包含抗原载荷的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开和描述了多核苷酸、支架和盒。具体地，这些多核苷酸可具有包含信号/前导子

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含抗原载荷的多核苷酸
[0001]背景
[0002]对CD8+和CD4+淋巴细胞两者的刺激对于用重组疫苗进行的有效免疫疗法是所需要的，并且近年来，基于DNA或RNA核酸的疫苗变得越来越重要。然而，这些类型的疫苗遭受CD4+淋巴细胞的很少刺激或无刺激，而刺激CD4+淋巴细胞是对于重组疫苗的功效至关重要的元素。因此，已开发出多种基因操纵以增加疫苗的免疫原性，例如通过改变与来自细菌或病毒的外来表位融合的一级序列和通过由抗原和免疫调节剂(例如细胞因子或趋化因子)组成的嵌合产物进行。
[0003]概述
[0004]本公开内容提供与多核苷酸、支架和盒相关的实例。本公开内容还提供与融合分子相关的实例，该融合分子包含一种或多种被工程改造为并入至支架中的载荷的多肽抗原，例如肿瘤抗原、新抗原、患者特异性抗原、共有抗原和感染原抗原，其中此类支架包含亲本受体分子的一个或多个区，例如信号序列、胞外区、跨膜区和/或细胞质区，以用于在细胞表面或在特定细胞区室处进行抗原呈递。本公开内容还提供与可用于许多应用(包括在动物中诱导免疫或治疗反应)的多核苷酸和支架相关的实例。具体地，本公开内容的多核苷酸和支架基于采用CD1和其他细胞受体的设计。
[0005]本公开内容还提供替代的疫苗模式，包括并入抗原载荷以用作疫苗的支架和盒。
[0006]本公开内容进一步描述编码支架和盒的多核苷酸，例如DNA、RNA或mRNA以及制造和使用它们的方法。
[0007]本公开内容的一个方面涉及具有下式的多核苷酸：信号/前导子
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载荷
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TMD
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CYD，其中该信号/前导子编码与载荷同读框和在载荷上游的信号序列、前导序列或分选序列；该载荷选自抗原载荷区、可检测剂和治疗剂；该TMD编码来自一种或多种选自CD1d、CD1e、LDLR、LDLRP和LRP1蛋白质的蛋白质或同种型的跨膜区的一部分；和该CYD编码来自一种或多种选自CD1d、CD1e、LDLR、LDLRP和LRP1蛋白质的蛋白质或同种型的细胞质区的全部或一部分。
[0008]在一些方面，载荷是具有式(An1)n
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Xo
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(An2)p的抗原载荷区，其包含：第一编码抗原载荷(An1)，其中n是1至10的整数；编码的接头区(X)，其中o是0至10的整数；和第二编码抗原载荷(An2)，其中p是0至10的整数。
[0009]在一些方面，第一编码的抗原载荷或第二编码的抗原载荷编码肿瘤抗原或感染原抗原的全部或一部分。
[0010]在一些方面，第一编码的抗原载荷或第二编码的抗原载荷包含序列SIINFEKL。
[0011]在一个方面，该载荷是选自以下的可检测剂：有机小分子、无机化合物、纳米粒子、酶或酶底物、荧光材料、发光材料、生物发光材料、化学发光材料、放射性材料、造影剂、钆、氧化铁、单晶氧化铁纳米粒子、超小超顺磁氧化铁、锰螯合物、硫酸钡、碘化造影介质、微泡和全氟碳化物。
[0012]在一个方面中，TMD和CYD来源于相同同种型或蛋白质。在另一个方面，TMD和CYD来源于不同同种型或蛋白质。
[0013]在一个方面，信号/前导子编码与TMD、CYD或两者来自相同的同种型或蛋白质的信号序列、前导序列或分选序列。在一个方面中，TMD编码序列MGLIALAVLACLLFLLIVGFT。在另一个方面，CYD编码序列SRFKRQTSYQGVL。在又一个方面，信号序列编码序列MGCLLFLLLWALLQAWGSA。
[0014]本公开内容的一个方面涉及具有式信号/前导子
‑
载荷
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PRM的多核苷酸，其中该信号/前导子编码与载荷同读框和在载荷上游的信号序列、前导序列或分选序列；该载荷选自抗原载荷区、可检测剂和治疗剂；并且PRM编码来自一种或多种选自CD1d、CD1e、LDLR、LDLRP和LRP1蛋白质的蛋白质或同种型的至少一个亲本受体分子区的全部或一部分。
[0015]在一个方面，亲本受体分子选自胞外区、跨膜区和细胞质区。
[0016]本公开内容的一个方面涉及包含所公开的多核苷酸中的至少一种的宿主细胞。
[0017]本公开内容的一个方面涉及一种药物组合物，其包含所公开的多核苷酸中的至少一种或宿主细胞。在一个方面，药物组合物呈疫苗形式。在另一个方面，药物组合物进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂或一种或多种额外药物活性成分。在另一个方面，该药学上可接受的赋形剂选自抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣、压缩助剂、崩解剂、染料、润肤剂、乳化剂、填充剂、成膜剂或包衣、调味剂、芳香剂、助滑剂、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮剂或分散剂、甜味剂和水合水。
[0018]本公开内容的一个方面涉及一种治疗性多核苷酸，其包含与递送媒介物一起配制的所公开多核苷酸中的至少一种。在一个方面，多核苷酸用递送媒介物囊封。在另一个方面，递送媒介物选自两亲性分子、氨基
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脂化肽和三级氨基脂化阳离子肽。
[0019]本公开内容的一个方面涉及一种治疗性组合物，其包含治疗性多核苷酸。在另一个方面，治疗性组合物呈疫苗形式。在另一个方面，治疗性组合物进一步包含一种或多种治疗上可接受的赋形剂或一种或多种额外治疗活性成分。在一个方面，该治疗上可接受的赋形剂选自抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣、压缩助剂、崩解剂、染料、润肤剂、乳化剂、填充剂、成膜剂或包衣、调味剂、芳香剂、助滑剂、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮剂或分散剂、甜味剂和水合水。
[0020]本公开内容的一方面包括施用至少一种所公开的药物组合物或治疗性组合物，具体地，其中向有需要的受试者施用治疗有效剂量、预防有效剂量或适当成像剂量的药物组合物或治疗性组合物。
[0021]本公开内容的一个方面包括治疗有需要的受试者、对其进行疫苗接种或使其免疫的方法，该方法包括向受试者施用所公开的多核苷酸中的至少一种、宿主细胞、所公开的药物组合物中的至少一种或所公开的治疗性组合物中的至少一种。
[0022]在一个方面，受试者是哺乳动物。在另一个方面，受试者是人类。
[0023]在本公开内容的一个方面，所公开的多核苷酸，包括但不限于所公开的宿主细胞、所公开的药物组合物、所公开的治疗性多核苷酸、所公开的治疗性组合物或所公开的方法，其中该多核苷酸会进行以下中的一个：a)实现抗原加工和呈递；b)将蛋白质运输至抗原呈递途径；c)提高T细胞活化；d)增加克隆多样性；和e)其任何组合。
[0024]本公开内容的一个方面涉及一种具有式[信号/前导子]‑
[(An1)n
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Xo
‑
(An2)p]‑
[TMD]‑
[CYD]]的多核苷酸，其中[信号/前导子]编码与抗原载荷区同读框并且在抗原载荷区上游的任何信号序列、前导序列或分选序列；[(An1)n
‑
Xo
‑
(An2)p]包含抗原载荷区，所述
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种多核苷酸，其具有下式：信号/前导子
‑
载荷
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TMD
‑
CYD其中所述信号/前导子编码与载荷同读框和在载荷上游的信号序列、前导序列或分选序列；所述载荷选自抗原载荷区、可检测剂和治疗剂；所述TMD编码来自一种或多种选自CD1d、CD1e、LDLR、LDLRP和LRP1蛋白质的蛋白质或同种型的跨膜区的一部分；和所述CYD编码来自一种或多种选自CD1d、CD1e、LDLR、LDLRP和LRP1蛋白质的蛋白质或同种型的细胞质区的全部或一部分。2.权利要求1的多核苷酸，其中所述载荷是具有式(An1)n
‑
Xo
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(An2)p的抗原载荷区，其包含：(a)第一编码的抗原载荷(An1)，其中n是1至10的整数(b)编码的接头区(X)，其中o是0至10的整数，和(c)第二编码的抗原载荷(An2)，其中p是0至10的整数。3.权利要求2的多核苷酸，其中所述第一编码的抗原载荷或所述第二编码的抗原载荷编码肿瘤抗原或感染原抗原的全部或一部分。4.权利要求2或权利要求3的多核苷酸，其中所述第一编码的抗原载荷或所述第二编码的抗原载荷包含序列SIINFEKL。5.权利要求1的多核苷酸，其中所述载荷是选自以下的可检测剂：有机小分子、无机化合物、纳米粒子、酶或酶底物、荧光材料、发光材料、生物发光材料、化学发光材料、放射性材料、造影剂、钆、氧化铁、单晶氧化铁纳米粒子、超小超顺磁氧化铁、锰螯合物、硫酸钡、碘化造影介质、微泡和全氟碳化物。6.前述权利要求中任一项的多核苷酸，其中所述TMD和所述CYD来源于相同同种型或蛋白质。7.权利要求1至5中任一项的多核苷酸，其中所述TMD和所述CYD来源于不同同种型或蛋白质。8.前述权利要求中任一项的多核苷酸，其中所述信号/前导子编码与所述TMD、所述CYD或两者来自相同的同种型或蛋白质的信号序列、前导序列或分选序列。9.前述权利要求中任一项的多核苷酸，其中所述TMD编码序列MGLIALAVLACLLFLLIVGFT。10.前述权利要求中任一项的多核苷酸，其中所述CYD编码序列SRFKRQTSYQGVL。11.前述权利要求中任一项的多核苷酸，其中所述信号序列编码序列MGCLLFLLLWALLQAWGSA。12.一种多核苷酸，其具有下式：信号/前导子
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载荷
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PRM其中所述信号/前导子编码与载荷同读框和在载荷上游的信号序列、前导序列或分选序列；所述载荷选自抗原载荷区、可检测剂和治疗剂；和所述PRM编码来自一种或多种选自CD1d、CD1e、LDLR、LDLRP和LRP1蛋白质的蛋白质或同
种型的至少一个亲本受体分子区的全部或一部分。13.权利要求12的多核苷酸，其中所述亲本受体分子选自...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：纳特科瑞克股份有限公司，
类型：发明
国别省市：