再水解得到的双端羧酸聚乙二醇衍生物。其主要作用是与蛋白质分子或小分子药物上的氨基或者羟基通过酰胺缩合或者酯缩合进行偶联，改变药物分子的结构，进而优化其理化性质。
[0006]目前，国内外尚无有关3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度测定方法的报道，主要原因是聚乙二醇衍生物由于其结构、合成方法、纯化方法、及检测方法的特殊性，其组成通常比较复杂，许多成分容易对检测造成干扰。

技术实现思路

[0007]本专利技术一方面，提供二乙二醇双官能团化乙酸的合成方法，其工艺如图1所示。本专利技术的另一方面，提供了一种聚乙二醇修饰剂3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度和杂质的测定方法，该方法能降低样品中其他杂质的干扰，准确度高、重复性好、灵敏度高。
[0008][0009]如上二乙二醇双羧酸的合成工艺
[0010]本专利技术另一方面涉及一种3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度测定方法，包括如下
步骤：
[0011](1)配置样品溶液；
[0012](2)对步骤(1)得到的样品溶液进行HPLC检测；
[0013](3)根据步骤(2)获得的检测结果计算出样品中的3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度。
[0014]本专利技术第一方面的某些实施方式，步骤(1)中，所述的配置样品溶液，包括：称取含3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的样品溶于二氯甲烷中，加入DIPEA，充分搅拌后滴加SOCl2溶液，继续搅拌，加入苄胺，反应结束后，用乙腈转移至容量瓶中，定容，摇匀，即得；其中，所述的SOCl2溶液为SOCl2的二氯甲烷溶液。
[0015]步骤(1)中，样品浓度为1mg/mL
‑
5mg/mL。
[0016]步骤(1)中，3，6，9三噁十一(碳)烷二酸与苄胺的摩尔比为1:1至1:2。
[0017]步骤(1)中，反应温度为15℃
‑
40℃。
[0018]本专利技术第一方面的某些实施方式，步骤(2)中，HPLC的检测条件包括如下a至f中的一项或多项：
[0019]a.色谱柱为Waters Atlantis T3色谱柱；
[0020]优选地，色谱柱规格为150mm(长度)
×
4.6mm(内径),3μm(粒径)；
[0021]b.柱温为25℃～45℃；优选为40℃；
[0022]c.柱流量为0.8mL/min至1.2mL/min；优选为1.0mL/min；
[0023]d.进样量为2～20μL；优选为10μL；
[0024]e.检测器为紫外检测器；
[0025]优选地，检测波长为190nm
‑
210nm；
[0026]f.流动相包括流动相A和流动相B，其中，流动相A为甲酸水溶液水溶液，流动相B为甲酸乙腈溶液；
[0027]优选地，流动相A中甲酸水溶液的浓度为0.5
‰
～2.0
‰
；优选为1
‰
；
[0028]优选地，流动相B中甲酸水溶液的浓度为0.5
‰
～2.0
‰
；优选为1
‰
；
[0029]优选地，流动相的洗脱程序如下表所示：
[0030]时间(min)A(％)B(％)0.09555.0851518.0604023.0406027.0109027.5955319550.0955
[0031]本专利技术第一方面的某些实施方式中，紫外检测器用于检测210nm波长处的吸光度。
[0032]在本专利技术的技术方案中，经过色谱条件的优化，包括柱温、流速、波长，流动相和色谱柱的优化之后，降低样品中其他杂质的干扰，能快速准确的测定样品中的3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度，本专利技术的技术方案中HPLC的含量分析方法，步骤简单，操作简便，方法
的准确度高、重复性好、灵敏度高。
[0033]综上所述，本专利技术包括以下有益的技术效果：
[0034]1、本专利技术提供的测定样品中的3，6，9三噁十一(碳)烷二酸纯度的方法，可以将3，6，9三噁十一(碳)烷二酸制备工艺的杂质进行很好的分离，为工艺优化提供技术指导；
[0035]2、本专利技术提供的测定样品中的3，6，9三噁十一(碳)烷二酸纯度的方法，采用苄胺衍生化方法，可以降低样品中其他杂质的干扰；
[0036]3、本专利技术提供的测定样品中的3，6，9三噁十一(碳)烷二酸纯度的方法，步骤简单，操作简便，方法的准确度高、重复性好、灵敏度高。
[0037]在本专利技术的描述中，需要理解的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本专利技术的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
[0038]在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本专利技术的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
附图说明
[0039]图1为实施例2中的LC
‑
MS色谱图；
[0040]图2为实施例2中的化合物3的苄胺衍生化HPLC色谱图。
具体实施方式
[0041]为了使本领域的技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面进一步披露一些非限制实施例，对本专利技术作进一步的详细说明。
[0042]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度的方法，包括：(1)配置样品溶液；(2)对步骤(1)得到的样品溶液进行HPLC检测；(3)根据步骤(2)获得的检测结果计算出样品中的3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度；其中，步骤(1)中，所述的配置样品溶液，包括：称取含3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的样品溶于二氯甲烷中，加入DIPEA，充分搅拌后滴加SOCl2溶液，继续搅拌，加入苄胺，反应结束后，用乙腈转移至容量瓶中，定容，摇匀，即得。2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(1)中，样品溶液中样品浓度为1mg/mL～5mg/mL。3.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(1)中，配置样品溶液过程中，所述3，6，9三噁十一(碳)烷二酸与苄胺的摩尔比为1:1至1:2。4.据权利要求1所述的方法，其中，步骤(1)中，配置样品溶液过程中，反应温度为15℃
‑
40℃。5.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(2)中，HPLC的检测条件包括如下a至f中的一项或多项：a.色谱柱为Waters Atlantis T3色谱柱；b.柱温为25℃～45℃；c.柱流量为0.8mL/min至1.2mL/min；d.进样量为2μL～20μL；e.检测器为紫外检测器，检测波长为190nm
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210nm；f.流动相包括流动相A和流动相B，其中，流动相A为甲酸水溶液水溶液，流动相B为甲酸乙腈溶液。6.根据权利要求5所述的方法，其中，步骤f中，流动相A中甲酸水溶液的浓度为0.5
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【专利技术属性】
技术研发人员：许慧，张安林，
申请(专利权)人：长沙创新药物工业技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：