一种LC-MS检测氟康唑相关杂质的方法技术

本申请涉及化合物检测技术领域，具体公开了一种LC

【技术实现步骤摘要】
一种LC
‑
MS检测氟康唑相关杂质的方法


[0001]本申请涉及化合物检测
，具体涉及一种LC
‑
MS检测氟康唑相关杂质的方法。

技术介绍

[0002]氟康唑是一种新型三氮唑类抗真菌，具有良好的低毒性，耐受性，高口服生物利用度和代谢稳定性，在治疗曲霉菌、全身念珠菌以及脑膜炎隐球菌感染方面应用广泛。然而在氟康唑(CAS：86386
‑
73
‑
4)的合成过程中可能会残留相关杂质，一种是4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑，另一种是氟康唑EP杂质G(氟康唑EP杂质G是4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑在碱性条件下与三甲基碘化亚砜反应生成的环氧化合物)，上述两种杂质均属于潜在致突变杂质，其在低浓度时即可能会造成人体遗传物质的损伤，进而导致基因突变并可能促使肿瘤发生，因此对人体用药安全性存在巨大威胁。故在氟康唑的合成过程中，需要对4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑的用量进行及时检测与严格控制。
[0003]目前，针对低残留量的4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G的检测主要通过液相色谱进行检测，然而上述方法检测方法的灵敏度低、可靠性不佳。因此，急需提供一种检测速度快、检测灵敏度高、准确度高的方法来实现氟康唑相关杂质(4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G)的检测。
[0004]
技术实现思路

[0005]为了快速、准确测定氟康唑中的相关杂质4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G，本申请提供一种LC
‑
MS检测氟康唑相关杂质的方法。
[0006]本申请提供的LC
‑
MS检测氟康唑相关杂质的方法，采用如下的技术方案：一种LC
‑
MS检测氟康唑相关杂质的方法，包括以下步骤：绘制标准曲线：配制标准液，然后对所述标准液进行LC
‑
MS检测，获得标准曲线；所述标准液含有4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G；待测样品溶液检测：配制待测样品溶液，然后对所述待测样品溶液进行LC
‑
MS检测，即可分析待测样品溶液中氟康唑相关杂质；所述氟康唑相关杂质为4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G中的一种或两种。
[0007]本申请提供的检测方法能够同时检测氟康唑合成过程中的可能存在的潜在致突变杂质(4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G)，具有检测结果可靠、检出限低、准确度高、检测速度快、操作简单等优点。
[0008]LC
‑
MS叫做液相色谱
‑
质谱联用技术，它是以液相色谱作为分离系统，质谱作为检测系统。待测样品在质谱部分被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器即可得到质谱图。
[0009]优选地，所述LC采用的色谱柱是十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱；LC采用流动相梯度洗脱方法对所述待测样品溶液进行分离；所述流动相梯度洗脱方法为：0
‑
3.0min时，流动相A为70％，流动相B为30％；3.0
‑
8.0min时，流动相A由70％减少至5％，流动相B由30％增加至95％；8.0
‑
10.0min，流动相A为5％，流动相B为95％；10.0
‑
10.1min，流动相A由5％增加至70％，流动相B由95％减少至30％；10.1
‑
12.0min时，流动相A为70％，流动相B为30％；流动相A和流动相B均以体积百分比计。
[0010]优选地，所述LC的检测条件为：流速0.4
‑
0.6mL/min，柱温35
‑
45℃。
[0011]进一步地，所述进样体积1
‑
5μL。
[0012]在一个具体的实施方案中，LC的检测条件为：流速0.5mL/min，柱温40℃，进样体积2μL，样品盘温度15℃，采用的色谱柱为Poroshell 120EC
‑
C18色谱柱，规格为150
×
4.6mm，2.7μm。
[0013]本申请将液相色谱(LC)的检测条件设定在上述范围内，一方面能够实现待测样品溶液中的物质的有效分离，为质谱分析提供足够的离子；另一方面还能将对质谱有干扰的组分初步分离出去，有效避免干扰组分对后续质谱造成影响。
[0014]优选地，所述流动相A为酸性溶液；所述流动相B为有机溶剂。
[0015]优选地，所述酸性溶液为甲酸
‑
水溶液，所述有机溶剂为乙腈。
[0016]优选地，所述甲酸
‑
水溶液的浓度为0.05％
‑
0.0.5％。
[0017]本申请采用甲酸
‑
水溶液作为流动相的酸性溶液，并将浓度控制在上述范围内，能够使检测样品溶液保持在所需的pH环境下，防止检测样品解离。
[0018]进一步地，所述酸性溶液还可以为乙酸
‑
水溶液。
[0019]优选地，所述MS的检测条件为：离子源：ESI+，离子化电压5500V，碰撞气压力8psi，雾化气压力50psi，辅助加热气压力50psi，气帘气压力30psi，干燥气温度为430
‑
480℃。
[0020]优选地，所述MS的监测离子为：m/z＝84.9、31.3、238.1、141.4、127.1。
[0021]优选地，所述十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱是Poroshell 120EC
‑
C18色谱柱，规格为150
×
4.6mm，2.7μm。
[0022]综上所述，本申请具有以下有益效果：1.本申请采用LC
‑
MS法可以检测氟康唑合成过程中可能残留的杂质(4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G)，具有检测结果准确、检测灵敏度高、检测时间短、操作简单等优点。
[0023]2.本申请提供的LC
‑
MS检测氟康唑相关杂质的方法能够同时检测氟康唑中可能存在的相关杂质4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G，利用该方法进行检测，4
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种LC
‑
MS检测氟康唑相关杂质的方法，其特征在于，包括以下步骤：绘制标准曲线：配制标准液，然后对所述标准液进行LC
‑
MS检测，获得标准曲线；所述标准液含有4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G；待测样品溶液检测：配制待测样品溶液，然后对所述待测样品溶液进行LC
‑
MS检测，即可分析待测样品溶液中氟康唑相关杂质；所述氟康唑相关杂质为4
‑
氨基
‑
1,2,4
‑
三氮唑和氟康唑EP杂质G中的一种或两种。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述LC采用的色谱柱是十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱；LC采用流动相梯度洗脱方法对所述待测样品溶液进行分离；所述流动相梯度洗脱方法为：0
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3.0min时，流动相A为70%，流动相B为30%；3.0
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8.0min时，流动相A由70%减少至5%，流动相B由30%增加至95%；8.0
‑
10.0min，流动相A为5%，流动相B为95%；10.0
‑
10.1min，流动相A由5%增加至70%，流动相B由95%减少至30%；10.1
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12.0min时，流动相A为70%...

【专利技术属性】
技术研发人员：李钦，
申请(专利权)人：华夏生生药业北京有限公司，
类型：发明
国别省市：