一种利用HPLC检测4-羟基咔唑含量的方法技术

本发明专利技术属于化学检测技术领域，涉及一种利用HPLC检测4

【技术实现步骤摘要】
一种利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法


[0001]本专利技术属于化学检测
，涉及一种利用HPLC检测4
‑
羟基咔唑含量的方法。

技术介绍

[0002]卡维地洛是α、β受体阻断剂，具有舒张血管作用，用于治疗轻度及中度高血压或伴有肾功能不全、糖尿病的高血压病症。4
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羟基咔唑是合成卡维地洛的重要中间体，因此具有很重要的地位。
[0003]目前，4
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羟基咔唑的含量检测方法并无相关文献报道。为了保证合成卡维地洛的成功率，需要对合成卡维地诺的中间体进行质量控制，含量是其必须要检测项目。因4
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羟基咔唑是一种三环芳香杂环化合物，碱性和氧化条件会影响其稳定性，生成的杂质会影响其含量的测定，因此，寻求一种能够有效检测4
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羟基咔唑含量的方法，对于其质量控制具有十分重要的意义，同时，适合含量的4
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羟基咔唑对成功合成卡维地洛也具有十分重要的意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是针对现有技术存在的上述问题，提出一种操作简单、准确度高、检测效率高、专属性好的利用高效液相色谱法(HPLC)检测4
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羟基咔唑含量的方法。
[0005]本专利技术的技术方案中一种利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法，包括如下步骤：
[0006]S1、将4
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羟基咔唑对照品溶解于甲醇中得对照溶液；
[0007]S2、将待检品溶解于甲醇中得供试品溶液；
[0008]S3、将对照溶液、供试品溶液分别注入液相色谱仪，使用HPLC检测待测品中4
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羟基咔唑的含量。
[0009]进一步地，步骤S1中对照溶液中4
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羟基咔唑浓度为0.04～0.06mg/ml。用4
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羟基咔唑纯品作为对照物质，以对照物质和待检品中待测组分的响应信号(即峰面积大小)相比较进行定量，用该方法计算4
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羟基咔唑含量，简单准确。
[0010]进一步地，步骤S3中HPLC检测的流动相为：流动相A：0.04～0.06v/v％磷酸水溶液和流动相B：乙腈的混合液。
[0011]0.04～0.06v/v％磷酸水溶液可以用来调节峰型，一般流动相的pH值是根据样品的pH值来定的，要根据样品的pKa或者pKb值来确定，磷酸就是通过调节酸碱性来修饰峰型。同时磷酸水溶液可以作为离子抑制剂，有助于分离物质。以0.04～0.06v/v％磷酸水溶液和乙腈混合液为流动相，使得4
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羟基咔唑峰型较好，且其他物质不干扰其含量检测。
[0012]进一步地，步骤S3中HPLC检测过程中流动相流速为0.8～1.2ml/min。通过控制流动相的流速，可以使4
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羟基咔唑与其他物质得到有效的分离，从而更准确的计算供试品溶液中4
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羟基咔唑的含量。
[0013]进一步地，HPLC检测采用梯度洗脱，梯度洗脱参数如下：0～5min，流动相A含量从75～85v/v％逐渐降低至55～65v/v％；5～15min，流动相A含量在55～65v/v％范围内维持不变；15～16min，流动相A含量从55～65v/v％逐渐升高至75～85v/v％；16～20min，流动相
A含量在75～85v/v％范围内维持不变。采用梯度洗脱并控制梯度洗脱流动相比例，有利于4
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羟基咔唑与其他物质分离，可以有效去除其它杂质对4
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羟基咔唑含量测定的影响。
[0014]进一步地，步骤S3中HPLC检测过程中色谱柱为粒径3～8μm的C18色谱柱，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。
[0015]进一步地，步骤S3中HPLC检测过程中色谱柱的柱温为25～35℃。通过控制柱温可以使物质的保留时间具有再现性，在该柱温范围内，能使4
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羟基咔唑与其他物质得到有效的分离，同时能保护色谱柱。
[0016]进一步地，步骤S3中HPLC检测过程中使用的检测器为紫外可见吸收检测器，检测波长为210～220nm。
[0017]进一步地，所述HPLC检测方法的检测线性范围为0.025～0.075mg/mL。当待检品中4
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羟基咔唑含量在该范围内，4
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羟基咔唑测定具有良好的线性范围，准确度高。
[0018]与现有技术相比，本专利技术的技术方案具有以下有益效果：
[0019](1)本专利技术的技术方案利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法，操作简单，准确度高，检测效率高，专属性好，线性良好；
[0020](2)以磷酸水溶液和乙腈混合液为流动相，使得4
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羟基咔唑峰型较好，且其他物质不干扰其含量检测，磷酸溶液可以作为离子抑制剂，有助于分离物质；
[0021](3)采用梯度洗脱并控制梯度洗脱流动相比例，有利于4
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羟基咔唑与其他物质分离，可以有效去除其它杂质对4
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羟基咔唑含量测定的影响；
[0022](4)本专利技术利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法中检测线性范围为0.025～0.075mg/mL，在此范围内线性回归系数R2为0.9998，线性良好；
[0023](5)采用本专利技术检测方法选择合适含量的4
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羟基咔唑，可以进一步有效提升卡维地洛合成的成功率。
附图说明
[0024]图1为实施例1中4
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羟基咔唑含量的典型图谱；
[0025]图2为实施例1中4
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羟基咔唑未破坏、酸、碱、氧化、加热以及光破坏后的HPLC色谱图；
[0026]图3为实施例1中4
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羟基咔唑未破坏的峰纯度图谱；
[0027]图4为实施例1中4
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羟基咔唑酸破坏的峰纯度图谱；
[0028]图5为实施例1中4
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羟基咔唑碱破坏的峰纯度图谱；
[0029]图6为实施例1中4
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羟基咔唑氧化破坏的峰纯度图谱；
[0030]图7为实施例1中4
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羟基咔唑液体高温破坏的峰纯度图谱；
[0031]图8为实施例1中4
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羟基咔唑固体高温破坏的峰纯度图谱；
[0032]图9为实施例1中4
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羟基咔唑液体光照破坏的峰纯度图谱；
[0033]图10为实施例1中4
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羟基咔唑固体光照破坏的峰纯度图谱；
[0034]图11为对比例1中的4
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羟基咔唑氧化破坏的峰纯度图谱；
[0035]图12为对比例2中的4
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羟基咔唑氧化破坏的峰纯度图谱；
[0036]图13为4
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、将4
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羟基咔唑对照品溶解于甲醇中得对照溶液；S2、将待检品溶解于甲醇中得供试品溶液；S3、将对照溶液、供试品溶液分别注入液相色谱仪，使用HPLC检测待测品中4
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羟基咔唑的含量。2.根据权利要求1所述利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法，其特征在于，步骤S1中对照溶液中4
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羟基咔唑浓度为0.04～0.06mg/ml。3.根据权利要求1所述利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法，其特征在于，步骤S3中HPLC检测的流动相为：流动相A：0.04～0.06v/v％磷酸水溶液和流动相B：乙腈的混合液。4.根据权利要求1所述利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法，其特征在于，步骤S3中HPLC检测过程中流动相流速为0.8～1.2ml/min。5.根据权利要求3所述利用HPLC检测4
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羟基咔唑含量的方法，其特征在于，HPLC检测采用梯度洗脱，梯度洗脱参数如下：0～...

【专利技术属性】
技术研发人员：严清，钱高燕，郝宇薇，
申请(专利权)人：宁波三生生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：