高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法技术

本申请提供一种高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法，涉及食品检测技术领域。高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法，包括：测定待测葡萄酒中的碳酸甲乙酯的含量，然后根据表示葡萄酒二甲基二碳酸盐添加量与碳酸甲乙酯含量关系的第一标准工作曲线，计算得到所述待测葡萄酒中的二甲基二碳酸盐的含量。本申请提供的高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法，稳定性高，灵敏度高，能够满足非法添加二甲基二碳酸盐的检测需求。添加二甲基二碳酸盐的检测需求。添加二甲基二碳酸盐的检测需求。

【技术实现步骤摘要】
高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法


[0001]本申请涉及食品检测领域，尤其涉及一种高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法。

技术介绍

[0002]二甲基二碳酸盐(DMDC)，是一种防腐剂，主要作用是抑制微生物的生长和繁殖，以延长食品的保存时间，抑制物质腐败。我国GB 2760
‑
2014允许DMDC在饮料中使用，限量为0.25g/kg，但未规定其在葡萄酒中允许添加使用。欧美多国均对其在葡萄酒中的使用作出规定：FDA规定DMDC在葡萄酒、无醇葡萄酒或低醇葡萄酒限量为200mg/kg。欧盟指令95/2/EC规定DMDC为食品添加剂，允许用于不含酒精的调味饮料，不含酒精的葡萄酒，加入量为250mg/L，但最终产品不得检出DMDC残留。DMDC允许添加在葡萄酒中，不得超过200mg/L，在市场销售的葡萄酒中不得检测出DMDC残留。澳大利亚也规定葡萄酒中DMDC的添加量不得超过200mg/L。因此，进口葡萄酒中存在添加DMDC的风险较高，有必要开展检测。
[0003]然而，目前我国尚未建立葡萄酒中DMDC的检测标准方法。

技术实现思路

[0004]本申请的目的在于提供一种高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法，以解决上述问题。
[0005]为实现以上目的，本申请采用以下技术方案：
[0006]一种高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法，包括：
[0007]测定待测葡萄酒中的碳酸甲乙酯的含量，然后根据表示葡萄酒二甲基二碳酸盐添加量与碳酸甲乙酯含量关系的第一标准工作曲线，计算得到所述待测葡萄酒中的二甲基二碳酸盐的含量。
[0008]优选地，测定待测葡萄酒中的碳酸甲乙酯的含量的方法包括：
[0009]将所述待测葡萄酒与碳酸二乙酯内标溶液、正己烷混合，然后振荡提取、离心处理；
[0010]将上层正己烷提取液用气相色谱质谱联用仪测定得到碳酸甲乙酯和碳酸二乙酯色谱峰面积的比值；
[0011]根据表示碳酸甲乙酯浓度与碳酸甲乙酯和碳酸二乙酯色谱峰面积比值的关系的第二标准工作曲线，得到所述待测葡萄酒中的碳酸甲乙酯的含量。
[0012]优选地，所述第二标准工作曲线通过以下方法获得：
[0013]将空白基质葡萄酒与碳酸甲乙酯标准溶液混合，得到不同浓度的碳酸甲乙酯系列标准工作液；
[0014]测定所述碳酸甲乙酯系列标准工作液的碳酸甲乙酯和碳酸二乙酯色谱峰面积的比值，以所述碳酸甲乙酯系列标准工作液的浓度为横坐标，以碳酸甲乙酯和碳酸二乙酯色谱峰面积的比值为纵坐标，拟合得到所述第二标准工作曲线。
[0015]优选地，所述气相色谱质谱联用仪中，气相色谱条件包括：
[0016]色谱柱为DB
‑
WAX石英毛细管柱，30m
×
0.25mm
×
0.25μm；
[0017]色谱柱温度程序为：40℃保持5min，然后以10℃/min程序升温至150℃，再以40℃/min升温至250℃，保持5min；
[0018]载气为氦气，纯度≥99.999％；流速为1mL/min；
[0019]进样口温度为200℃；
[0020]进样量为1μL；
[0021]进样方式为无分流进样，3min后打开分流阀和隔垫吹扫阀。
[0022]优选地，所述气相色谱质谱联用仪中，质谱条件包括：
[0023]电离能量为70eV，电力方式为EI，离子源温度为230℃，传输线温度为240℃，测定方式为选择离子监测，溶剂延迟为5min。
[0024]优选地，所述碳酸甲乙酯的检出限为0.25mg/L，定量限为0.50mg/L。
[0025]优选地，所述第一标准工作曲线通过以下方法获得：
[0026]将检测出碳酸甲乙酯的葡萄酒样品与二甲基二碳酸盐标准溶液混合，得到不同浓度的二甲基二碳酸盐系列标准工作液，用气相色谱质谱联用仪测定得到所述二甲基二碳酸盐系列标准工作液的碳酸甲乙酯含量C
m
；
[0027]检测不添加所述二甲基二碳酸盐标准溶液的所述葡萄酒样品中的碳酸甲乙酯含量C
s
，计算C
m
与C
s
的差值得到所述二甲基二碳酸盐系列标准工作液的实际碳酸甲乙酯含量；
[0028]以二甲基二碳酸盐添加量为横坐标、以所述实际碳酸甲乙酯含量为纵坐标，得到所述第一标准工作曲线。
[0029]优选地，所述二甲基二碳酸盐标准溶液的制备方法包括：
[0030]将二甲基二碳酸盐标准品用丙酮溶解，配制得到目标浓度的标准溶液。
[0031]优选地，所述二甲基二碳酸盐系列标准工作液在检测前静置时间不低于7天。
[0032]优选地，所述待测葡萄酒为起泡葡萄酒；
[0033]所述起泡葡萄酒检测前进行排气操作：将恒温至15
‑
20℃的起泡葡萄酒通过摇动进行放气，直至无气体逸出为止，然后用滤纸过滤备用。
[0034]与现有技术相比，本申请的有益效果包括：
[0035]本申请提供的高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法，利用二甲基二碳酸盐与葡萄酒中的乙醇进行反应，并对其代谢产物碳酸甲乙酯开展检测，进而得到二甲基二碳酸盐的含量；该方法稳定性高，灵敏度高，能够满足非法添加二甲基二碳酸盐的检测需求，特别适用于海关检测使用。该方法有效解决了“由于二甲基二碳酸盐热稳定性极差，使用常规的气相色谱设备无法检测葡萄酒中的二甲基二碳酸盐”的问题，以及“现有标准GB 1886.68
‑
2015《食品安全国家标准食品添加剂二甲基二碳酸盐》仅适合较大量添加，不适用于葡萄酒中痕量的二甲基碳酸盐的检测”的问题。
附图说明
[0036]为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对本申请范围的限定。
[0037]图1为葡萄酒提取液GC
‑
MS谱图；
[0038]图2为葡萄酒提取液GC谱图；
[0039]图3为用柱子HP
‑
INNOWAX进行实验的色谱图；
[0040]图4为用柱子DB
‑
WAX进行实验的色谱图；
[0041]图5为升温程序优化后葡萄酒加标样品分离色谱图；
[0042]图6为碳酸甲乙酯离子碎片图；
[0043]图7为内标
‑
碳酸二乙酯离子碎片图；
[0044]图8为不同溶剂提取的碳酸甲乙酯绝对回收率柱状图；
[0045]图9为使用不同的正己烷溶剂提取体积提取效果柱状图；
[0046]图10为不同提取时间提取效果柱状图；
[0047]图11为不同去泡方式对碳酸甲乙酯的影响柱状图；
[0048]图12为红葡萄酒检出限加标色谱图；
[0049]图13为甜白葡萄酒检出限本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高灵敏检测葡萄酒中二甲基二碳酸盐的方法，其特征在于，包括：测定待测葡萄酒中的碳酸甲乙酯的含量，然后根据表示葡萄酒二甲基二碳酸盐添加量与碳酸甲乙酯含量关系的第一标准工作曲线，计算得到所述待测葡萄酒中的二甲基二碳酸盐的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，测定待测葡萄酒中的碳酸甲乙酯的含量的方法包括：将所述待测葡萄酒与碳酸二乙酯内标溶液、正己烷混合，然后振荡提取、离心处理；将上层正己烷提取液用气相色谱质谱联用仪测定得到碳酸甲乙酯和碳酸二乙酯色谱峰面积的比值；根据表示碳酸甲乙酯浓度与碳酸甲乙酯和碳酸二乙酯色谱峰面积比值的关系的第二标准工作曲线，得到所述待测葡萄酒中的碳酸甲乙酯的含量。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第二标准工作曲线通过以下方法获得：将空白基质葡萄酒与碳酸甲乙酯标准溶液混合，得到不同浓度的碳酸甲乙酯系列标准工作液；测定所述碳酸甲乙酯系列标准工作液的碳酸甲乙酯和碳酸二乙酯色谱峰面积的比值，以所述碳酸甲乙酯系列标准工作液的浓度为横坐标，以碳酸甲乙酯和碳酸二乙酯色谱峰面积的比值为纵坐标，拟合得到所述第二标准工作曲线。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述气相色谱质谱联用仪中，气相色谱条件包括：色谱柱为DB
‑
WAX石英毛细管柱，30m
×
0.25mm
×
0.25μm；色谱柱温度程序为：40℃保持5min，然后以10℃/min程序升温至150℃，再以40℃/min升温至250℃，保持5min；载气为氦气，纯度≥99.999％；流速为1mL/min；进样口温度为200℃；进样量为1μL；进样方式为无分流进样，3min后打开分流阀和隔垫吹扫阀...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈波，罗洁，何纯点，涂小珂，靳保辉，易冰清，
申请(专利权)人：深圳海关食品检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：