用于猴痘病毒核酸检测的crRNA及试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种基于CRISPR/Cas12a的猴痘病毒核酸检测的crRNA，以及采用上述crRNA的猴痘病毒核酸快速检测试剂盒。具体的，本发明专利技术提供了一种用于猴痘病毒核酸检测的crRNA，该crRNA包含如SEQ NO.12或SEQ NO.19所示的核苷酸序列。同时，本发明专利技术提供了一种猴痘病毒核酸检测试剂盒，试剂盒包括针对猴痘病毒基因的特异性扩增引物、上述crRNA中的一种或两种，CRISPR/Cas12a蛋白以及单链DNA(ssDNA)报告系统。本发明专利技术系首次实现采用CRISPR/Cas12a检测猴痘病毒，通过利用CRISPR/Cas12a特异识别猴痘病毒核酸，完成对猴痘病毒核酸的高灵敏度、高特异性及快速可视化检测。高特异性及快速可视化检测。高特异性及快速可视化检测。

【技术实现步骤摘要】
用于猴痘病毒核酸检测的crRNA及试剂盒


[0001]本专利技术涉及核酸快速检测领域，具体涉及一种用于猴痘病毒核酸检测的crRNA及相关检测试剂盒和制备方法。

技术介绍

[0002]猴痘(Monkeypox)是由猴痘病毒(Monkeypox virus，MP)引起的急性传染病。猴痘病毒于1958年被首次发现，当时一组用于研究的猴子中出现“痘状”传染病，因此得名。自世界卫生组织1980年宣布人类彻底消灭天花以来，猴痘病毒已成为对公共卫生影响最大的正痘病毒。该病传染性强，病死率为1
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10％。截止2022年6月16日，全球猴痘确诊病例突破2000,达到了2027例。猴痘病毒属于痘病毒科正痘病毒属，是对人类致病的4种正痘病毒属之一，另外3种是天花病毒、痘苗病毒和牛痘病毒。痘病毒科(Poxviridae)，是最大的一类DNA病毒,结构复杂。正痘病毒基因组为双链DNA，基因组大小在130
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375kb之间，包含大约190个开放性阅读框，编码213个蛋白。在猴痘治疗方面，目前暂无治疗猴痘感染的特效药。仅有部分药物可以使用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于猴痘病毒核酸检测的crRNA，其特征在于，所述crRNA包含如SEQ NO.12或SEQ NO.19所示的核苷酸序列。2.如权利要求1所述的crRNA，其特征在于，所述crRNA的5
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端包含发夹序列；优选的，所述发夹序列如SEQ NO.23所示。3.一种猴痘病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于猴痘病毒核酸检测的crRNA，所述crRNA包括：含有如SEQ NO.12所示的核苷酸序列的crRNA；和/或，含有如SEQ NO.19所示的核苷酸序列的crRNA；优选的，所述crRNA的5
’
端包含发夹序列；进一步优选的，所述发夹序列如SEQ NO.23所示。4.如权利要求3所述的猴痘病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括CRISPR/Cas12a蛋白；优选的，所述CRISPR/Cas12a蛋白为LbCas12a蛋白。5.如权利要求3所述的猴痘病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括针对猴痘病毒基因的特异性扩增引物；优选的，所述针对猴痘病毒基因的特异性扩增引物包括针对猴痘病毒crmB基因区和/或针对猴痘病毒基因46428
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46723区的特异性扩增引物。6.如权利要求5所述的猴痘病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，所述针对猴痘病毒crmB基因区的特异性扩增引物包括：MPoxL1和MPoxR1，其序列分别如SEQ NO.8和SEQ NO.9所示；和/或...

【专利技术属性】
技术研发人员：李勇，赵健博，彭智宇，王少伟，
申请(专利权)人：深圳华大医学检验实验室，
类型：发明
国别省市：