具有新氧化还原酶基序的免疫原性肽制造技术

本发明专利技术涉及包含T细胞表位和活性提高的氧化还原酶基序的免疫原性肽，及其在对象中调节免疫应答的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有新氧化还原酶基序的免疫原性肽
技术介绍
已经描述了数种策略来防止产生针对抗原的不期望的免疫应答。WO2008/017517描述了使用包含氧化还原酶基序和给定抗原蛋白质的MHCII类抗原的肽的新策略。这些肽将CD4+T细胞转化为具有溶细胞特性的细胞类型，称为溶细胞性CD4+T细胞。这些细胞能够通过触发凋亡来杀伤呈递该肽所源自的抗原的那些抗原提呈细胞(antigenpresentingcell，APC)。WO2008/017517表明了用于变态反应和自身免疫病(例如I型糖尿病)的这一概念。在此，胰岛素可用作自身抗原。WO2009101207和Carlieretal.(2012)Plosone7,10e45366更详细地进一步描述了抗原特异性溶细胞性细胞。WO2009101206描述了具有氧化还原酶基序和可溶性同种抗原的MCHII类表位的肽在用于替代治疗中时防止针对这样的抗原的免疫应答(例如，在糖尿病患者中针对注射的胰岛素的不期望的免疫应答)的用途。WO2016059236还公开了其中在氧化还原酶基序的附近存在另外的组氨酸的经修饰肽。在设计针对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.免疫原性肽，所述免疫原性肽包含：/na)氧化还原酶基序，/nb)抗原蛋白质的T细胞表位，/nc)在a)与b)之间的0至7个氨基酸的接头，/n其中：/n(i)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：/nZ

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181112 EP 18205611.9;20181112 EP 18205615.01.免疫原性肽，所述免疫原性肽包含：
a)氧化还原酶基序，
b)抗原蛋白质的T细胞表位，
c)在a)与b)之间的0至7个氨基酸的接头，
其中：
(i)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：
Z1-Bl-[CST]-Xn-C，或Z1-Bl-C-Xn-[CST]，
其中X和Bl各自为任何氨基酸，优选地其中所述基序中的至少一个X为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中Z1为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中n为选自包含以下的组的整数：1、3、0、4、5或6，
其中l为选自包含以下的组的整数：0至3；或者
(ii)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：
[CST]-Xn-C-Bm-Z2，或C-Xn-[CST]-Bm-Z2，其中X、Bl和Bm各自为任何氨基酸，优选地其中所述基序中的至少一个X为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中Z2为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中n为选自包含以下的组的整数：1、3、0、4、5或6，
其中m为选自包含以下的组的整数：0至3；或者
(iii)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：
Z1-Bl-[CST]-Xn-C-Bm-Z2，或Z1-Bl-C-Xn-[CST]-Bm-Z2，
其中X、Bl和Bm各自为任何氨基酸，优选地其中所述基序中的至少一个X为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中Z1和Z2是选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中n为选自包含以下的组的整数：1、3、0、4、5或6，
其中l和m为选自包含以下的组的整数：0至3；或者
(iv)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：
[CST]XnC或CXn[CST]，
其中n为选自包含以下的组的整数：1、3、0、4、5或6，其中X各自为任何氨基酸，条件是所述氧化还原酶基序中的至少一个X为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸。


2.根据权利要求1所述的免疫原性肽，其中n为选自1或3的整数，并且其中所述碱性氨基酸中的至少一个是H、K或R。


3.根据权利要求1或2所述的免疫原性肽，其中所述抗原蛋白质的T细胞表位是NKT细胞表位或MHCII类T细胞表位。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的免疫原性肽，其中所述表位的长度为7至25个氨基酸和/或其中所述免疫原性肽的长度为9至50个氨基酸。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫原性肽，其中所述抗原蛋白质是自身抗原、可溶性同种因子、由移植物脱落的同种抗原、胞内病原体的抗原、用于基因治疗或基因疫苗接种的病毒载体的抗原、肿瘤相关抗原或变应原。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的免疫原性肽，其用于药物，优选地用于治疗和/或预防自身免疫病、胞内病原体的感染、肿瘤、同种移植排斥、或者针对可溶性同种因子、针对变应原暴露或针对用于基因治疗或基因疫苗接种的病毒载体的免疫应答。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的免疫原性肽，其中所述基序中的至少一个X为P或Y。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的免疫原性肽，其中所述接头为0至4个氨基酸的接头。


9.根据权利要求1至8中任一项所述的免疫原性肽，其中所述氧化还原酶基序不是天然存在于所述抗原蛋白质中T细胞表位的N端或C端11个氨基酸的区域中。


10.根据权利要求1至9中任一项所述的免疫原性肽，其中所述T细胞表位不天然包含所述氧化还原酶基序。


11.用于制备根据权利要求1至10中任一项所述的免疫原性肽的方法，其包括以下步骤：
(a)提供由所述抗原蛋白质的T细胞表位组成的肽序列，以及
(b)将所述肽序列与所述氧化还原酶基序连接，使得所述基序和所述表位彼此相邻或被0至7个氨基酸的接头隔开。


12.用于获得抗原特异性溶细胞性CD4+T细胞群的方法，所述抗原特异性溶细胞性CD4+T细胞针对呈递所述抗原的APC，所述方法包括以下步骤：
-提供外周血细胞，
-使所述细胞与免疫原性肽接触，以及
-在存在IL-2的情况下扩增所述细胞，
所述免疫原性肽包含：
a)氧化还原酶基序，
b)抗原蛋白质的T细胞表位，
c)在a)与b)之间的0至7个氨基酸的接头，
其中：
(i)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：
Z1-Bl-[CST]-Xn-C，或Z1-Bl-C-Xn-[CST]，
其中X和Bl各自为任何氨基酸，优选地其中所述基序中的至少一个X为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中Z1为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中n为选自包含以下的组的整数：1、3、0、4、5或6，
其中l为选自包含以下的组的整数：0至3；或者
(ii)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：
[CST]-Xn-C-Bm-Z2，或C-Xn-[CST]-Bm-Z2，其中X、Bl和Bm各自为任何氨基酸，优选地其中所述基序中的至少一个X为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中Z2为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中n为选自包含以下的组的整数：1、3、0、4、5或6，
其中m为选自包含以下的组的整数：0至3；或者
(iii)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：
Z1-Bl-[CST]-Xn-C-Bm-Z2或Z1-Bl-C-Xn-[CST]-Bm-Z2，
其中X、Bl和Bm各自为任何氨基酸，优选地其中所述基序中的至少一个X为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中Z1和Z2为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸，
其中n为选自包含以下的组的整数：1、3、0、4、5或6，
其中l和m为选自包含以下的组的整数：0至3；或者
(iv)所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：
[CST]XnC或CXn[CST]，
其中n为选自包含以下的组的整数：1、3、0、4、5或6，其中X各自为任何氨基酸，条件是所述氧化还原酶基序中的至少一个X为选自包含以下的组的碱性氨基酸：K、H、R或非天然碱性氨基酸。


13.用于获得抗原特异性NKT细胞群的方法，所述方法包括以下步骤：
-提供外周血细胞，
-使所述细胞与免疫原性肽接触，以及
-在存在IL-2的情况下扩增所述细胞，
所述免疫原性肽包含：
a)氧化还原酶基序，
b)抗原蛋白质的T细胞表位，
c)在a)与b)之间的0至7个氨基酸的...

【专利技术属性】
技术研发人员：米洛斯·埃拉克，
申请(专利权)人：易姆赛斯股份公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE