鞘氨醇杆菌HY-100C及其应用制造技术

本发明专利技术公开鞘氨醇杆菌HY

【技术实现步骤摘要】
鞘氨醇杆菌HY
‑
100C及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及鞘氨醇杆菌HY
‑
100C及其应用。

技术介绍

[0002]邻二氯苯是氯苯类化合物中较为典型的一种，是一类持久性疏水有机污染物。这类污染物来源广泛，主要来自于医药、化工、电子等行业，常作为化工原料以及化学中间体。
[0003]邻二氯苯物理化学性质稳定，普遍存在于大气、水、土壤中难以降解，其具有的生物累积性和持久性，会对生态造成潜在危害。该类物质具有刺激性芳香气味，可由皮肤接触、呼吸、食入等途径进入人体。短期内大剂量摄入会抑制中枢神经系统，并对眼、呼吸道等造成刺激性作用；若误服则会引起腹痛、呕吐等急性中毒症状。长期处于邻二氯苯浓度较高的环境中，则会损害肝肾等器官。邻二氯苯已被美国环保局(EPA)列为优先控制污染物和有毒污染物，它也被我国列入中国环境优先污染物黑名单中。但是，传统处理技术存在成本高、处理不完全、易产生二次污染等问题，目前仍缺乏针对邻二氯苯的高效降解技术。生物法是经济高效、绿色安全的VOCs治理技术，获得具备邻二氯苯降解能力的降解菌株是实现邻二氯苯高效生物降解的关键。
[0004]此前已有研究者利用鞘氨醇杆菌来处理VOCs，如厦门大学袁军曾利用鞘氨醇杆菌在三角瓶中处理多环芳烃达到了90％的去除率，这说明利用鞘氨醇杆菌来处理VOCs是可行的。但未曾发现国内外有报道称筛选出鞘氨醇杆菌以邻二氯苯为唯一碳源来实现邻二氯苯的高效降解。如果能筛选得到以邻二氯苯为唯一碳源的鞘氨醇杆菌来实现邻二氯苯的高效降解，既能很好的解决邻二氯苯的生物降解问题，也能为鞘氨醇杆菌高效处理VOCs增添又一新的实例。
[0005]本专利技术从环境中筛选到一株以邻二氯苯为唯一碳源的高效降解菌株，为处理含该类污染物的生物净化工程提供了有力支持。

技术实现思路

[0006]针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供鞘氨醇杆菌HY
‑
100C及其应用的技术方案。
[0007]本专利技术具体通过以下技术方案实现：
[0008]本专利技术第一方面提供了鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium sp.)HY
‑
100C，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2022年09月20日，保藏编号：CCTCC No:M 20221449，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072。
[0009]本专利技术第二方面提供了上述鞘氨醇杆菌HY
‑
100C在降解有机污染物中的应用。
[0010]进一步，所述有机污染物为邻二氯苯、氯苯、甲苯或乙苯。
[0011]本专利技术第三方面提供了利用上述的鞘氨醇杆菌降解有机污染物的方法，其包括以下步骤：
[0012]1)将鞘氨醇杆菌HY
‑
100C经扩大培养获得的菌液作为酶源；
[0013]2)以有机污染物为底物，于无机盐培养基中，在pH3～10、20℃～40℃条件下进行降解反应，实现对有机污染物的降解。
[0014]进一步，所述步骤1)具体包括：
[0015]a斜面培养：将鞘氨醇杆菌HY
‑
100C接种于斜面LB固体培养基，30℃培养24～36h，获得斜面菌体；
[0016]b扩大培养：用接种环挑取步骤1)获得的斜面菌体接种至LB液体培养基中，30℃，培养24～36h，获得OD
600
＝0.1～0.2的菌液。
[0017]进一步，所述步骤1)中酶源用量以无机盐培养基中OD
600
计为0.01～0.5。
[0018]进一步，所述步骤2)中有机污染物为邻二氯苯、氯苯、甲苯或乙苯。
[0019]进一步，所述步骤2)中无机盐培养基终浓度组成为：Na2HPO4·
12H2O 4.5g/L、KH2PO
4 1.0g/L、(NH4)2SO
4 2.5g/L、MgSO4·
7H2O 0.2g/L、无水CaCl
2 0.023g/L，微量元素母液1mL/L，pH 7.0，溶剂为去离子水；
[0020]所述的微量元素母液浓度组成：FeSO4·
7H2O 1.0g/L、CuSO4·
5H2O 0.02g/L、H3BO
3 0.014g/L、MnSO4·
4H2O 0.10g/L、ZnSO4·
7H2O 0.10g/L、Na2MoO4·
2H2O0.02g/L、CoCl2·
6H2O 0.02g/L，溶剂为去离子水。
[0021]进一步，所述斜面LB固体培养基终浓度组成为：NaCl 10g/L、胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L，琼脂18～20g/L，溶剂为去离子水，pH值自然。
[0022]进一步，所述LB液体培养基终浓度组成为：NaCl 10g/L、胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L，溶剂为去离子水，pH值自然。
[0023]本专利技术提供了一株有机污染物特别是邻二氯苯的高效降解菌——鞘氨醇杆菌HY
‑
100C，该菌为革兰氏阳性细菌，能以邻二氯苯等有机污染物为唯一碳源和能源生长繁殖并高效降解该底物，在初始菌量(以OD
600
计)仅为OD
600
＝0.02的情况下，能够完全降解高达600mg/L以内的邻二氯苯等有机污染物。该菌株的生长温度和pH范围广，在20～35℃，pH为5.0～8.0范围均对邻二氯苯降解较好，30小时降解率都能达到85％以上(25～30℃，pH为7.0～8.0时，30小时降解率可达90％以上)。对生物法净化邻二氯苯的工程应用具有重要意义。此外，鞘氨醇杆菌HY
‑
100C还能不同程度的降解甲苯、氯苯、乙苯。
附图说明
[0024]图1为鞘氨醇杆菌HY
‑
100C的透射电镜照片；
[0025]图2为系统发育树；
[0026]图3为鞘氨醇杆菌HY
‑
100C的菌体生长、邻二氯苯降解曲线图；
[0027]图4为不同pH值培养液对鞘氨醇杆菌HY
‑
100C的邻二氯苯降解(A)、生长(B)、矿化(C)的影响柱形图；
[0028]图5为不同温度对鞘氨醇杆菌HY
‑
100C的邻二氯苯降解(A)、矿化(B)的影响柱形图；
[0029]图6为鞘氨醇杆菌HY
‑
100C对不同初始浓度邻二氯苯的降解曲线图；
[0030]图7为鞘氨醇杆菌HY
‑
100C在不同初始邻二氯苯浓度下的生长曲线；
[0031]图8为模拟生物滴滤塔处理邻二氯苯废气进出口浓度及去除率；
[0032]图9为模拟生物滴滤塔处理混合废气进出口浓度及去除率。
具体实施方式
[0033]下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium sp.)HY
‑
100C，其保藏编号为：CCTCC No:M20221449。2.如权利要求1所述的鞘氨醇杆菌HY
‑
100C在降解有机污染物中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述有机污染物为邻二氯苯、氯苯、甲苯或乙苯。4.利用权利要求1所述的鞘氨醇杆菌降解有机污染物的方法，其特征在于包括以下步骤：1)将鞘氨醇杆菌HY
‑
100C经扩大培养获得的菌液作为酶源；2)以有机污染物为底物，于无机盐培养基中，在pH3～10、20℃～40℃条件下进行降解反应，实现对有机污染物的降解。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤1)具体包括：a斜面培养：将鞘氨醇杆菌HY
‑
100C接种于斜面LB固体培养基，30℃培养24～36h，获得斜面菌体；b扩大培养：用接种环挑取步骤1)获得的斜面菌体接种至LB液体培养基中，30℃，培养24～36h，获得OD
600
＝0.1～0.2的菌液。6.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于所述步骤1)中酶源用量以无机盐培养基中OD
600
计为0.01～0.5。7.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于所述步骤2)中有...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈东之，张维茜，刘浩阳，陆李超，於洋，陈建孟，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：