一种从簕欓花椒中制备鲁望桔内酯的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种制备鲁望桔内酯的方法，提取：称取簕欓花椒原料，粉碎，提取，合并提取液，过滤，得到总提取液；浓缩：将总提取液进行浓缩，去除有机溶剂，得到浓缩膏；精制：将浓缩膏制成固定相干法上样于硅胶柱，使用石油醚

【技术实现步骤摘要】
一种从簕欓花椒中制备鲁望桔内酯的方法及其应用


[0001]本专利技术涉及一种制备鲁望桔内酯的方法，尤其涉及一种从簕欓花椒中制备鲁望桔内酯的方法及其应用，属于医药


技术介绍

[0002]簕欓花椒（Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC.）是芸香科花椒属落叶小乔木。是一种十分珍贵的野生资源，具有重要的药用价值。簕欓花椒含有挥发油、生物碱、香豆素、木脂素、黄酮、萜类等成分，具有抗肿瘤、抗炎抗菌、镇痛、抗氧化等药理作用，这些性质使其成为寻求植物提取物或有效活性成分的理想来源。
[0003]鲁望桔内酯具有多种生物活性，例如抗真菌，抗病毒及对农作物种子萌发及根和茎长有化感活性作用等。是一种具有开发前景的先导化合物。目前鲁望桔内酯多为化学合成，通常由二氢吡喃香豆素和NBS在氮气下回流2
‑
2.5 h，后经过萃取得到，合成率仅为61%，导致市售鲁望桔内酯价格高昂。
[0004]目前关于该鲁望桔内酯还没有用于制备生物农药方面的应用。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：针对现有技术的不足，本专利技术所要解决的第一个技术问题是提供一种制备鲁望桔内酯的方法。
[0006]本专利技术还要解决的技术问题是提供一种鲁望桔内酯在制备植物农药中的应用。
[0007]技术方案：为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种制备鲁望桔内酯的方法，包括以下步骤：（1）提取：称取簕欓花椒原料，粉碎，提取，合并提取液，过滤，得到总提取液；（2）浓缩：将总提取液进行浓缩，去除有机溶剂，得到浓缩膏；（3）精制：将浓缩膏制成固定相干法上样于硅胶柱，使用石油醚
‑
乙酸乙酯作为流动相进行梯度洗脱，所述石油醚
‑
乙酸乙酯的体积比为1:0～0:1，浓缩，得到精制组分；（4）重结晶：将精制组分于有机溶剂中加热至完全溶解，冷却至室温后析出结晶，即为鲁望桔内酯。
[0008]进一步地，步骤（1）中所述的提取方式为有机溶剂冷浸或回流提取；所述有机溶剂为90%～95%乙醇水溶液。
[0009]进一步地，步骤（1）中所述的原料和有机溶剂体积比为1:2～15。
[0010]进一步地，步骤（1）中所述的原料包括簕欓花椒的根和茎。
[0011]进一步地，步骤（1）中所述的冷浸提取步骤为：使用90%～95%乙醇将原料冷浸2～4天，收集提取液，重复进行2～4次冷浸。
[0012]进一步地，步骤（1）中所述的回流提取步骤为：使用90%～95%乙醇将原料回流提取1
‑
2 h，重复2
‑
3次进一步地，步骤（2）中所述的浓缩方式为减压浓缩，浓缩条件为45～60℃、200rpm，
浓缩仪器为旋转蒸发。
[0013]进一步地，步骤（3）中还包括以下步骤：将浓缩膏与拌样硅胶混合形成固定相；取分离硅胶，用石油醚与分离硅胶搅拌均匀后湿法装柱；将固定相干法上样；所述固定相中浓缩膏与拌样硅胶的质量比为1:1.5～1:1.8；所述拌样硅胶与分离硅胶的质量比为1:4～6；所述流动相与固定相体积比为1:4～6。
[0014]进一步地，步骤（3）中所述梯度洗脱的石油醚
‑
乙酸乙酯的体积比为1:0、50:1、30:1、15:1、10:1、8:1、6:1、3:1、1:1、0:1。
[0015]进一步地，步骤（4）中所述的有机溶剂为石油醚
‑
乙酸乙酯混合溶剂，体积比为5:1～8:1。
[0016]本专利技术还提供了上述方法制备得到的鲁望桔内酯在制备植物农药中的应用。
[0017]进一步地，所述农药用于抑制大斑凸脐蠕孢菌和腐皮镰刀菌。
[0018]有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下突出的显著优点：本专利技术的制备方法能够从簕欓花椒植物中将鲁望桔内酯提纯，产率高达95%，杂质少，制备方法简单。本专利技术还公开了一种上述方法制备得到的鲁望桔内酯在植物农药中的应用，可用于抑制大斑凸脐蠕孢菌和腐皮镰刀菌，效果显著。
附图说明
[0019]图1为本专利技术方法制备的产物的化学结构式。
[0020]图2为本专利技术实施例2制备的产物的TLC显色图（左）以及喷洒10%硫酸
‑
乙醇溶液的显色图（右）。
[0021]图3为本专利技术方法制备的产物的HPLC。
[0022]图4为本专利技术不同提取方法制备的提取液的TLC显色图；其中，从左至右的顺序分别为总提取液A在波长254 nm下的显色图，总提取液B在波长254 nm下的显色图，总提取液A在波长365 nm下的显色图，总提取液B在波长365 nm下的显色图。
具体实施方式
[0023]下面结合附图对本专利技术的技术方案作进一步说明。
[0024]实施例1 鲁望桔内酯的提取簕欓花椒采自于云南省，通过昆明采智生物技术有限公司的鉴定，确认其为簕欓花椒Zanthoxylum avicennae (Lam.) DC.的干燥根茎，是一种芸香科、花椒属植物，标本现存于扬州大学药学系实验室。
[0025]（1）称取簕欓花椒干燥根茎原料50 g，切块，粉碎成10～20目大小。使用1 L 95%乙醇将其冷浸3天，收集提取液，重复进行3次冷浸后，将所有所提取的滤液进行合并，得到总提取液A。
[0026]（2）称取簕欓花椒干燥根茎原料50 g，切块，粉碎成10～20目大小。使用200 ml 95%乙醇进行回流提取2 h，重复3次后，将所有的提取滤液进行合并，得到总提取液B。
[0027]（3）使用真空薄膜浓缩装置分别对提取液A与提取液B在旋转蒸发仪45℃，200 rpm的条件下进行减压浓缩，直至没有乙醇的气味，至此得到95%乙醇提取物的浓缩膏A和浓缩膏B，TLC薄层板图如图4。出膏率分别为6.7%、2.9%。由实验结果看出提取液A和提取液B的成
分都非常丰富，而由于冷浸提取法的出膏率更高，故下面所述的实验中采用冷浸提取法对簕欓花椒进行提取。
[0028]实施例2 鲁望桔内酯的分离实验所用的仪器及参数：Waters e2695液相色谱，以甲醇为流动相A，以水为流动相B；SunFire C
18
(5 μm 4.6 x 250 mm)色谱柱，柱温25℃，流速2.0 ml/min,梯度洗脱（0～30 min, 15%～100%）；上海爱朗仪器有限公司CCA
‑
1112A旋转蒸发仪。
[0029]（1）称取簕欓花椒干燥根茎原料30 kg，切块，粉碎成10～20目大小。使用90 L 95%乙醇将其冷浸3天，收集提取液，重复进行3次冷浸后，将所有所提取的滤液进行合并，得到总提取液。
[0030]（2）使用真空薄膜浓缩装置对提取液进行减压浓缩，直至没有乙醇的气味，至此得到95%乙醇提取物的浓缩膏。
[0031]（3）将浓缩膏与拌样硅胶混合得到固定相，质量比为1:1.5；取分离硅胶，用石油醚与分离硅胶搅拌均匀湿法装柱，分离硅胶的质量约为拌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从簕欓花椒中制备鲁望桔内酯的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取：称取簕欓花椒原料，粉碎，提取，合并提取液，过滤，得到总提取液；（2）浓缩：将总提取液进行浓缩，去除有机溶剂，得到浓缩膏；（3）精制：将浓缩膏制成固定相干法上样于硅胶柱，使用石油醚
‑
乙酸乙酯作为流动相进行梯度洗脱，所述石油醚
‑
乙酸乙酯的体积比为1:0～0:1，浓缩，得到精制组分；（4）重结晶：将精制组分于有机溶剂中加热至完全溶解，冷却至室温后析出结晶，即为鲁望桔内酯。2.根据权利要求1所述的一种从簕欓花椒中制备鲁望桔内酯的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的提取方式为有机溶剂冷浸提取；所述有机溶剂为90%～95%乙醇水溶液。3.根据权利要求2所述的一种从簕欓花椒中制备鲁望桔内酯的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的原料和有机溶剂体积比为1:2～15。4.根据权利要求1所述的一种从簕欓花椒中制备鲁望桔内酯的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的原料包括簕欓花椒的根和茎。5.根据权利要求1所述的一种从簕欓花椒中制备鲁望桔内酯的方法，其特征在于，步骤（2）和步骤（4）中所述的浓缩方式为减压浓缩，浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈佳欢，周雨晨，张坤，黄梦妮，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：