一种配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法组成比例

本发明专利技术公开了一种配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法，包括：S1：配制盐酸、氢氧化钠溶液、PBS缓冲液以及β

【技术实现步骤摘要】
一种配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法


[0001]本专利技术涉及化学分析
，具体涉及一种配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法。

技术介绍

[0002]低聚异麦芽糖(Isomaltooligosaccharide，IMO)是以淀粉或淀粉质为原料，经酶法转化、精制、浓缩等工艺制得的一种淀粉糖产品。主要成分为α
‑
1,6
‑
糖苷键结合的异麦芽糖(IG2)、潘糖(P)、异麦芽三糖(IG3)等的低聚糖(IG
n
)。低聚异麦芽糖属于非消化性低聚糖，具有诸多生理功能，包括：促进益生菌生长、调节肠道菌群、改善便秘、合成人体必须维生素、促进矿物质吸收、提高机体免疫力以及预防直肠癌等功效，因此被广泛应用于食品、保健品、医药等行业。
[0003]目前，我国在食品中低聚异麦芽糖的检测方面尚未有标准文件，仅有GB/T 20881
‑
2017《低聚异麦芽糖》，而该标准仅适用于低聚异麦芽糖纯品(低聚异麦芽糖浆或糖粉)的检测，对于配料较复杂的食品，暂未有相关国家标准检测方法。因低聚异麦芽糖的主要成分有异麦芽糖，其是由两个葡萄糖分子以α
‑
1,6糖苷键连接起来的双糖，若待测样品中含有除异麦芽糖以外的双糖，如乳糖，因其出峰时间与异麦芽糖重叠，无法用高效液相色谱法对低聚异麦芽糖进行定性和定量测定，相应的异麦芽糖、乳糖高效液相色谱图如图1、图2所示，异麦芽糖、乳糖出峰时间一致，无法准确定性、定量。
[0004]配方奶粉及其相关产品中大部分均含有乳糖，因此现有的检测方法无法对配方奶粉进行准确的定性和定量测定。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供一种配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法，用于解决现有的检测方法无法针对配方奶粉进行准确的定性和定量测定的技术问题，从而达到准确检测配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的目的。
[0006]为解决上述问题，本专利技术所采用的技术方案如下：
[0007]一种配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法，包括以下步骤：
[0008]步骤S1：配制盐酸溶液、氢氧化钠溶液、PBS缓冲液以及β
‑
半乳糖苷酶
‑
葡萄糖氧化酶溶液；
[0009]步骤S2：分别称取异麦芽糖标准品、潘糖标准品以及异麦芽三糖标准品，配置成不同浓度的异麦芽糖标准工作液、潘糖标准工作液以及异麦芽三糖标准工作液；
[0010]步骤S3：采用高效液相色谱法，并按照一定的色谱条件，得到不同浓度的标准工作液中异麦芽糖、潘糖以及异麦芽三糖在色谱图中的峰面积值，并以所述峰面积值为纵坐标，以对应的标准工作液的浓度值为横坐标，建立异麦芽糖标准曲线、潘糖标准曲线以及异麦芽三糖标准曲线；
[0011]步骤S4：称取待测样品，加入所述β
‑
半乳糖苷酶
‑
葡萄糖氧化酶溶液配置成待测
液；
[0012]步骤S5：用高效液相色谱法得到所述待测液中异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖在色谱图中的峰面积值，根据所述峰面积值在对应的标准曲线中查得所述待测液中异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖的浓度，再通过换算公式得到所述待测样品中异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖的含量。
[0013]作为本专利技术优选的实施方式，在所述步骤S4中，所述待测液的配置过程为：
[0014]精密称取待测样品2～5g；
[0015]向所述待测样品中加入45℃～50℃的水20ml，混合均匀，静置10min，冷却至室温；
[0016]利用所述盐酸溶液调节pH值至1.7
±
0.1，放置1min；
[0017]利用所述氢氧化钠溶液调节pH值至4.5
±
0.1；
[0018]加入5mL所述β
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半乳糖苷酶
‑
葡萄糖氧化酶溶液，摇匀，置于60℃恒温水浴锅中振荡60min，迅速冷却后，并用水定容至50mL，摇匀，过滤膜至样品瓶中，作为待测液。
[0019]作为本专利技术优选的实施方式，所述色谱条件包括：氨基色谱柱、流动相、检测器温度、柱温、流速以及进样量；
[0020]其中，所述氨基色谱柱的柱长为250mm，内径为4.6mm，膜厚为5μm；按重量百分比计，所述流动相由73％的乙腈和27％的水组成；所述检测器温度为35℃，所述柱温为35℃，所述流速为1.0mL/min，所述进样量为10μL。
[0021]作为本专利技术优选的实施方式，所述盐酸溶液的浓度为5.0mol/L或0.1mol/L。
[0022]作为本专利技术优选的实施方式，所述氢氧化钠溶液的浓度为5.0mol/L和/或0.1mol/L。
[0023]作为本专利技术优选的实施方式，所述PBS缓冲液的pH值为6.0，制备过程为：称取1.1g的磷酸二氢钾和0.3g的磷酸氢二钾，用水定容至50mL。
[0024]作为本专利技术优选的实施方式，所述β
‑
半乳糖苷酶
‑
葡萄糖氧化酶溶液的制备过程为：称取0.8g的β
‑
半乳糖苷酶和0.5g的葡萄糖氧化酶于同一比色管中，用10mL的所述PBS缓冲液溶解，混合均匀，现配现用。
[0025]作为本专利技术优选的实施方式，所述β
‑
半乳糖苷酶的活力≥240U/mg，所述葡萄糖氧化酶的活力≥15U/mg。
[0026]作为本专利技术优选的实施方式，所述异麦芽糖标准品、所述潘糖标准品以及所述异麦芽三糖标准品的纯度均大于95％。
[0027]作为本专利技术优选的实施方式，所述水、所述盐酸溶液中的水以及所述氢氧化钠溶液中的水均为GB/T 6682规定的一级水。
[0028]相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：
[0029](1)本专利技术所提供的检测方法，利用β
‑
半乳糖苷酶对配方奶粉中的乳糖进行酶解，从而除去乳糖的干扰，并利用高效液相色谱法实现对配方奶粉中的低聚异麦芽糖进行准确的定性和定量检测；
[0030](2)本专利技术对配方奶粉原料及其产品建立统一的样品前处理方法，为配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测提供技术支撑，弥补现有分析技术的空白，助力行业发展与监管。
[0031]下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步详细说明。
附图说明
[0032]图1
‑
是本专利技术异麦芽糖工作液的色谱图；
[0033]图2
‑
是本专利技术乳糖工作液的色谱图；
[0034]图3
‑
是本专利技术实施例的标准工作液浓度5的色谱图；
[0035]图4
‑
是本专利技术实施例1的第一待测液色谱图；
[0036]图5
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是本专利技术实施例2的第二待测液色谱图；
[0037]图6
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是本专利技术实施例3的第三待测液色谱图；
[0038]图7
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1：配制盐酸溶液、氢氧化钠溶液、PBS缓冲液以及β
‑
半乳糖苷酶
‑
葡萄糖氧化酶溶液；步骤S2：分别称取异麦芽糖标准品、潘糖标准品以及异麦芽三糖标准品，配置成不同浓度的异麦芽糖标准工作液、潘糖标准工作液以及异麦芽三糖标准工作液；步骤S3：采用高效液相色谱法，并按照一定的色谱条件，得到不同浓度的标准工作液中异麦芽糖、潘糖以及异麦芽三糖在色谱图中的峰面积值，并以所述峰面积值为纵坐标，以对应的标准工作液的浓度值为横坐标，建立异麦芽糖标准曲线、潘糖标准曲线以及异麦芽三糖标准曲线；步骤S4：称取待测样品，加入所述β
‑
半乳糖苷酶
‑
葡萄糖氧化酶溶液配置成待测液；步骤S5：用高效液相色谱法得到所述待测液中异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖在色谱图中的峰面积值，根据所述峰面积值在对应的标准曲线中查得所述待测液中异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖的浓度，再通过换算公式得到所述待测样品中异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖的含量。2.根据权利要求1所述的配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法，其特征在于，在所述步骤S4中，所述待测液的配置过程为：精密称取待测样品2～5g；向所述待测样品中加入45℃～50℃的水20ml，混合均匀，静置10min，冷却至室温；利用所述盐酸溶液调节pH值至1.7
±
0.1，放置1min；利用所述氢氧化钠溶液调节pH值至4.5
±
0.1；加入5mL所述β
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半乳糖苷酶
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葡萄糖氧化酶溶液，摇匀，置于60℃恒温水浴锅中振荡60min，迅速冷却后，并用水定容至50mL，摇匀，过滤膜至样品瓶中，作为待测液。3.根据权利要求1所述的配方奶粉中低聚异麦芽糖含量的检测方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：张协光，杨华瑞，滕明攀，刘俊杰，严虞虞，李妙立，陈宇轩，王奇，李锦才，黄小龙，
申请(专利权)人：深圳市计量质量检测研究院，
类型：发明
国别省市：