外泌体衍生的PIWI-相互作用RNA及使用其的方法技术

本文提供的是衍生自治疗性外泌体的PIWI

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】外泌体衍生的PIWI
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相互作用RNA及使用其的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年5月19日提交的美国临时申请No.63/027191的优先权，该申请的全部内容通过引用并入本文。
[0003]关于联邦资助研发的声明
[0004]本专利技术是在国家卫生研究院授予Eduardo Marb
á
n博士的授权号为R01 HL124074的政府支持下完成的。政府对本专利技术拥有一定权利。
[0005]序列表的引用
[0006]本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表以2021年5月16日创建的命名为SEQLIST_CSMC014WO.txt的文件提供，该文件大小为3.85KB。序列表的电子格式的信息通过引用全部并入本文。


[0007]本公开内容一般而言涉及衍生自外泌体的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)及其治疗需要组织修复和/或再生的病症的用途。

技术介绍

[0008]piRNA是一组与PIWI蛋白相关的小型非编码RNA，并且已知其在生殖系细胞中的基因沉默反转录转座子和其他遗传元件中发挥作用。细胞质PIWI蛋白是引导转座子目标的内切核苷酸的小型RNA引导核酸酶(剪切器(slicer))，而核PIWI蛋白在目标基因座上组装沉默复合物以介导转录沉默。
[0009]心球衍生细胞(Cardiosphere
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derived cells，CDC)是一种心脏源性祖细胞群，其在临床前和临床环境中具有经证明的治疗效果。CDC通过分泌细胞外囊泡(EV)(即充满生物活性分子的脂质双层纳米颗粒)而发挥作用。保留了治疗潜力的永生化CDC(imCDC)可以被生成，并通过其分泌的EV提供增强的CDC功能。

技术实现思路

[0010]本文提供一种治疗缺血性心肌损伤的无外泌体和任选地无细胞方法，包括：识别具有缺血性心肌损伤或需要治疗缺血性心肌损伤的受试者；向该种受试者施用有效(或治疗有效)量的外泌体衍生的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)。在几个实施方案中，有效(或治疗有效)量包括约80ng至约5mg的piRNA，以由此治疗缺血性心肌损伤。任选地，外泌体衍生的piRNA包括CDC(心球衍生细胞)衍生的外泌体piRNA。任选地，缺血性心肌损伤包括缺血/再灌注损伤。在一些实施方案中，缺血性心肌损伤包括心肌纤维化。在一些实施方案中，受试者患有心肌梗塞。在一些实施方案中，在缺血性心肌损伤后约10分钟至约2小时施用有效(或治疗有效)量的外泌体衍生的piRNA。
[0011]还提供一种治疗缺血性心肌损伤的无外泌体和任选地无细胞方法，包括：识别需要治疗缺血性心肌损伤的受试者；以及向该种受试者施用有效(或治疗有效)量的包含hsa_
piR_016659的核苷酸序列的piRNA，以由此治疗缺血性心肌损伤。此外，本文提供一种治疗肌肉损伤(例如心肌损伤)的无外泌体方法，包括向受试者施用有效(或治疗有效)量的piRNA(诸如hsa_piR_016659)，以由此治疗肌肉损伤。任选地，该piRNA由hsa_piR_016659的核苷酸序列组成。在一些实施方案中，缺血性心肌损伤包括缺血/再灌注损伤。在一些实施方案中，缺血性心肌损伤包括心肌纤维化。在一些实施方案中，受试者患有心肌梗塞。在一些实施方案中，在缺血性心肌损伤后约10分钟至约2小时施用治疗有效量的piRNA。在一些实施方案中，治疗有效量包括约80ng至约5mg的piRNA。在一些实施方案中，该piRNA包括一种或多种化学修饰的核苷酸。
[0012]本文还提供一种治疗需要组织修复和/或再生的病症的无外泌体方法，包括：识别具有需要组织修复和/或再生的病症的受试者；以及向受试者施用有效(或治疗有效)量的外泌体衍生的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)，其中，有效(或治疗有效)量包括约80ng至约5mg的piRNA，以由此治疗需要组织修复和/或再生的病症。任选地，需要组织修复和/或再生的病症包括肌肉或肺组织的损伤。任选地，该肌肉组织包括骨骼肌或心肌。在一些实施方案中，该病症包括或为导致组织纤维化的病症。在一些实施方案中，该病症包括缺血性心肌损伤或肺纤维化。在一些实施方案中，外泌体衍生的piRNA包括成纤维细胞衍生的外泌体piRNA或CDC(心球衍生细胞)衍生的外泌体piRNA。
[0013]在治疗缺血性心肌损伤或治疗需要组织修复和/或再生的病症的方法的几个实施方案中，外泌体衍生的piRNA包括以下中的一种或多种：hsa_piR_016659(SEQ ID NO:1)、hsa_piR_016658(SEQ ID NO:2)、hsa_piR_001040(SEQ ID NO:3)、hsa_piR_007424(SEQ ID NO:4)、hsa_piR_008488(SEQ ID NO:5)、hsa_piR_018292(SEQ ID NO:6)、hsa_piR_013624(SEQ ID NO:7)、hsa_piR_019324(SEQ ID NO:8)和hsa_piR_020548(SEQ ID NO:9)。在一些实施方案中，外泌体衍生的piRNA是hsa_piR_016659、其变体和/或其片段。
[0014]本文还提供一种治疗需要组织修复和/或再生的病症的无细胞方法，包括：识别具有需要组织修复和/或再生的病症的受试者；和向该种受试者施用有效(或治疗有效)量的外泌体衍生的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)，以由此治疗需要组织修复和/或再生的病症，其中，外泌体衍生的piRNA包括以下中的一种或多种：hsa_piR_016659、hsa_piR_016658、hsa_piR_001040、hsa_piR_007424、hsa_piR_008488、hsa_piR_018292、hsa_piR_013624、hsa_piR_019324、hsa_piR_020548、piR
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20450、piR
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16735、piR
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01184、piR
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20786、piR
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00805、piR
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04153、piR
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18570、piR
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16677和piR
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17716。任选地，施用包括施用有效(或治疗有效)量的包含外泌体衍生的piRNA的外泌体、细胞外囊泡或脂质体，其中，外泌体、细胞外囊泡或脂质体富含外泌体衍生的piRNA。在一些实施方案中，有效(或治疗有效)量包括约80ng至约5mg的外泌体衍生的piRNA。根据实施方案，需要组织修复和/或再生的病症包括肌肉和/或肺组织的损伤。在一些实施方案中，该病症包括或为导致组织纤维化的病症。在一些实施方案中，外泌体衍生的piRNA包括成纤维细胞衍生的外泌体piRNA或CDC(心球衍生细胞)衍生的外泌体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种治疗缺血性心肌损伤的无外泌体方法，包括：识别需要治疗缺血性心肌损伤的受试者；和向所述受试者施用治疗有效量的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)，以由此治疗所述缺血性心肌损伤，所述piRNA包括hsa_piR_016659(SEQ ID NO:1)的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述piRNA由所述hsa_piR_016659的核苷酸序列组成。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述缺血性心肌损伤包括缺血/再灌注损伤。4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述缺血性心肌损伤包括心肌纤维化。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述受试者患有心肌梗塞。6.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述缺血性心肌损伤后约10分钟至约2小时施用所述治疗有效量的piRNA。7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述治疗有效量包括约80ng至约5mg的piRNA。8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述piRNA包括一种或多种化学修饰的核苷酸。9.一种治疗缺血性心肌损伤的无外泌体方法，包括：识别需要治疗缺血性心肌损伤的受试者；和向所述受试者施用治疗有效量的外泌体衍生的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)，以由此治疗所述缺血性心肌损伤，其中所述治疗有效量包括约80ng至约5mg的piRNA。10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述外泌体衍生的piRNA包括CDC(心球衍生细胞)衍生的外泌体piRNA。11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述外泌体衍生的piRNA包括以下中的一种或多种：hsa_piR_016659(SEQ ID NO:1)、hsa_piR_016658(SEQ ID NO:2)、hsa_piR_001040(SEQ ID NO:3)、hsa_piR_007424(SEQ ID NO:4)、hsa_piR_008488(SEQ ID NO:5)、hsa_piR_018292(SEQ ID NO:6)、hsa_piR_013624(SEQ ID NO:7)、hsa_piR_019324(SEQ ID NO:8)和hsa_piR_020548(SEQ ID NO:9)。12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述外泌体衍生的piRNA是hsa_piR_016659。13.根据权利要求10所述的方法，其中，所述缺血性心肌损伤包括缺血/再灌注损伤。14.根据权利要求10所述的方法，其中，所述缺血性心肌损伤包括心肌纤维化。15.根据权利要求10所述的方法，其中，所述受试者患有心肌梗塞。16.根据权利要求10所述的方法，其中，在所述缺血性心肌损伤后约10分钟至约2小时施用所述治疗有效量的外泌体衍生的piRNA。17.一种治疗需要组织修复和/或再生的病症的无外泌体方法，包括：识别具有需要组织修复和/或再生的病症的受试者；和向所述受试者施用治疗有效量的外泌体衍生的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)，以由此治疗所述需要组织修复和/或再生的病症，其中所述治疗有效量包括约80ng至约5mg的piRNA。18.根据权利要求17所述的方法，其中，所述需要组织修复和/或再生的病症包括肌肉组织或肺组织的损伤。19.根据权利要求18所述的方法，其中，所述肌肉组织包括心肌或骨骼肌。20.根据权利要求18所述的方法，其中，所述病症是导致组织纤维化的病症。21.根据权利要求18所述的方法，其中，所述病症包括缺血性心肌损伤或肺纤维化。
22.根据权利要求18所述的方法，其中，所述外泌体衍生的piRNA包括CDC(心球衍生细胞)衍生的外泌体piRNA或成纤维细胞衍生的外泌体piRNA。23.根据权利要求22所述的方法，其中，所述外泌体衍生的piRNA包括以下中的一种或多种：hsa_piR_016659、hsa_piR_016658、hsa_piR_001040、hsa_piR_007424、hsa_piR_008488、hsa_piR_018292、hsa_piR_013624、hsa_piR_019324和hsa_piR_020548。24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述外泌体衍生的piRNA是hsa_piR_016659。25.一种治疗需要组织修复和/或再生的病症的无细胞方法，包括：识别具有需要组织修复和/或再生的病症的受试者；和向所述受试者施用治疗有效量的外泌体衍生的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)，以由此治疗所述需要组织修复和/或再生的病症，其中，所述外泌体衍生的piRNA包括以下中的一种或多种：hsa_piR_016659(SEQ ID NO:1)、hsa_piR_016658(SEQ ID NO:2)、hsa_piR_001040(SEQ ID NO:3)、hsa_piR_007424(SEQ ID NO:4)、hsa_piR_008488(SEQ ID NO:5)、hsa_piR_018292(SEQ ID NO:6)、hsa_piR_013624(SEQ ID NO:7)、hsa_piR_019324(SEQ ID NO:8)、hsa_piR_020548(SEQ ID NO:9)、piR
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20450(SEQ ID NO:10)、piR
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16735(SEQ ID NO:11)、piR
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01184(SEQ ID NO:12)、piR
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20786(SEQ ID NO:13)、piR
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00805(SEQ IDNO:14)、piR
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04153(SEQ ID NO:15)、piR
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18570(SEQ ID NO:16)、piR
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16677(SEQ ID NO:17)和piR
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17716(SEQ ID NO:18)。26.根据权利要求25所述的方法，其中，施用包括施用治疗有效量的包含所述外泌体衍生的piRNA的外泌体、细胞外囊泡或脂质体，其中所述外泌体、细胞外囊泡或脂质体富含所述外泌体衍生的piRNA。27.根据权利要求25所述的方法，其中，所述治疗有效量包括约80ng至约5mg的所述外泌体衍生的piRNA。28.根据权利要求27所述的方法，其中，所述需要组织修复和/或再生的病症包括肌肉组织或肺组织的损伤。29.根据权利要求28所述的方法，其中，所述病症是导致组织纤维化的病症。30.根据权利要求25至29中任一项所述的方法，其中，所述外泌体衍生的piRNA包括成纤维细胞衍生的外泌体piRNA或CDC(心球衍生细胞)衍生的外泌体piRNA。31.根据权利要求9至30中任一项所述的方法，其中，所述外泌体衍生的piRNA包括一种或多种化学修饰的核苷酸。32.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，静脉内、动脉内、肌肉内、心内、心肌内或气管内地施用所述piRNA。33.一种治疗肺纤维化的无细胞方法，包括：识别患有肺纤维化的受试者；和向所述受试者施用治疗有效量的外泌体衍生的PIWI
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相互作用RNA(piRNA)、治疗性外泌体和/或外泌体衍生的miRNA，以由此治疗所述肺纤维化，其中所述外泌体衍生自工程化成纤维细胞。34.根据权利要求33所述的方法，其中，气管内施用所述治疗有效量的外泌体衍生的piRNA、治疗性外泌体和/或外泌体衍生的miRNA。35.根据权利要求33所述的方法，其中，所述治疗性有效量的治疗性外泌体包括约106至

【专利技术属性】
技术研发人员：爱德华多，
申请(专利权)人：西达赛奈医疗中心，
类型：发明
国别省市：