莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用和药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用和药物组合物，属于生物医药领域。本发明专利技术中的莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用，所述莱菔硫烷通过降低耐阿糖胞苷白血病细胞中多药耐药性相关蛋白1和P

【技术实现步骤摘要】
莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用和药物组合物


[0001]本专利技术涉及莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用和药物组合物，属于生物医药领域。

技术介绍

[0002]白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他非造血组织和器官，同时抑制正常造血功能。复发是白血病治疗中的常见情况，并且发生在40
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50％的年轻人和大多数老年患者。目前随着化疗药物的不断研发、新化疗方案的出现以及支持疗法的进步，白血病的治疗效果有所提高，现行的化疗方案完全缓解率为60％
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80％，但其中有80％左右的复发率，20％
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30％的患者产生原发耐药。并且白血病细胞对一种药物产生耐药时，常对其他多种药物也发生耐药。
[0003]多药耐药(multidrug
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resistant，MDR)发生在暴露于一种抗癌药物并对其他多种结构和机制无关的抗癌药物获得性耐药的癌细胞中，正常癌细胞相比，MDR癌细胞的细胞内药物浓度积累明显较低。多药耐药相关蛋白(MRP)是多药耐药(MDR)形成机制之一，其作为转运泵参与物质转运，并且在多种癌症中都有表达。研究表明多药耐药性相关蛋白1(MRP1)的过表达促进患者引起耐药，它具有能量依赖性“药泵”功能。P
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糖蛋白(P
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gp)是一种具有广泛底物特异性的ATP依赖性外排泵，使细胞内药物泵出细胞外，降低了细胞内的药物浓度使细胞产生耐药性。
[0004]阿糖胞苷(Cytosine arabinoside，Ara
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C)为嘧啶类抗代谢药物，是治疗白血病常用的药物之一。Ara
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C是主要作用于细胞S增殖期的嘧啶类抗代谢药物，通过抑制细胞DNA的合成，干扰细胞的增殖。Ara
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C长期临床大量用药，治疗白血病效果非常明显，但仍然有许多患者病情不能缓解或治疗后复发，患者出现耐药是常见复发的重要原因，这限制了阿糖胞苷在临床上的应用效果，也增加了治疗困难。因此，逆转耐阿糖胞苷白血病细胞的耐药性成为亟待解决的问题。

技术实现思路

[0005]为解决上述问题，本专利技术的第一个目的是提供莱菔硫烷(SFN)在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用，莱菔硫烷可以降低耐阿糖胞苷白血病细胞中多药耐药性相关蛋白1和P
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gp蛋白的表达量，逆转耐阿糖胞苷白血病细胞的外排功能，从而逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性。
[0006]本专利技术的第二个目的是提供莱菔硫烷在制备逆转白血病细胞对阿糖胞苷耐药性药物中的应用。
[0007]本专利技术的第三个目的是提供一种用于制备治疗耐药型白血病药物的药物组合物。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：
[0009]莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用。
[0010]本专利技术构建耐阿糖胞苷的白血病细胞株，经检测MRP1和P
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gp蛋白表达量显著升高，外排能力增强，耐阿糖胞苷的白血病细胞株经莱菔硫烷诱导后，MRP1和P
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gp蛋白表达量显著降低，且外排能力降低。又通过联合用药证明，低浓度的阿糖胞苷与莱菔硫烷联合用药，即可达到高浓度阿糖胞苷对耐药白血病细胞的效果，充分说明莱菔硫烷可以逆转耐阿糖胞苷白血病细胞的耐药性。
[0011]优选地，所述莱菔硫烷通过降低耐阿糖胞苷白血病细胞中多药耐药性相关蛋白1和P
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gp蛋白的表达量，逆转耐阿糖胞苷白血病细胞的外排功能，而达到逆转耐阿糖胞苷白血病细胞对阿糖胞苷耐药性的目的。
[0012]优选地，包括：使用莱菔硫烷和阿糖胞苷联合作用于耐阿糖胞苷白血病细胞。
[0013]优选地，所述联合作用的过程中，莱菔硫烷的浓度为5～10μM。
[0014]进一步优选地，所述联合作用的过程中，莱菔硫烷的浓度为8μM。
[0015]本专利技术通过对白血病细胞和耐阿糖胞苷白血病细胞研究，发现在莱菔硫烷的作用下，耐阿糖胞苷白血病细胞对阿糖胞苷的药敏性增强。在上述浓度莱菔硫烷与阿糖胞苷联合用药，即可达到高浓度阿糖胞苷对耐药白血病细胞的效果。
[0016]优选地，所述联合作用的时间不小于48h。
[0017]经预实验证明SFN诱导在48h时效果较好，在联合用药试验中，处理时间为48h杀伤白血病细胞的效果优于24h，且48h的浓度依赖性优于24h和72h。
[0018]优选地，所述白血病细胞为K562细胞或KG1a细胞。
[0019]KG1a为人急性骨髓白血病细胞，细胞分化能力较差；K562为慢性髓细胞性白血病发生急性变，两者均为难治性白血病，常用来做白血病相关研究，使用这两种细胞模型有更好地实际应用价值。
[0020]莱菔硫烷在制备逆转白血病细胞对阿糖胞苷耐药性药物中的应用。
[0021]本专利技术证明莱菔硫烷可以逆转耐阿糖胞苷白血病细胞的耐药性，因此可以用于制备逆转白血病细胞对阿糖胞苷耐药性药物。
[0022]一种用于制备治疗耐药型白血病药物的药物组合物，所述药物组合物主要包括莱菔硫烷和阿糖胞苷；所述药物组合物中莱菔硫烷和阿糖胞苷的摩尔比为8:14
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25。
[0023]本专利技术通过莱菔硫烷和阿糖胞苷的联合用药证明，在低浓度的莱菔硫烷作用下，使用低浓度的阿糖胞苷即可达到高浓度阿糖胞苷对耐药白血病细胞的效果。
[0024]优选地，所述耐药型白血病为耐阿糖胞苷白血病。
[0025]优选地，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体和/或辅料。
[0026]本专利技术的有益效果为：
[0027]本专利技术先构建耐阿糖胞苷白血病细胞株KG1a/Ara
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C和K562/Ara
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C，检测发现MRP1和P
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gp蛋白表达量显著升高，对罗丹明123外排能力增强。但经过SFN诱导，MRP1和P
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gp蛋白表达量随着莱菔硫烷浓度的增加而降低，并逆转了对罗丹明123的外排功能。又通过联合用药证明，低浓度的阿糖胞苷与莱菔硫烷联合用药，即可达到高浓度阿糖胞苷对耐药白血病细胞的效果，充分说明莱菔硫烷可以逆转耐阿糖胞苷白血病细胞的耐药性。
附图说明
[0028]图1为本专利技术实施例2中不同浓度Ara
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C作用于KG1a、K562、KG1a/Ara
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C和K562/Ara
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C的细胞增殖图；
[0029]图2为本专利技术实施例2中Ara
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C对KG1a、K562、KG1a/Ara
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C和K562/Ara
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C细胞的IC50图；
[0030]图3为本专利技术实施例2中KG1a、K562、KG1a/Ara
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用。2.根据权利要求1所述的莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用，其特征在于：所述莱菔硫烷通过降低耐阿糖胞苷白血病细胞中多药耐药性相关蛋白1和P
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gp蛋白的表达量，逆转耐阿糖胞苷白血病细胞的外排功能，而达到逆转耐阿糖胞苷白血病细胞对阿糖胞苷耐药性的目的。3.根据权利要求1所述的莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用，其特征在于：包括：使用莱菔硫烷和阿糖胞苷联合作用于耐阿糖胞苷白血病细胞。4.根据权利要求3所述的莱菔硫烷在逆转耐阿糖胞苷白血病细胞耐药性中的应用，其特征在于：所述联合作用的过程中，莱菔硫烷的浓度为5～10μM。5.根据权利要求3所述的莱菔硫烷在逆转耐阿...

【专利技术属性】
技术研发人员：王明永，王凡平，黄晓愉，王闪闪，张伟，任智宏，王亦冰，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：