嗜氮酮类化合物及其制备方法和在制备神经保护药物中的应用技术

本发明专利技术公开了嗜氮酮类化合物及其制备方法和在制备神经保护药物中的应用。本发明专利技术从一株菌核青霉（Penicillium sclerotiorum）UJNMF0503 CGMCC No.40172的发酵物中分离得到如式（Ⅰ）所示的具有神经保护活性的嗜氮酮化合物，在开发具有神经保护作用的药物方面有良好的应用前景；景；式（Ⅰ）。）。）。

【技术实现步骤摘要】
嗜氮酮类化合物及其制备方法和在制备神经保护药物中的应用


[0001]本专利技术属于海洋生物医药
，具体涉及一种嗜氮酮类化合物及其制备方法和在神经保护药物中的应用。

技术介绍

[0002]神经退行性疾病是由中枢神经系统内神经元结构损伤乃至凋亡，使得中枢神经系统受到损伤，影响人体正常认知和运动功能的疾病，常见的神经退行性疾病有：阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化症、亨廷顿病以及中风等，多发于老年群体，因病情发展缓慢、发病率高、治愈率低等特点严重影响患者的健康生活。而目前尚无有效的治疗方法或者治疗药物。研究者认为导致神经细胞死亡的机制主要有以下几方面：氧化应激机制、线粒体机能障碍机制、兴奋性毒性机制、炎症机制及细胞凋亡机制等；同时对神经元的深入研究发现，神经元具有代谢活跃、不饱和脂肪酸含量丰富、过渡金属浓度较高、抗氧化酶含量较低及再生能力差等一些内在特征，使其容易成为氧化应激攻击的目标，成为很多神经退行性疾病的发病因素。因此，发现能够减少氧化应激状态下的神经细胞凋亡和氧化损伤的化合物，对于开发抗神经退行性疾病的神经保护药物具有重要意义。

技术实现思路

[0003]本专利技术提供4个具有神经保护活性的嗜氮酮类化合物，其结构式如式（I）所示。
[0004][0004]式（I）本专利技术提供上述4个化合物的制备方法。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案。
[0006]一种菌核青霉PenicilliumsclerotiorumUJNMF0503，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏号：CGMCCNo.40172。
[0007]一种菌核青霉PenicilliumsclerotiorumUJNMF0503及其发酵产物在生产神经保护药物中的应用。所述菌核青霉PenicilliumsclerotiorumUJNMF0503培养后可产生发酵产物，所述发酵产物中含有神经保护活性物质，其发酵液可用于生产具有神经保护活性的药物或添加剂。
[0008]菌核青霉PenicilliumsclerotiorumUJNMF0503产生的嗜氮酮类化合物，其结构如式（I）所示。
[0009]式（I）嗜氮酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：（1）菌核青霉PenicilliumsclerotiorumUJNMF0503的发酵；
（2）从步骤（1）所得发酵物中经提取得到发酵提取物；（3）步骤（2）中的提取物通过正相硅胶柱、快速中压层析柱、反相C18柱、高效液相色谱等方法进行分离。
[0010]本专利技术提供一种含有步骤（2）中提取物，或式（I）所示化合物在制备神经保护药物或药物中间体中的用途。
[0011]本专利技术提供一种含有步骤（2）中提取物，或式（I）所示化合物的神经保护药物。所述神经保护药物还包括医学上可接受的辅料。所述神经保护药物还可以包括其他有效成分，以增强神经保护效果。
[0012]本专利技术具有以下优点：本专利技术的嗜氮酮类化合物可以通过PenicilliumsclerotiorumUJNMF0503的发酵提取分离获得，具有神经保护活性，在制备神经保护药物方面具有应用潜力。
[0013]生物保藏信息菌核青霉（Penicilliumsclerotiorum）UJNMF0503，于2022年05月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏地址为中国北京，北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号：CGMCCNo.40172。
附图说明
[0014]图1为真菌PenicilliumsclerotiorumUJNMF0503平板培养图片；图2为式（I）所示化合物主要的1H
‑1HCOSY、HMBC相关信息；图3为式（I）所示化合物主要的NOESY相关信息；图4为式（I）所示化合物的ECD谱图；图5为不同物质对H2O2损伤作用下RSC96细胞的存活率的影响。
具体实施方式
[0015]下面结合实施例和附图对本专利技术做进一步说明，但本专利技术不受下述实施例的限制。实施例中的实验方法，如无特别说明，均采用本领域常规技术，实验试剂均为商业购买。
[0016]实施例1发酵物的制备种子培养基的配制方法：土豆浸出液200mL，葡萄糖20g，海盐30g，用水定容到1L。将培养基装入20个500mL的三角烧瓶中，每瓶约150mL，在121℃高压蒸汽灭菌25分钟，备用。
[0017]PDB发酵培养基配置方法：土豆浸出液200mL，葡萄糖20g，海盐30g，用水定容到1L。置于1L三角瓶中，每瓶350mL液体培养基，共150瓶。121℃高压蒸汽灭菌25分钟，备用。
[0018]用无菌竹签挑取适量的真菌PenicilliumsclerotiorumUJNMF0503菌种接种入种子培养基中，28℃摇床（160rpm）培养3天得到种子液，然后用移液枪接种10mL种子液到1L的装有PDB培养基的三角烧瓶中，于28℃静置培养30天后，收取发酵物。
[0019]将发酵物用纱布进行过滤分为菌体和菌液，菌体用95%乙醇浸泡，浸取液回收乙醇后剩余水相，再用乙酸乙酯进行萃取，减压浓缩得到乙酸乙酯提取物A，菌液用等量乙酸乙酯萃取三次，减压浓缩得到乙酸乙酯提取物B，A、B合并得到总提取物。
[0020]实施例2嗜氮酮类化合物的制备按照实施例1的方法获得70L液体培养基，将发酵物用纱布进行过滤分为菌体和菌液，菌体用95%乙醇浸泡、浸取液回收乙醇后剩余水相再用乙酸乙酯进行萃取，减压浓缩得到乙酸乙酯提取物A，菌液用等量乙酸乙酯萃取三次，减压浓缩得到乙酸乙酯提取物B，A、B合并得到总提取物200g。乙酸乙酯提取物用大孔树脂吸附材料进行柱层析，以乙醇/水作为洗脱剂，体积比30%、50%、75%、90%进行洗脱，回收洗脱溶剂，获得4个馏分（Fr.1
‑
Fr.4）。
[0021]Fr.2进一步以二氯甲烷
‑
甲醇作为洗脱剂进行正相硅胶（200
‑
300目）柱层析，根据薄层层析情况合并各个流份，回收洗脱溶剂，获得8个馏分（Fr.2
‑1‑
Fr.2
‑
8）。组分Fr.2
‑
5经过SephadexLH
‑
20（二氯甲烷:甲醇=1:1）分离，根据薄层色谱硅胶板检测，共得到5个馏分（Fr.2.5.1
‑
Fr.2.5.5），Fr.2.5.3经过SephadexLH
‑
20（甲醇）分离，合并得到9个馏分（Fr.2.5.3.1
‑
Fr.2.5.3.9），Fr.2.5.3.6经过FlashRP
‑
C18柱层析以梯度（甲醇/水30:70
‑
100:0）进行洗脱，共得到4个馏分（Fr.2.5.3.6.1
‑
Fr.2.5.3.6.4），Fr.2.5.3.6.1通过半制备高效液相色谱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株菌核青霉（Penicillium sclerotiorum）UJNMF 0503，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No. 40172。2.一种嗜氮酮类化合物，其结构如式（I）所示：其结构如式（I）所示：式（Ⅰ）。3.一种如权利要求1所述的菌核青霉（Penicillium sclerotiorum）UJNMF 0503在制备权利要求2所述的式（I）化合物中的应用，其特征在于，包括以下步骤：（1）菌核青霉（Penicillium sclerotiorum）UJNMF 0503的发酵；（2）从步骤（1）所得发酵物中经提取得到发酵提取物；（3）步骤（2）中的提取物通过正相硅胶柱、快速中压层析柱、反相C18柱、高效液相色谱等方法进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍洁，赵艳芬，朱孔凯，张华，王鑫鑫，陈泽龙，马若萍，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：