一株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699及其发酵乳、应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，公开一株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699，于2022年7月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC NO.25414，分类命名：Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus。本发明专利技术的菌株WHH699（1）发酵的发酵乳有高ACE抑制活性，可高达96%；（2）初始接种量可低至5

【技术实现步骤摘要】
一株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699及其发酵乳、应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699 及其发酵乳、应用。

技术介绍

[0002]肾素
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血管紧张素系统(RAS)和激肽释放酶
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激肽系统(KKS)在人体血压调节过程中扮演非常重要的角色。在RAS系统中，无活性的血管紧张素原在肾素作用下转化成血管紧张素I，血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme，ACE)切除血管紧张素Ⅰ的羧端His
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Leu，使其最终被水解成有强效收缩血管作用的血管紧张素Ⅱ，从而引起血压升高。KKS 系统是人体的内源性降压系统，ACE在该系统中作用于具有血管舒张功能的舒缓激肽使其失活，从而抑制KKS系统的降压作用。ACE对于这两个系统的作用最终引起血压升高。ACE 抑制剂药物作用于上述两大系统后，能有效调节、控制人体血压，治疗充血性心力衰竭，可较好的预防首次心肌梗塞痊愈患者的复发病症，改善预后，显著降低患者的致残率和死亡率。目前原发性高血压治疗药物主要有利尿药、β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、ACE抑制剂药物、血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂五大类。其中ACE抑制剂药物种类最多、适应证最广，是高血压合并糖尿病或心率失常患者首选治疗药物。但ACE抑制剂药物能够引起如干咳等不良反应，发生率在10％左右，不良反应现象较为突出。
[0003]近年研究发现，部分益生菌的发酵乳对高血压或正常高值血压有一定的降低作用，对正常血压没有影响，原因为这些益生菌可分解蛋白产生一定量的ACE抑制肽，相比ACE抑制剂药物更加安全可靠。目前披露的可发酵产生ACE抑制肽的益生菌主要是乳酸菌，如瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种等。研究表明，益生菌发酵产生ACE抑制肽活性具有菌种和菌株上的差异性。如杨焱炯(具有降血压功能的益生菌的筛选[D]，上海交通大学，2006，硕士学位论文)研究来源于健康青年和儿童肠道的乳杆菌和双歧杆菌，分别对这些菌株的ACE抑制活性、耐酸、耐胆盐、耐药性能以及抑菌性能进行评价，筛选得到四株性能优良的菌株：L.plantarum LP529、L.plantarum LS12、L.plantarum LS31、L.helveticusZL51，ACE抑制率分别为：40.33％、51.85％、40.74％和80.43％。再如杨振泉等(不同益生菌发酵乳ACEI活性比较[L]，食品发酵与工业，2009，35(3):161～164)测定了6株德氏乳杆菌保加利亚亚种、6株嗜热链球菌、6株鼠李糖乳杆菌、4株双歧杆菌等不同菌种、不同菌株发酵产物的ACEI活性，结果显示发酵产物的ACEI活性呈现种属和菌株差异性，并且发酵和贮藏条件也对ACEI活性有显著影响。
[0004]当前国外市场上已经出现少量的益生菌降压产品，如Evolus为瑞士乳杆菌LBK16H 发酵而成的酸乳，Calpis由瑞士乳杆菌CP790和酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae混合发酵制得。这两款产品均已通过动物实验和人体实验证实其具有降高血压作用，且对正常血压人群或低血压人群的血压没有不利影响。但国内目前未有相应的产品上市，相关内容还停留在研究阶段。德氏乳杆菌作为乳酸杆菌属的典型种之一，在发酵工业中有广泛应用。但是目前德氏乳杆菌保加利亚亚种在降压方面的研究还相对较少，其发酵产品的ACE抑制
率普遍较低。如吴青海(Lactobacillus delbrueckii QS306的ACE抑制活性及其抑制肽理化特性研究[D]，内蒙古农业大学，2015，硕士学位论文)提出核酸关联物质对Lb.delbrueckii QS306的蛋白质分解能力有一定的促进作用，但是添加鸟嘌呤等促进因子的情况下，ACE抑制率也仅达到 68.52％。再如吉喆(发酵羊乳产ACE抑制肽乳杆菌的筛选及产肽条件优化[D]，2013，陕西科技大学，硕士学位论文)筛选的德氏乳杆菌保加利亚亚种LB6虽然在大豆蛋白胨、葡萄糖和酪蛋白存在下的羊乳发酵产物的ACE抑制率高达92.31
±
0.5％，但在纯羊乳中的发酵产物的ACE抑制率为74.61％。德氏乳杆菌保加利亚亚种作为最具有经济价值的发酵乳酸菌之一，在维持机体血压健康水平方面应进行更多的挖掘和筛选，开发自主知识产权菌株发酵剂，推出基于德氏乳杆菌的高ACE抑制活性的相应产品显得意义重大。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699，其发酵乳有高血管紧张素转换酶抑制活性。
[0006]本专利技术提供如下的技术方案：一株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株(Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus)，命名为 WHH699，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。
[0007]本专利技术的德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699由专利技术人团队从青海西宁牦牛酸奶中筛选得到，于2022年7月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：CGMCC No.25414，命名为Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus。专利技术人在研究中发现，菌株WHH699具有如下优点：(1)发酵乳有高血管紧张素转换酶抑制活性，抑制率可以达到96％；(2)可以在低接种量下发酵获得高ACE抑制活性，接种量可低至5
×
105CFU/mL；(3)面向不同类型的基料发酵所得发酵乳均有高ACE抑制活性，如在牛奶粉或羊奶粉中发酵所得发酵乳的ACE 抑制率均可达90％以上。
[0008]一种发酵乳，使用上述德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699在含乳粉的基料中发酵获得。本专利技术的发酵乳由菌株WHH699利用乳粉发酵制备得到，具有高ACE抑制活性，表现在以下方面：(1)ACE抑制率可以达到96％；(2)ACE抑制活性具有高耐热性，发酵乳经 95℃/10min处理后ACE抑制活性基本无影响，可保持在94％以上；(3)ACE抑制活性具有高耐碱性，将加热处理后的发酵乳调节pH值至8.30时，AEC抑制率仍可高达80％以上； (4)ACE抑制活性具有长期储藏稳定性，发酵乳室温放置3个月后ACE抑制活性基本无变化；(5)以乳粉/水体系为基料发酵制备的发酵乳的后酸化稳定。
[0009]作为本专利技术的优选，所述基料中蛋白含量≥3.5wt％。
[0010]作为本专利技术的优选，所述乳粉为牛乳粉或羊乳粉。
[0011]作为本专利技术的优选，德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699在基料中接种量≥5
×
10
5 CFU/mL。本专利技术的发酵乳可由菌株WHH699在低接种量下发酵制备，接种量明显低于现有的德氏乳杆菌保加利亚亚种菌或其他乳酸菌，如杨振泉等在研究不同益生菌发酵乳ACEI活性中的益生菌接种量达到4％，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699，其特征在于，所述德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699于2022年7月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCC NO.25414，分类命名：Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus。2.一种发酵乳，其特征在于，使用如权利要求1所述的德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株WHH699在含乳粉的基料中发酵获得。3.根据权利要求2所述的发酵乳，其特征在于，所述基料中蛋白含量≥3.5wt%。4.根据权利要求2或3所述的发酵乳，其特征在于，所述乳粉为牛奶粉或羊奶粉。5.根据权利要求2或3所述的发酵乳...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈丽娥，陈彩玲，高侃，陈苏，朱珺，王晓君，吴琴，李瑞，柯雪琴，李理，葛红娟，翁璐溦，陈作国，郑志瑶，李言郡，刘冠辰，
申请(专利权)人：杭州娃哈哈集团有限公司，
类型：发明
国别省市：