一种基于UPLC-Q-TOF-MS法同时测定鱼肉中19种氯酚类化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于UPLC

【技术实现步骤摘要】
一种基于UPLC
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Q
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TOF
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MS法同时测定鱼肉中19种氯酚类化合物的方法


[0001]本专利技术涉及一种基于UPLC
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Q
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TOF
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MS法同时测定鱼肉中19种氯酚类化合物的方法，属于食品安全检测


技术介绍

[0002]氯酚类化合物(Chlorophenols，CPs)被广泛用作杀虫剂、有机溶剂和药物等。常见的CPs共有19种，均是由氯原子取代苯环上的部分氢原子形成，根据取代的氯原子数可将CPs划分为一氯酚、二氯酚、三氯酚、四氯酚和五氯酚。CPs普遍存在于炼油、炼焦、煤气和纸浆等工业废水和生活污水中，是一类稳定性极强和难降解的化合物，且能在环境中长久的留存，并可通过食物链在生物体内富集和累积。长期接触或摄入含氯酚化合物可引起头昏、皮肤瘙痒、贫血及各种神经系统疾病，过量摄入后可导致急性中毒。因此，许多国家纷纷出台相关法律政策以限制对含氯化合物的使用。
[0003]农业部公告第250号规定所有食品动物禁用五氯酚酸钠，在动物源食品中不得检出。为进一步规范食品安全监督抽检工作，《国家食品安全监督抽检实施细则(2022年版)》明确规定了畜禽肉及其副产品检测五氯酚酸钠项目。
[0004]由于目前国内外的法律法规多局限于纺织品、皮革和畜禽产品，且规定酚类限量标准也多针对五氯酚及其盐类化合物，而对于水产品中氯酚的限量还尚无相关标准。
[0005]作为与畜禽肉类、蛋类并列的三大动物性食物之一，动物性水产品约占人类动物蛋白摄入量的30％，与畜禽肉类相比，水产品不仅具有特殊的营养健康功能，而且在生产上还具有更好的经济性能和生态效益。考虑到当前含氯酚的工业废水在我国工业废水中占据较大比例，而水环境的污染必然对生活其中的水产品造成污染，从而进一步影响人类健康。由此可见，对水产品中CPs含量的监测显得尤为重要。
[0006]目前，对CPs的检测方法有气相色谱
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质谱法(GC
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MS)，液相色谱
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质谱法(LC
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MS/MS)。例如，钟惠英等人建立了液液萃取与GC
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MS相结合的方法测定了水产品19种CPs的含量，该方法的平均回收率为55.2％
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125％，方法检出限在0.2
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0.4μg/kg。王成云等人利用固相萃取结合GC
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MS建立了纸和纸制品中19种氯酚的检测方法，该方法的平均回收率为81.35％
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93.48％，定量限为2μg/kg。周敏等人建立了液液萃取
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LC
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MS/MS法测定黄喉中五氯酚酸钠，该方法检出限为0.2μg/kg，样品回收率为80.3％
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91.7％。王连珠等人利用超高效液相色谱
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串联质谱(UPLC
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MS/MS)测定动物源性食品中五氯酚及其钠盐，加标回收率为73.2％
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108.4％，定量限为1.0μg/kg。上述方法的准确性和精密度均能符合污染物分析要求，但是利用GC
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MS检测前需要衍生，这无疑增加了实验过程的繁琐性和操作的复杂性，并且由于19种酚类物质结构极其相似，存在同分异构体，上述方法通常是难以将其中部分物质进行很好的分离，造成部分物质无法准确的定性定量，导致灵敏度较低。
[0007]基于此，本专利技术基于QuEChERS前处理与超高效液相色谱
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四极杆飞行时间质谱(UPLC
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Q
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TOF
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MS)建立一种可以同时快速检测鱼肉中19种CPs的方法，能够将19种酚类物质
很好的分离，方法准确、快速、重复性好，为鱼肉中19种氯酚含量的高通量快速检测提供了实用可靠的技术手段。

技术实现思路

[0008]为了解决现有技术存在的技术缺陷，本专利技术提供了一种基于UPLC
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Q
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TOF
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MS法同时测定鱼肉中19种氯酚类化合物的方法，鱼肉样品采用QuEChERS前处理方法，经BEH C
18
(100mm
×
2.1mm，1.7μm)色谱柱分离，以乙腈
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1mM甲酸铵为流动相梯度洗脱，流速为0.4mL/min，柱温30℃，采用大气压力化学电离源(APCI)电离，负离子检测，全扫描模式进行筛查和定量。该方法分离度高、准确、快速、重复性好，为鱼肉中19种氯酚含量的高通量快速检测提供了实用可靠的技术手段。
[0009]本专利技术的目的是提供一种基于UPLC
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Q
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TOF
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MS法同时测定鱼肉中19种氯酚类化合物的方法，所述方法包括如下步骤：
[0010](1)样品提取
[0011]称取鱼肉样品于离心管中，加入乙酸乙酯，均质，超声，离心，取上层有机相；然后将有机相转移至装有C18和MgSO4的离心管中，涡旋振荡，再超声、离心，取上清液，氮吹至干后，用乙腈
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水复溶，将复溶液过有机滤膜后，得待测样品提取液；
[0012](2)鱼肉基质标准溶液配制
[0013]以步骤(1)同样的方法提取的空白鱼肉提取液作为基质溶液，配制一系列浓度的19种氯酚化合物混合标准品的标准溶液；
[0014](3)含量测定
[0015]将步骤(2)制备的一系列浓度的19种氯酚化合物混合标准品的标准溶液和步骤(1)制备的待测样品提取液，采用UPLC
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Q
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TOF
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MS测定，以19种氯酚混合标准品浓度为横坐标，以每个目标分析物的峰面积为纵坐标，构建定量关系模型；依据该定量关系模型和待测样品提取液的峰面积，计算待测样品中氯酚类化合物的含量。
[0016]在一种实施方式中，步骤(3)所述UPLC
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Q
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TOF
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MS测定时的液相色谱条件为：色谱柱：ACQUITY
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UPLC
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BEH
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C18(100mm
×
2.1mm，1.7μm)，柱温30～35℃；流速：0.4～0.6mL/min；流动相：A为甲酸铵水溶液，B为乙腈；梯度洗脱，进样量：3μL。
[0017]在一种实施方式中，所述甲酸铵的浓度为0.5～5mmol/L，优选为1mmol/L。
[0018]在一种实施方式中，所述梯度洗脱的程序为：0
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10min，20％
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50％乙腈相，10
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11min，50％
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95％乙腈相，11
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15min，95％乙腈相，15
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于UPLC
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Q
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TOF
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MS法同时测定鱼肉中19种氯酚类化合物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)样品提取称取鱼肉样品于离心管中，加入乙酸乙酯，均质，超声，离心，取上层有机相；然后将有机相转移至装有C18和MgSO4的离心管中，涡旋振荡，再超声、离心，取上清液，氮吹至干后，用乙腈
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水复溶，将复溶液过有机滤膜后，得待测样品提取液；(2)鱼肉基质标准溶液配制以步骤(1)同样的方法提取的空白鱼肉提取液作为基质溶液，配制一系列浓度的19种氯酚混合标准品的标准溶液；(3)氯酚类化合物含量测定将步骤(2)制备的一系列浓度的19种氯酚混合标准品的标准溶液和步骤(1)制备的待测样品提取液，采用UPLC
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Q
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TOF
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MS测定，以19种氯酚混合标准品浓度为横坐标，以每个目标分析物的峰面积为纵坐标，构建定量关系模型；依据该定量关系模型和待测样品提取液的峰面积，计算待测样品中氯酚类化合物的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述UPLC
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Q
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TOF
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MS测定时的液相色谱条件为：色谱柱：ACQUITY
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UPLC
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BEH
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C18(100mm
×
2.1mm，1.7μm)，柱温30～35℃；流速：0.4～0.6mL/min；流动相：A为甲酸铵水溶液，B为乙腈；梯度洗脱，进样量：3μL。3...

【专利技术属性】
技术研发人员：张书芬，张爱芝，邢家溧，徐晓蓉，穆应花，罗小虎，王志强，毕晓丽，毛玲燕，
申请(专利权)人：宁波大学浙江万里学院，
类型：发明
国别省市：