基于纳米孔测序的血液样本耐药/毒力基因检测方法技术

技术编号:36745656 阅读:21 留言:0更新日期:2023-03-04 10:27
本申请涉及分子诊断技术领域,具体涉及一种血液感染样本的耐药/毒力检测方法,该方法基于靶向引物设计对血液宏基因组样本DNA进行靶向建库,结合纳米孔测序实现血液感染样本耐药/毒力的快速检测,具有灵敏度高、通量高和结果准确等优势。果准确等优势。果准确等优势。

【技术实现步骤摘要】
基于纳米孔测序的血液样本耐药/毒力基因检测方法


[0001]本申请涉及分子诊断
,具体涉及一种基于纳米孔测序技术的血液样本耐药/毒力基因检测方法。
技术背景
[0002]由于人们对抗生素使用的认知不足,近年来抗生素滥用情况日益严重,从而导致抗生素耐药以惊人的速度出现。从1929年发现青霉素开始,在往后的30年间逐步出现了耐甲氧西林葡萄球菌,耐万古霉素肠球菌等耐药菌株。80年代后细菌的耐药性更是逐步升级,从革兰氏阴性菌发展到革兰氏阳性菌,细菌产生的β

内酰胺酶(可使抗生素失效的酶)从普通酶发展到超广谱酶。虽然目前应用于临床的抗生素已有不下200种之多,而且每年仍以10种以上的速度在增长,但是抗生素的研究与开发却远远跟不上细菌的耐药速度。细菌耐药的日益增多,多重耐药细菌的不断出现,治疗变的困难重重,这些问题共同导致了患者病程的延长,住院时间的延长以及更高的死亡率,尤其是在重症监护病房(ICU)。据统计,我国每年约有1亿患有感染性疾病的患者需要通过使用病原检测的方法来辅助治疗,其中重症感染人数超千万,针对这些较为复杂的危重感本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于纳米孔测序平台的血液感染宏基因组样本耐药/毒力基因建库的靶向引物组,其特征在于,所述引物针对11个β内酰胺类药物耐药基因,5个碳青霉烯类药物耐药基因,1对多黏菌素类药物耐药基因,2个万古霉素药物耐药基因和4个毒力因子基因。2.根据权利要求2所述的引物组,其特征在于,所述引物组针对的基因具体为:MecA,CTX

M,OXA

24,OXA

23,blaTEM

bs,CTX

M

group1,CTX

M

group9,CTX

M

group2,blaTEM

esbl,SHV,orfx

SCC,VIM,KPC,OXA

48,IMP,NDM,MCR,vanA,vanB,iucA,rmpA,rmpA2和PVL。3.根据权利要求1

2任一所述的引物组,其特征在于,所述引物组中的引物序列如SEQ ID NO.1

38所示,或与SEQ ID NO.1

46至少95%序列同一性。4.根据权利要求3所述的引物组,其特征在于,所述引物浓度比为:SEQ ID NO.1/2:SEQ ID NO.3/4:SEQ ID NO.5/6:SEQ ID NO.7/8:SEQ ID NO.9/10:SEQ ID NO.11/12:SEQ ID NO.13/14:SEQ ID NO.15/16:SEQ ID NO.17/18:SEQ ID NO....

【专利技术属性】
技术研发人员:苗卉王磊李杜衡李立锋田文佳涂浩波蒋智贾雪峰
申请(专利权)人:天津金匙医学科技有限公司金匙智造天津医疗科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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