一种鉴别保健品和功能食品中非法添加化学药物的LC-HRMS检测方法技术

本发明专利技术提供了一种鉴别和定量保健品和功能食品中非法添加化学药物的LC

【技术实现步骤摘要】
一种鉴别保健品和功能食品中非法添加化学药物的LC
‑
HRMS检测方法


[0001]本专利技术涉及化合物检测
，尤其涉及一种鉴别保健品和功能食品中非法添加化学药物的LC
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HRMS检测方法。

技术介绍

[0002]糖尿病(DM)是一组以高血糖为主要特征的常见代谢性疾病，导致高血糖的主要因素是葡萄糖产量增加，胰岛素分泌和葡萄糖利用的减少。近年来，随着现代人生活质量的提高，糖尿病的发病率也明显升高，继而用药人数也随之增长，这就让不法分子发现其“商机”：在保健食品或一些宣称功能的食品中非法添加化学药物以谋取暴利。而我国食品安全法明确规定,食品中不得添加化学药物。这就为保健食品和食品非法添加的监管带来了巨大的挑战。
[0003]根据国家食品药品监督管理局检验项目批准件(2006005、2007003、2009029、2011008、2013001)和药品检验补充方法(BJS201710、BJS201901)可完成对阿卡波糖、伏格列波糖等27种降糖类非法添加的检测，但就目前的非法添加药物情况，已有的标准不足以满足实际的监管需求。目前临床使用的降糖类药物按结构和理化性质主要分为双胍类(二甲双胍、丁二胍等)、α
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葡萄糖苷酶抑制剂(伏格列波糖、阿卡波糖等)、二肽基肽酶
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4抑制剂(阿格列汀、沙格列汀等)、磺酰脲类胰岛素促泌剂(格列喹酮、格列美脲等)、非磺酰脲类促泌剂(瑞格列奈、那格列奈等)、胰岛素增敏剂(罗格列酮、吡格列酮等)、钠葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂(达格列净、恩格列净等)。其中，阿卡波糖、伏格列波糖、沙格列汀、阿格列汀、西格列汀、利格列汀和瑞格列汀等7种对糖尿病有显著疗效的药物，由于其广泛应用于临床治疗，受众群体较多，应当作为非法添加筛查工作的重点，但上述目前的检验方法尚不包含沙格列汀、阿格列汀、西格列汀、利格列汀和瑞格列汀等5种降糖类化学药物，也不能同时检测这7种药物，存在检测漏洞。
[0004]目前，降糖类化学药物检测方法报道有薄层色谱法、红外光谱法、拉曼光谱法、高效液相色谱法、液相色谱
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串联质谱法、胶体金免疫层析法等。其中，液相色谱
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串联质谱法具有分析时间快、范围广、定性分析结果可靠等特点，是近年来降糖类保健食品中非法添加化学药物检测的主流方法。但上述7种降糖类药物在保健食品检测方面的研究尚未见报道。

技术实现思路

[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种鉴别保健品和功能食品中非法添加化学药物的LC
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HRMS检测方法，包括如下步骤：
[0007](1)样品经超声处理后，固液分离取上清，过滤，得到待测样品；
[0008](2)待测样品按照如下条件进行LC
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HRMS检测进行定性测定：
[0009]色谱条件：采用CORTECS T3色谱柱，柱温28～32℃；流速为0.2～0.4mL
·
min
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1；进
样量1～5μL；流动相为0.08～0.12％甲酸水溶液乙腈梯度洗脱：0～2min，10％乙腈；2～8min，98％B；8～12min，30％B；12～12.5min，10％B；12.5～21min，10％乙腈；
[0010]质谱条件：离子源：电喷雾离子源(ESI)；检测方式：平行反应检测模式(PRM)；扫描方式：正离子模式；离子源温度：280～350℃；鞘气流量：25～35L/hr；辅助气流量：5～9L/hr；辅助气温度：280～350℃；毛细管电压：3.2～3.8KV；
[0011](3)配置非法添加化学药物的标准溶液，绘制标准曲线，对待测样品中的非法添加化学药物进行定量测定。
[0012]优选的，所述非法添加化学药物包括伏格列波糖、阿卡波糖、沙格列汀、阿格列汀、西格列汀、利格列汀和瑞格列汀中的一种或几种。
[0013]优选的，所述样品为固体样品或液体样品；所述固体样品或液体样品以甲醇为介质进行超声处理。
[0014]优选的，所述固体样品和甲醇的质量体积比为1g：45～55ml；所述液体样品和甲醇的体积比为1ml：45～55ml。
[0015]优选的，所述超声处理的时间为8～12min，温度为20～35℃，超声频率为20～40KHz，功率为1500～2500W。
[0016]本专利技术针对市售具有降糖功效的保健食品和功能食品，建立了一种可快速鉴别降糖类保健食品和功能食品中7种非法添加化学药物的LC
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HRMS检测方法，样品只需简单超声提取进样，通过出峰时间、母离子、定性及定量离子即可判断该样品中是否存在非法添加的化学药成分并可对其进行定量分析。
[0017]本专利技术以市售具有降糖功效的保健食品和功能食品作为研究对象。采用甲醇超声提取、液相色谱
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串联高分辨质谱技术，建立了保健食品和功能食品中非法添加化合物的检测方法，补充了已有检测标准和文献报道方法的空白，减少了检漏风险，以期为打击非法添加行为提供技术支持。
附图说明
[0018]图1为伏格列波糖定量离子对的PRM色谱图；
[0019]图2为阿卡波糖定量离子对的PRM色谱图；
[0020]图3为沙格列汀定量离子对的PRM色谱图；
[0021]图4为阿格列汀定量离子对的PRM色谱图；
[0022]图5为西格列汀定量离子对的PRM色谱图；
[0023]图6为利格列汀定量离子对的PRM色谱图；
[0024]图7为瑞格列汀定量离子对的PRM色谱图。
具体实施方式
[0025]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0026]以下实施例所用仪器和试剂包括：Thermo Q Exactive液质联用仪(美国Thermo公司)；THC
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10B超声波提取器(济宁天华超声电子仪器有限公司)；HH
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4数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)；PURELAB Flex超纯水系统(英国ELGA公司)；3K15冷冻离心机(德国
Sigma公司)；CORTECS T3色谱柱(2.1mm
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100mm，2.7μm)(美国沃特世公司)。
[0027]甲醇(色谱纯，美国迪马公司)；甲酸(色谱纯，天津科密欧化学试剂有限公司)；标准品：伏格列波糖(批号：100826
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202004，纯度：99.9％，购于中国食品药品检定研究院)；阿卡波糖(批号：100808
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201905，纯度：99.4％，购于中国食品药品检定研究院)；瑞格列汀(批号：13531，纯度：97.35％，购于美国QCSRM公司)；阿格列汀(批号：13549，纯度：92.37％，购于美国QCSRM公司)；沙格列汀(批号：13488，纯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鉴别保健品和功能食品中非法添加化学药物的LC
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HRMS检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)样品经超声处理后，固液分离取上清，过滤，得到待测样品；(2)待测样品按照如下条件进行LC
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HRMS检测进行定性测定：色谱条件：采用CORTECS T3色谱柱，柱温28～32℃；流速为0.2～0.4mL
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min
‑1；进样量1～5μL；流动相为0.08～0.12％甲酸水溶液
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乙腈，梯度洗脱：0～2min，10％乙腈；2～8min，98％B；8～12min，30％B；12～12.5min，10％B；12.5～21min，10％乙腈；质谱条件：离子源：电喷雾离子源(ESI)；检测方式：平行反应检测模式(PRM)；扫描方式：正离子模式；离子源温度：280～350℃；鞘气流量：...

【专利技术属性】
技术研发人员：董培智，任静，赵丽红，刘晓普，张禄，申国华，
申请(专利权)人：山西省检验检测中心山西省标准计量技术研究院，
类型：发明
国别省市：