通过抑制肠道损伤性细菌毒素TcdA和TcdB预防来自艰难梭菌感染的组织损伤的活性剂制造技术

提供了用于治疗或预防与艰难梭菌感染相关的疾病和病症的方法。该方法有效地抑制细菌病原体诱导的UDP

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过抑制肠道损伤性细菌毒素TcdA和TcdB预防来自艰难梭菌感染的组织损伤的活性剂
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2020年5月6日提交的美国临时专利申请No.63/020,789和于2020年6月24日提交的美国临时专利申请No.63/043,495的权益，其内容通过引用并入本文。
[0003]关于联邦政府资助的R&D的声明
[0004]本要求保护的专利技术使用政府的资助在由国立卫生研究院(National Institute of Health)授予的Grant No.GM041916下完成。政府对本专利技术享有一定的权利。


[0005]本文公开了治疗和预防与艰难梭菌(Clostridium difficile)感染有关的疾病和病症的新方法。
[0006]背景
[0007]艰难梭菌(C.difficile)感染是由人结肠感染艰难梭菌引起的严重疾病。感染主要由以下原因引起：(i)广谱抗生素疗法破坏肠道微生物组；和(ii)不能在患者中产生中和抗毒素抗体。艰难梭菌细菌产生两种主要毒素(即毒素A和毒素B)，其使上皮细胞内的GTP酶葡萄糖基化，并导致发热、腹痛、腹泻和结肠炎症。
[0008]TcdA和TcdB分别为308kDa和270kDa的共有49％序列同一性的多结构域蛋白毒素。TcdA和TcdB通过C
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末端受体结合结构域与靶细胞结合，通过网格蛋白介导的胞吞作用触发摄入。内涵体的酸化导致pH依赖性构象改变，导致跨膜孔的形成和随后将N
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末端自动加工半胱氨酸蛋白酶结构域(CPD)和葡糖基转移酶结构域(GTD)递送入胞质溶胶中。CPD被胞内肌醇六磷酸以变构方式活化，从而催化GTD释放入胞质溶胶中。在那里，使用UDP
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葡萄糖作为葡糖基供体，GTD使Rho GTP酶糖基化并失活，包括在开关I效应子区域中在Thr35处的Rac1和Cdc42和在Thr37处的RhoA。Tcd毒素对Rho GTP酶的失活导致肌动蛋白解聚，从而导致细胞结构完整性的丧失，并最终通过胱天蛋白酶
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3和胱天蛋白酶
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9依赖性途径导致细胞死亡。尽管两种毒素表现出相同的细胞毒性机制，但已经显示TcdB在其诱导细胞变圆和细胞死亡的能力方面比TcdA更强效。用于研究艰难梭菌的TcdA
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TcdB
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、TcdA
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TcdB
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和TcdA
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TcdB
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菌株的毒力的多项研究表明，TcdA
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TcdB
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菌株的毒力低于TcdA
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TcdB
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和TcdA
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TcdB
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菌株。仓鼠模型中的研究表明，TcdA
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TcdB
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菌株具有几乎与TcdA
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TcdB
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和TcdA
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TcdB
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菌株一样的毒力。尽管物种敏感性存在差异，但这些研究的总和表明TcdA和TcdB均为艰难梭菌发病机理的主要决定因素。
[0009]与细菌感染有关的疾病的常规治疗集中于使用几种不同的抗生素。这些抗生素包括：(i)万古霉素(1986年FDA批准)；(ii)甲硝唑(未经FDA批准，但“标签外”使用)；和(iii)非达米星(FDA于2011年批准)，即与万古霉素或甲硝唑相比更窄谱的抗生素。近来，有报道表明新的艰难梭菌菌株的出现，其表现出增加的毒素产生和抗生素抗性。治疗细菌感染的替代方法涉及使用抗毒素抗体。使用细菌毒素作为疫苗的主动免疫接种目前处于临床试验中。需要开发治疗或预防细菌相关疾病的新方法。
[0010]概述
[0011]本专利文献公开了亚胺糖对由细菌病原体例如艰难梭菌产生的毒力因子的抑制活性。基于该发现的用于治疗与细菌病原体相关的疾病的治疗方法是抗生素方案的有吸引力的选项，因为人类微生物群被保留，同时对宿主组织的损伤被最小化。
[0012]本文件的一个方面提供了一种治疗患有与艰难梭菌相关的疾病或病症的个体的方法，包括向个体施用治疗有效量的式I的亚胺糖或其药学上可接受的盐，其包括例如异法戈明、诺欧霉素或其组合。
[0013][0014]其中
[0015]R1选自H、直链C1‑6烷基、被羟基取代的C2‑6直链烷基、苄基和苯基；
[0016]R2为OH或H；
[0017]代表键；并且R2所连接的碳具有R或S立体化学。
[0018]在一些实施方式中，亚胺糖是异法戈明或其药学上可接受的盐，其中异法戈明或其药学上可接受的盐抑制艰难梭菌毒素干扰Ras相关的GTP结合蛋白的活性。在一些实施方案中，GTP结合蛋白选自Rho、Rac和Cdc42。
[0019]在一些实施方案中，所述活性剂抑制从艰难梭菌释放的毒素的UDP
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葡萄糖水解和/或GTP
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结合蛋白葡糖基转移酶活性。在一些实施方案中，毒素为TcdA或TcdB。
[0020]在一些实施方案中，所述疾病选自肠道炎症、腹泻、异常体重减轻、结肠炎和中毒性巨结肠。在一些实施方案中，所述个体为人。在一些实施方案中，该方法还包含另外向个体施用抗生素。
[0021]在一些实施方案中，化合物为异法戈明，其可以是酒石酸盐的形式。在一些实施方案中，通过口服施用异法戈明。
[0022]本文件的另一个方面提供了一种在个体中预防艰难梭菌诱导的疾病或病症的方法，包括向暴露于艰难梭菌的个体施用有效量的式I的亚胺糖，其包括例如异法戈明、诺欧霉素或其组合。在一些实施方案中，个体暴露于艰难梭菌或存在暴露于艰难梭菌的风险中，并且没有经历疾病或病症的任何症状。在一些实施方案中，该方法包括在疾病或病症的任何症状之前向个体施用式I的化合物或其药学上可接受的盐以预防胃肠损伤。
[0023]在一些实施方案中，艰难梭菌为艰难梭菌的营养形式、艰难梭菌孢子或两者的混合物。
[0024]在一些实施方案中，化合物为异法戈明或其药学上可接受的盐，其能够抑制从艰难梭菌释放的毒素的UDP
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葡萄糖水解和/或GTP
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结合蛋白葡糖基转移酶活性。在一些实施方案中，所述毒素为TcdA或TcdB。在一些实施方案中，所述个体为人。
[0025]另一个方面提供了一种抑制细菌产生的毒素诱导的UDP
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葡萄糖水解和/或抑制GTP
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结合蛋白质葡萄糖基转移酶活性的方法，包括使所述毒素接触有效量的式I的亚胺糖，其包括例如异法戈明、诺欧霉素或其组合。
[0026]在一些实施方案中，所述细菌为艰难梭菌。在一些实施方案中，所述毒素为TcdA或
TcdB。该方法还包括使细菌与抗生素药物接触。
[0027]另一个方面提供了用于治疗与由细菌产生的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.治疗或预防与艰难梭菌相关的疾病或病症的方法，包括向有此需要的个体施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐，其中式I表示为：其中R1选自H、苄基、苯基、直链C1‑6烷基和被羟基取代的C2‑6直链烷基；R2为OH或H。2.权利要求1的方法，其中R1为H，且R2为H。3.权利要求1的方法，其中所述化合物为酒石酸盐形式的异法戈明。4.权利要求1的方法，其中所述化合物式诺欧霉素。5.权利要求1
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4任一项的方法，其中所述化合物或其药学上可接受的盐抑制艰难梭菌干扰选自Rho、Rac和Cdc42的Ras
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相关GTP
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结合蛋白的活性。6.权利要求1
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5任一项的方法，其中所述化合物或其药学上可接受的盐抑制从艰难梭菌释放的毒素的UDP
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葡萄糖水解活性和/或GTP
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结合蛋白葡糖基转移酶活性。7.权利要求6的方法，其中所述毒素为TcdA或TcdB。8.权利要求1
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7任一项的方法，还包括向个体施用抗生素。9.权利要求1
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8任一项的方法，其中所述疾病或病症选自肠道炎症、腹泻、异常体重减轻、结肠炎、中毒性巨结肠、腹痛、发热、食欲不振、细胞毒性巨结肠、艰难梭菌定殖、胃肠道损伤、胃肠道中的组织病理学变化、艰难梭菌孢子的排泄物脱落和艰难梭菌相关死亡率。10.权利要求1
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9任一项的方法，其中所述个体暴露于艰难梭菌或具有暴露于艰难梭菌的风险中，并且未经历所述疾病或病症的任何症状。11.权利要求1
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10任一项的方法，包含在所述疾病或病症的任何症状之前向所述个体施用式I的化合物或其药学上可接受的盐以预防胃肠道损伤。12.权利要求1
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10任一项的方法，包括向所述个体施用式I的化合物或其药学上可接受的盐，以预防所述疾病或病症的复发或艰难梭菌的再感染，或降低复发或再感染的频率。13.权利要求1
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12任一项的方法，其中所述个体为人。14.权利要求1
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13任一项的方法，其中所述艰难梭菌为艰难梭菌的营养型形式、艰...

【专利技术属性】
技术研发人员：V，
申请(专利权)人：维多利亚林克有限公司，
类型：发明
国别省市：