一种抗马尔尼菲甘露聚糖蛋白杂交瘤细胞株及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种抗马尔尼菲甘露聚糖蛋白杂交瘤细胞株及其应用，所述的杂交瘤细胞株包括抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81与抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51，均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81的保藏号为CGMCC No.45178，抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51的保藏号为CGMCC No.45179。本发明专利技术所述的杂交瘤抗Mp1p单克隆抗体效价可达1:5.12

【技术实现步骤摘要】
一种抗马尔尼菲甘露聚糖蛋白杂交瘤细胞株及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，尤其是涉及一种抗马尔尼菲甘露聚糖蛋白杂交瘤细胞株及其应用。

技术介绍

[0002]马尔尼菲篮状菌（Talaromyces marneffei）是一种双相青霉菌，30℃时为菌丝态，37℃为酵母态，酵母态为致病形态。马尔尼菲篮状菌病是由马尔尼菲篮状菌感染引起的一种深部真菌病，多见于免疫缺陷或免疫功能抑制者，主要流行于东南亚国家及我国南方地区，是HIV感染者最常见的一种侵袭性真菌病。马尔尼菲篮状菌侵入人体后，首先被单核
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巨噬细胞吞噬并在巨噬细胞内增殖，并通过网状内皮系统播散。近年来，随着糖皮质激素和免疫抑制剂的广泛应用、器官移植、艾滋病等所导致的免疫缺陷宿主不断增多，马尔尼菲篮状菌病也日渐增多。马尔尼菲篮状菌病没有特异性临床症状和体征，误诊率较高，且病情凶险，如果得不到早期的诊断，往往会错过治疗的最佳时机。
[0003]马尔尼菲篮状菌传统的检测方法主要是痰或者血液培养，培养阳性可以作为诊断依据。但是该方法操作步骤繁琐且培养时间较长，需数天才能得到实验结果。常见的诊断方法还有实时荧光定量PCR，该方法灵敏度高，但是专业性强，操作较为复杂。血清学荧光免疫层析检测方法在临床上也是常见的，该方法应用范围广，检测速度快，操作简便。Mp1p是存在于马尔尼菲篮状菌细胞壁的一种高度抗原性甘露聚糖蛋白，可在感染患者中引起抗体反应。荧光免疫层析间接法可检测Mp1p抗体，夹心法可检测Mp1p抗原，并且同时检测Mp1p的抗体和抗原可大大提高检测的灵敏度和特异性。
[0004]荧光免疫层析试剂盒具备操作快速、检测时间短、灵敏度高、准确性好等优点，但荧光免疫层析试剂盒在研发生产过程中受到的影响因素较多，如膜材的加热烘干、环境温湿度、缓冲液pH值等，而实现荧光免疫层析检测Mp1p的关键是具备高特异性且稳定性好的抗Mp1p抗体。
[0005]为解决上述问题，本专利技术提供了一种的抗Mp1p的杂交瘤细胞株，制备的单克隆抗体具有高敏感性、高特异性、高效价、稳定性好等优点，可用于免疫诊断试剂的开发。

技术实现思路

[0006]为解决上述问题，本专利技术提供了一种抗Mp1p的杂交瘤细胞株，制备的单克隆抗体具有高敏感性、高特异性、高效价等优点，可用于免疫诊断试剂的开发。
[0007]为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：抗马尔尼菲甘露聚糖蛋白杂交瘤细胞株，包括抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81与抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51，均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81的保藏号为CGMCC No.45178，抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51的保藏号为CGMCC No.45179。抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81的分类命名为杂交瘤细胞株，保藏号为CGMCC No.45178，保藏日期为2022年06月02日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员
会普通微生物中心（CGMCC），保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51的分类命名为杂交瘤细胞株，保藏号为CGMCC No.45179，保藏日期为2022年06月02日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
[0008]抗Mp1p单克隆抗体，所述的抗Mp1p单克隆抗体由抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81和/或抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51分泌得到。
[0009]所述的抗Mp1p单克隆抗体的应用，所述的抗Mp1p单克隆抗体在制备马尔尼菲篮状菌抗原的检测产品中的应用。
[0010]进一步，所述的抗Mp1p单克隆抗体在制备马尔尼菲甘露聚糖蛋白的检测产品中的应用。
[0011]进一步，所述的抗Mp1p单克隆抗体在制备马尔尼菲甘露聚糖蛋白体外诊断试剂盒中的应用。
[0012]进一步，所述的体外诊断试剂盒为胶体金免疫试剂盒、化学发光试剂盒、放射免疫试剂盒、酶联免疫试剂盒、微流体芯片试剂盒或荧光免疫试剂盒中的至少一种。
[0013]一种马尔尼菲篮状菌抗原的检测产品，所述的检测产品含有所述的抗Mp1p单克隆抗体。
[0014]进一步，所述的检测产品为试剂、试剂条或试剂盒中的至少一种。
[0015]一种马尔尼菲篮状菌抗原检测试剂盒，所述的试剂盒含有所述的抗Mp1p单克隆抗体。
[0016]进一步，所述的试剂盒以保藏号为CGMCC No.45178的抗Mp1p杂交瘤细胞株分泌得到的抗Mp1p单克隆抗体作为包被抗体，以保藏号为CGMCC No.45179的抗Mp1p杂交瘤细胞株分泌得到的抗Mp1p单克隆抗体作为标记抗体或以保藏号为CGMCC No.45178的抗Mp1p杂交瘤细胞株分泌得到的抗Mp1p单克隆抗体作为标记抗体，以保藏号为CGMCC No.45179的抗Mp1p杂交瘤细胞株分泌得到的抗Mp1p单克隆抗体作为包被抗体。
[0017]相对于现有技术，本专利技术具有以下优势：本专利技术所述的杂交瘤抗Mp1p单克隆抗体效价可达1:5.12
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105，与马尔尼菲甘露聚糖蛋白结合能力强，特异性高，可用于体外诊断试剂的开发，制得的荧光免疫试剂盒灵敏度高，抗干扰能力强，样本可不经预处理直接加样检测，操作更简便，检测时间更短。
附图说明
[0018]图1为本专利技术实施例1所述的抗Mp1p单克隆抗体的电泳图。
[0019]本专利技术提供了抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81，抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81的分类命名为杂交瘤细胞株，保藏号为CGMCC No.45178，保藏日期为2022年06月02日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；本专利技术提供了抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51，抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51的分类命名为杂交瘤细胞株，保藏号为CGMCC No.45179，保藏日期为2022年06月02日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
具体实施方式
[0020]除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本专利技术所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0021]下面结合实施例来详细说明本专利技术。
[0022]实施例1抗Mp1p单克隆抗体制备采用我司在申请号为202210090101.7的专利中制备得到的马尔尼菲篮状菌甘露聚糖蛋白进行抗Mp1p单克隆抗体的制备。
[0023]用纯化的马尔尼菲篮状菌甘露聚糖蛋白免疫6周龄雌性Balb/c小鼠，进行抗体制备，共免疫5只小鼠，按表1的免疫方式进行免疫。免疫完成后断尾取血测定效价，选择结果最佳的小鼠进行融合。摘取融合小鼠眼球，放血，将血清作为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗马尔尼菲甘露聚糖蛋白杂交瘤细胞株，其特征在于：包括抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81与抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51，均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81的保藏号为CGMCC No.45178，抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51的保藏号为CGMCC No.45179。2.抗Mp1p单克隆抗体，其特征在于：所述的抗Mp1p单克隆抗体由抗Mp1p杂交瘤细胞株12A81和/或抗Mp1p杂交瘤细胞株13B51分泌得到。3.权利要求2所述的抗Mp1p单克隆抗体的应用，其特征在于：所述的抗Mp1p单克隆抗体在制备马尔尼菲篮状菌抗原的检测产品中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的抗Mp1p单克隆抗体在制备马尔尼菲甘露聚糖蛋白的检测产品中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的抗Mp1p单克隆抗体在制备马尔尼菲甘露聚糖蛋白体外诊断试剂盒中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的体外诊断试剂盒为胶体金免疫试剂盒、化学发光试剂盒...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨光，于迪，彭洁，严俊，粟艳，周泽奇，
申请(专利权)人：丹娜天津生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：