一种检测非洲猪瘟的四重荧光定量PCR检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株的四重荧光定量PCR检测试剂盒，所述试剂盒包含一组检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株的特异性引物和荧光探针，所述特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、2、4、5、7、8、10、11所示；所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3、6、9、12所示。本发明专利技术设计四重荧光定量PCR检测方法，可以同时对4个基因进行检测，而且四对引物和探针具有相对一致的扩增效率。本发明专利技术基于国内非洲猪瘟流行毒株特点，建立了鉴别非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型野毒株、基因Ⅱ型野毒株与基因Ⅱ型缺失毒株的方法。型缺失毒株的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种检测非洲猪瘟的四重荧光定量PCR检测试剂盒


[0001]本专利技术属于生物检测
，特别涉及一种检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株的四重荧光定量PCR检测试剂盒。

技术介绍

[0002]非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种毁灭性的出血性疾病，主要影响家猪和野猪，给养猪业造成严重经济损失，威胁全球粮食安全，目前尚无商业疫苗或有效治疗方法。非洲猪瘟被世界动物卫生组织列为法定传染病，被联合国粮食及农业组织列为主要跨境动物疫病。ASF由非洲猪瘟病毒(African swinefever virus,ASFV)引起，而ASFV是唯一一种在节肢动物体内复制并由节肢动物传播的DNA病毒。
[0003]疫苗是防控ASF流行的最有效和最经济的方法，包括灭活疫苗、弱毒疫苗、亚单位疫苗和基因疫苗等。基因缺失疫苗是当前最有可能成功的ASF疫苗，也是世界各大研究机构的研究重点。目前全球内构建的ASFV基因缺失疫苗已有多种，疫苗毒株缺失的基因主要有MGF_360
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9L、MGF_360
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一组同时检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株的特异性引物和荧光探针组合，其特征在于，所述特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、2、4、5、7、8、10、11所示；所述特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3、6、9、12所示。2.根据权利要求1所述特异性引物和荧光探针组合，其特征在于，所述探针的5'端分别修饰不同的荧光基团，3'端分别修饰相应的淬灭基团。3.根据权利要求2所述特异性引物和荧光探针组合，其特征在于，所述荧光基团为FAM、VIC、Cy5和TAMRA，所述淬灭基团为BHQ1、BHQ1、BHQ3、BHQ2。4.权利要求1所述特异性引物和荧光探针组合在制备检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株试剂盒中的应用。5.一种同时检测非洲猪瘟Ⅰ型、Ⅱ型野毒株和/或基因Ⅱ型缺失株的四重荧光定量...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏金辉，李朋辉，李庆阳，周岩，王辉，
申请(专利权)人：河北大北农农牧食品有限公司，
类型：发明
国别省市：