混菌避免路径竞争的模块及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及混菌避免路径竞争的模块及其应用。本发明专利技术通过混菌共培养策略，利用简单碳源为底物，实现多基因、长路径、复杂网状路径的甾体化合物的从头合成。利用网状路径线性化策略，实现路径简化、并回避不想要的中间反应/竞争反应。氮源限制培养策略中，培养基的氮源浓度较低，减少了发酵过程中氮源投料量，使发酵更为经济。在共培养体系中，通过简便易行地改变几种菌株的初始接菌比例，对发酵过程中菌群比例进行调整。由于不同菌群所含路径元件不同，因此可以实现通过调整初始接菌比例，对路径元件表达强度进行调整。整。

【技术实现步骤摘要】
混菌避免路径竞争的模块及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及混菌避免路径竞争的模块及其应用。

技术介绍

[0002]甾体激素是一类以环戊烷多氢菲母核为基本结构是四环脂肪族碳氢化合物，该类化合物种类繁多，目前全世界生产的甾体药物已有400多种，以其抗炎、抗过敏、调节内分泌等功效得到广泛应用，到2017年甾体激素药物全球销售额达1000亿美元，为第二大类化学药物。由CYP17
‑
3β
‑
HSD构成的“孕烯醇酮
‑
雄烯二酮”合成路径位于脊椎动物类固醇合成途径中的交叉路口，其中包含多种甾体激素药物的关键前体(孕烯醇酮、孕酮、17
‑
羟基孕酮、17
‑
羟基孕烯醇酮、DHEA、雄烯二酮、睾酮)。
[0003]甾体激素中间体生产工艺的发展历经植物提取皂素法、化学全合成法、半合成法、新型的微生物合成法等阶段。植物提取法和微生物转化法是生产甾体激素类药物的主要方法。但动植物提取法成本较高，来源受限、同时伴有环境污染等问题。化学全合成甾体分子会涉及本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.表达如下任意项在合成甾体类化合物和/或甾体激素药物中的应用：(I)、来源于Equuscaballus、Ovisaries、Mesocricetusauratus或Xenopuslaevis的CYP17A1和POR；和/或(II)、来源于Equuscaballus、Ovisaries或Mesocricetusauratus的CYB5；和/或(III)、来源于Bostaurus、Vacciniavirus、Arabidopsisthaliana、Mycobacterium tuberculosis或Homosapiens(II型)的3β
‑
HSD；和/或(IV)、来源于Susscrofa的mCYP11A1。2.模块，其特征在于，包括表达如下任意项：(I)、来源于Equuscaballus、Ovisaries、Mesocricetusauratus或Xenopuslaevis的CYP17A1和POR；和/或(II)、来源于Equuscaballus、Ovisaries或Mesocricetusauratus的CYB5；和/或(III)、来源于Bostaurus、Vacciniavirus、Arabidopsisthaliana、Mycobacterium tuberculosis或Homosapiens(II型)的3β
‑
HSD；和/或(IV)、来源于Susscrofa的mCYP11A1。3.质粒，其特征在于，包括如权利要求2所述的表达元件。4.宿主，其特征在于，包括如权利要求3所述的质粒。5.如权利要求4所述的宿主，其特征在于，包括模块一、模块二、模块三、模块四或模块五中的一种或多种：所述模块一包括：来源于Equuscaballus、Ovisaries、Mesocricetusauratus或Xenopus laevis的CYP17A1和POR；所述模块一还包括IntD整合位点和/或两端带有LoxP位点的Leu2标签；和/或所述模块二包括：来源于Equuscaballus、Ovisaries或Mesocricetusauratus的CYB5；所述模块二还包括IntB整合位点和/或Ura3标签；和/或所述模块三包括：来源于Musmusculus、Bostaurus、Vacciniavirus、Arabidopsisthaliana、Mycobacteriumtuberculosis或Homosapiens(II型)的3β
‑
HSD和来源于Susscrofa的mCYP11A1；所述模块三连接的载体包括pINA1269；和/或所述模块四包括：来源于Ovisaries和Mesocricetusauratus的CYP17A1和POR；所述模块四还包括IntF整合位点和/或两端带有LoxP位点的Leu2标签；所述模块五包括：来源于Equuscaballus的CYP17A1和POR；所述模块五还包括IntF整...

【专利技术属性】
技术研发人员：元英进，张若思，王颖，肖文海，姚明东，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：