用于治疗多发性硬化的肽和方法技术

本发明专利技术涉及用于治疗脱髓鞘病症的来源于髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)的免疫原性肽，并且涉及针对呈递野生型MOG表位序列的抗原呈递细胞的溶细胞性CD4+T细胞或NKT细胞的产生。递细胞的溶细胞性CD4+T细胞或NKT细胞的产生。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗多发性硬化的肽和方法


[0001]本专利技术涉及免疫原性肽。特别地，本专利技术涉及来源于髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein，MOG)的包含与T细胞表位连接的氧化还原酶基序的免疫原性肽、以及由这些肽产生的溶细胞性CD4+T细胞，其用于治疗脱髓鞘病症，例如多发性硬化(Multiple Sclerosis，MS)或视神经脊髓炎(Neuromyelitis Optica，NMO)。

技术介绍

[0002]已描述了数种策略来防止针对抗原的不希望免疫应答的产生。WO2008/017517描述了使用包含给定抗原蛋白MHC II类T细胞表位和氧化还原酶基序的肽的新策略。这些肽将CD4+T细胞转化成具有溶细胞特性的细胞类型，称为溶细胞性CD4+T细胞。这些细胞能够通过触发凋亡杀伤那些抗原呈递细胞(antigen presenting cell，APC)，所述抗原呈递细胞呈递从中获得肽的抗原。WO2008/017517示出了用于变态反应和自身免疫病(例如I型糖尿病)的这一概念。
[0003]WO2009101207和Carlier et al.(2012)Plos one 7,10e45366进一步更详细地描述了抗原特异性溶细胞性细胞。WO2016059236还公开了经修饰的肽，其中在氧化还原酶基序附近存在另外的组氨酸。WO2012069568还公开了包含抗原蛋白NKT细胞表位和氧化还原酶基序的肽。这些肽能够引发NKT细胞的活化，其代表用于治疗许多疾病例如感染性疾病和自身免疫病或癌症的有价值的方法。WO2017182528描述了包含MOG表位的免疫原性肽用于治疗多发性硬化的用途。
[0004]多发性硬化(MS)是中枢神经系统的最常见自身免疫病症，并且在过去二十年，其发生率在大多数地区显著提高。据估计，在2016年，全世界超过220万人患有MS。MS的全球发生率在男性与女性之间显著不同。在青春期前(preteen)的儿童中，发生率大致相等。然而，在青少年和年长群体组中，发生该疾病的女性约为两倍(GDB 2016Motor Neuron Disease Collaborators.2018.Lancet Neurol.17(12),1083
‑
1097)。MS最常见是通过评估临床症状与医学成像和/或实验室测试组合来诊断的。
[0005]可在对象中表现出的临床症状是多样的并且包括许多神经症状。然而，自主性、视觉、运动和感觉问题显示为最常见的(Compston and Coles.2008.Lancet.372(9648):1502
‑
17)。
[0006]髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)是仅在少突胶质细胞膜和髓鞘的最外层表面处表达的糖蛋白。MOG的确切分子功能仍有争议，然而，本领域中显示出一致的是：其参与髓鞘的完成和/或维持，并且在此可能充当髓鞘上的黏附分子以提供结构完整性(Peschl et al.Front.Immunol.(2017).8,529)。MOG的假设的重要性是通过以下来证实的：哺乳动物中MOG的高度同源编码区(Pham
‑
Dinh et al.(1994)J.Neurochem.63(6),2353
‑
2356)，以及MOG可在实验模型和炎性脱髓鞘疾病中充当T和B细胞应答的自身抗原的观察结果(Peschl et al.Front.Immunol.(2017).8,529)。已经报道了针对MOG的抗体(抗MOG Ab)在MS发病机制中的作用，并且可被认为是MS诊断中的生物标志物，但是人MOG Ab的确切病理学作用和
NO：11)，FLRVPSWKITLFH(SEQ ID NO：12)，FLRVPCWKITLFHH(SEQ ID NO：13)，FLRVPSWKITLFHH(SEQ ID NO：14)，FLRVPCWKITLFHHH(SEQ ID NO：15)，或FLRVPSWKITLFHHH(SEQ ID NO：16)，
[0022]作为替代地，所述免疫原性肽另外包含一个或更多个在所述表位C端侧翼的R氨基酸残基，产生例如以下接头
‑
T细胞表位
‑
侧翼的序列中的任一者：
[0023]FLRVPCWKITLFR(SEQ ID NO：17)，FLRVPSWKITLFR(SEQ ID NO：18)，
[0024]FLRVPCWKITLFRR(SEQ ID NO：19)，FLRVPSWKITLFRR(SEQ ID NO：20)，或
[0025]FLRVPCWKITLFRRR(SEQ ID NO：21)，或FLRVPSWKITLFRRR(SEQ ID NO：22)。
[0026]方面4.根据方面1至3中任一项所述的肽，其中所述氧化还原酶基序具有Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
C
‑
(SEQ ID NO：116至140)的序列。
[0027]方面5.根据方面1至3中任一项所述的肽，其中所述氧化还原酶基序具有Z
m
‑
[CST]‑
XX
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
XX
‑
[CST]‑
的序列。
[0028]方面6.根据方面1至5中任一项所述的肽，其中所述氧化还原酶基序选自以下氨基酸基序：
[0029](a)Z
m
‑
[CST]‑
X
n
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
[CST]‑
，
[0030]其中n是0，并且其中m是选自0、1或2的整数，
[0031]其中Z是任意氨基酸，优选是碱性氨基酸并优选选自H、K、R和如本文中所限定的非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或H，最优选K；
[0032](b)Z
m
‑
[CST]‑
X
n
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
[CST]‑
，
[0033]其中n是1，其中X是任意氨基酸，优选是碱性氨基酸并选自H、K、R和非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或R，
[0034]其中m是选自0、1或2的整数，
[0035]其中Z是任意氨基酸，优选是碱性氨基酸并优选选自H、K、R和如本文中所限定的非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或H，最优选K；
[0036](c)如方面1中所限定的Z
m
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.长度为12至50个氨基酸的分离的免疫原性肽，所述免疫原性肽包含：a1)具有序列Z
m
‑
[CST]
‑
X
n
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
[CST]的氧化还原酶基序，其中n是选自2、0、1或3的整数，其中m是选自2、1、0或3的整数，其中X是任意氨基酸，其中Z是任意氨基酸，其中X是任意氨基酸，其中C代表半胱氨酸，S代表丝氨酸，T代表苏氨酸；a2)具有选自以下的氨基酸序列的T细胞表位：MHC II类T细胞表位FLRVPSWKI(SEQ ID NO：2)和FLRVPCWKI(SEQ ID NO：1)，或NKT细胞表位FLRVPCW(SEQ ID NO：63)和FLRVPSW(SEQ ID NO：64)，并且其中所述氧化还原酶基序和所述表位由包含序列VRY的具有3至7个氨基酸的接头序列隔开。2.根据权利要求1所述的肽，其中所述氧化还原酶基序选自以下氨基酸基序：(a)Z
m
‑
[CST]
‑
X
n
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
[CST]
‑
，其中n是0，并且其中m是选自0、1或2的整数，其中Z是任意氨基酸，优选是碱性氨基酸并优选选自H、K、R和非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或H，最优选K；(b)Z
m
‑
[CST]
‑
X
n
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
[CST]
‑
，其中n是1，其中X是任意氨基酸，优选是碱性氨基酸并选自H、K、R和非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或R，其中m是选自0、1或2的整数，其中Z是任意氨基酸，优选是碱性氨基酸并优选选自H、K、R和非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或H，最优选K；(c)Z
m
‑
[CST]
‑
X
n
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
[CST]
‑
，其中n是2，从而在所述氧化还原酶基序内产生内部X1X2氨基酸偶联物，其中X是任意氨基酸，优选地其中至少一个X是选自以下的碱性氨基酸：H、K、R和非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或R，其中m是选自0、1或2的整数，其中Z是任意氨基酸，优选是碱性氨基酸并优选选自H、K、R和非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或H，最优选K；(d)Z
m
‑
[CST]
‑
X
n
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
[CST]
‑
其中n是3，从而在所述氧化还原酶基序内产生内部X1X2X3氨基酸段，其中X是任意氨基酸，优选地其中至少一个X是选自以下的碱性氨基酸：H、K、R和非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或R，其中m是选自0、1或2的整数，其中Z是任意氨基酸，优选是碱性氨基酸并优选选自H、K、R和本文中所限定的非天然碱性氨基酸例如L
‑
鸟氨酸，更优选K或H；或者(h)Z
m
‑
[CST]
‑
X
n
‑
C
‑
或Z
m
‑
C
‑
X
n
‑
[CST]
‑
，其中n是0至3并且其中m是0，并且其中C或[CST]残基之一已被修饰以在所述基序的氨基酸残基的N端酰胺上或在C端羧基上携带乙酰基、甲基、乙基或丙酰基(SEQ ID NO：184至203)。3.根据权利要求1或2所述的肽，其中所述T细胞表位在其C端侧翼为氨基酸序列TLF，产
生以下T细胞表位
‑
侧翼序列：FLRVPCVVKITLF(SEQ ID NO：3)或FLRVPSVVKITLF(SEQ ID NO：4)。4.根据权利要求1至3中任一项所述的肽，其中所述免疫原性肽另外包含一个或更多个在所述表位C端侧翼的K氨基酸残基，产生以下接头
‑
T细胞表位
‑
侧翼的序列：5.根据权利要求1至4中任一项所述的肽，其中所述氧化还原酶基序具有Z
m
‑
C
‑
XX
‑
C
‑
的序列，其中Z是碱性氨基酸，所述碱性氨基酸优选选自K和H，m是0、1或2，优选地其中所述氧化还原酶基序包含序列CPYC(SEQ ID NO：23)或CHGC(SEQ ID NO：297)。6.根据权利要求5所述的肽，其中所述氧化还原酶基序具有选自以下的序列：HCPYC(SEQ ID NO：24)，KCPYC7.根据权利要求1至4中任一项所述的肽，其中所述氧化还原酶基序具有Z
m
‑
C
‑
X
‑
C
‑
的序列，其中Z是碱性氨基酸，所述碱性氨基酸优选选自K和H，m是0、1或2，并且X优选为R。8.根据权利要求7所述的肽，其中所述氧化还原酶基序具有选自以下的序列：CRC，KCRC(SEQ ID NO：43)，HCRC(SEQ ID NO：270)和KHCRC(SEQ ID NO：271)。9.根据权利要求1至4中任一项所述的肽，其中所述肽包含选自以下的氨基酸序列中的任一者或由选...

【专利技术属性】
技术研发人员：让马里，
申请(专利权)人：易姆赛斯股份公司，
类型：发明
国别省市：