【技术实现步骤摘要】
一种制备短串联重复序列分型参照物的方法
[0001]本专利技术涉及生物医学
,特别涉及一种制备短串联重复序列分型参照物的方法。
技术介绍
[0002]短串联重复序列(Short tandem repeat,STR)是由2~7个碱基作为核心序列的短串联重复结构组成,核心序列重复次数的变化构成了STR基因座的个体差异及遗传多态性。STR基因座重复序列串联排列,基因扩增片段一般在400bp以下。目前,STR是法医DNA分析中最常用的一类遗传标记。STR在整个人类基因组分布广泛,平均每10kb出现一个。多态STR序列绝大多少位于非编码区,极少数在编码区。目前在人类基因组DNA中已发现的STR序列的数量达8000多个。
[0003]STR分型标准物质是指某一STR基因座在人群中常见的STR分型参照物的混合物,STR分型参照物以DNA片段的形式存在,同一STR基因座的不同等位基因均含有对应的STR分型参照物。STR分型标准物质对于STR基因座的精确分型十分重要,能够减少不同实验室检测仪器和检测条件的不同所导致的误差,是ST ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种STR分型参照物的制备方法,包括以下步骤:S1:针对目的STR基因座的核苷酸序列设计一对引物,包括正向引物F1和反向引物R1;S2:将所述F1的3
’
端的x个碱基的和所述R1的3
’
端的y个碱基分别进行核苷酸变化,分别得到F2和R2;所述x和y分别独立选自2~6;S3:在所述F2的3
’
端和所述R2的3
’
端分别附加m和n个碱基,分别得到F3和R3;所述F3的3
’
端所附加的碱基为:所述F1对应的DNA序列下游的m个碱基;所述R3的3
’
端所附加的碱基为:所述R1对应的DNA序列下游的n个碱基;S4:利用所述F3和所述R3对含所述目的STR基因座的DNA进行PCR扩增,得到第一PCR扩增产物;S5:将所述第一PCR扩增产物进一步连接到质粒上,得到重组质粒;S6:利用所述F2和所述R2对所述重组质粒进行扩增,得到第二PCR扩增产物,即为STR分型参照物。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中,所述核苷...
【专利技术属性】
技术研发人员:何仕雯,王琪,何汝雯,程洁萍,温小莲,张兹钧,
申请(专利权)人:广东科登法医物证司法鉴定所,
类型:发明
国别省市:
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