一种多糖得率高的杜仲叶提取方法及其应用技术

本发明专利技术涉及中药提取技术领域，公开了一种多糖得率高的杜仲叶提取方法及其应用，包括以下步骤：1)将干杜仲叶粉碎过筛，加入胆碱水杨酸离子液体溶液中浸泡得到浸泡液；2)对1)的制得的浸泡液超声，离心，取上清液，加入饱和柠檬酸钾溶液，静置至分层，取上层液稀释，冰箱冷藏过夜，二次离心，收集沉淀并用乙醇洗涤；3)用水溶解2)制备的沉淀，透析得到透析滞留液；4)将3)制备的透析滞留液通过减压蒸馏浓缩，加入乙醇沉淀出多糖，真空干燥。本发明专利技术通过超声释放多糖，并用胆碱水杨酸离子液体溶液配合透析提升多糖纯度，多糖得率为2.28％～4.11％，多糖纯度为45.16％～59.46％。纯度为45.16％～59.46％。

【技术实现步骤摘要】
一种多糖得率高的杜仲叶提取方法及其应用


[0001]本专利技术涉及中药提取
，尤其涉及一种多糖得率高的杜仲叶提取方法及其应用。

技术介绍

[0002]多糖是一种广泛存在的生物大分子，由相同或不同的单糖和糖醛酸通过糖苷键凝聚而成，是所有生物的基本成分。多糖广泛分布于植物、动物和真菌中，不仅用于储存能量，而且也是作为生命活动的重要因素，与生命的许多生理行为密切相关；含有丰富多糖的杜仲叶提取物由于其抗氧化活性和免疫调节作用，近年来作为一种药物成分被广泛研究；传统的多糖提取分离方法主要采用热水技术和碱液提法，但前者提取时间较长，效率较低、能耗较高，温度过高还会引起生物活性的降低，后者在pH较高的条件下使多糖降解，同时还会降低产品品质，比如色泽加深等；因此，探索一种能耗低、时间短、工艺简单、生物兼容性好的杜仲叶多糖提取分离方法对杜仲叶资源的增值利用尤为重要。
[0003]中国现有专利CN107970270A公开了一种从杜仲叶中分步提取总黄酮和多糖的方法，将杜仲叶干燥、粉碎、过筛，以乙醇水溶液为溶剂，磁力搅拌、加热回流或微波加热提取总黄酮，采用离心或抽滤进行液
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固分离，得到杜仲叶一次固体残渣和总黄酮初提液；取干燥后的杜仲叶一次固体残渣，以水为溶剂，预浸泡后，采用超声波或微波方式提取多糖，将提取液离心或抽滤进行液
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固分离，得到杜仲叶二次固体残渣和多糖上清液；二次固体残渣用来做饲料或肥料；所得多糖纯度2.01％，得率0.07％，多糖还可以进一步提纯并且得率进一步提高。
专利
技术实现思路

[0004]根据现有技术从杜仲叶中提取多糖的工艺经过改良后还能进一步提升得率的情况，本专利技术提供一种多糖得率高的杜仲叶提取方法，提取出来的多糖得率高达3.93％，相较现有技术翻倍；本专利技术还提供一种由多糖得率高的杜仲叶提取方法提取的杜仲叶提取物，具有多糖纯度高、得率高的优点；本专利技术还提供一种由多糖得率高的杜仲叶提取方法提取的杜仲叶提取物制备的食品、保健品、药品和饲料中的一种，所含多糖含量高，效果好。
[0005]本专利技术以以下技术方案实现：
[0006]一种多糖得率高的杜仲叶提取方法，包括以下步骤：
[0007]步骤1)将干杜仲叶粉碎过筛，加入胆碱水杨酸离子液体溶液中浸泡得到浸泡液；
[0008]步骤2)对步骤1)的制得的浸泡液超声，离心，取上清液，加入饱和柠檬酸钾溶液，静置至分层，取上层液稀释，冰箱冷藏过夜，二次离心，收集沉淀并用乙醇洗涤；
[0009]步骤3)用水溶解步骤2)制备的沉淀，透析得到透析滞留液；
[0010]步骤4)将步骤3)制备的透析滞留液通过减压蒸馏浓缩得到浓缩液，加入乙醇沉淀出多糖，真空干燥。
[0011]超声辅助胆碱水杨酸离子液体溶液提取是超声波在液体溶剂中的空化效应、机械
效应和热效应可以加速扩散并增强传质，能将已粉碎的干杜仲叶进一步破碎释放多糖，同时胆碱水杨酸离子液体溶液作为一种新型溶剂具有挥发性低、高溶剂化的特点，对细胞壁中的木质素、纤维素都有一定的溶解能力，因此可以促进活性物质的溶出，同时又因酸性较弱，不易与多糖反应；胆碱水杨酸离子液体溶液
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柠檬酸鉀盐双水相体系具有分相迅速、操作简便，体系绿色、具有很好的生物兼容性，因此能很好地保持多糖产品的抗氧化活性，且分离后的离子液体溶液和盐溶液都可以重复使用；透析纯化技术通过半透膜的孔径大小截留大分子、去除小分子杂质而达到纯化多糖的目的，透析袋可以重复使用，绿色环保。
[0012]优选的，所述步骤1)中干杜仲叶粉碎后过80～150目筛；胆碱水杨酸离子液体溶液的质量浓度为40％。
[0013]优选的，所述干杜仲叶与胆碱水杨酸离子液体溶液的固液比为 1g:10～30mL，浸泡时间为45min～1.5h。
[0014]优选的，所述步骤2)中超声带有恒温循环控制仪，超声功率为 200～600W，时间为30～120min，温度设为30
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60℃；离心时间为 8～15min，速度为4000rpm。
[0015]优选的，步骤2)中所述上清液与饱和柠檬酸鉀溶液的体积比为 1:1～3，静置时间为3～4h；上层液浓度稀释一倍，冷藏温度为4℃。
[0016]优选的所述二次离心时间为18～25min，速度为12000rpm；沉淀洗涤2～3次。
[0017]优选的，所述步骤3)中的透析所用的透析袋的截留分子量为 8000～12000。
[0018]优选的，所述步骤4)中所述透析滞留液浓缩后的体积为未浓缩时的10～15％。
[0019]优选的，所述乙醇体积为所述浓缩液的2.5～3.5倍；真空干燥温度为45～55℃，时间为2d。
[0020]一种由上述提取方法制备的杜仲叶提取物。
[0021]一种由上述提取方法制备的杜仲叶提取物制备的食品、保健品、药品和饲料中的一种。
[0022]从杜仲叶中提取的多糖有较好的提升免疫力，护肝护肾的作用，并能有效抵抗氧自由基，有一定的抗衰老作用，因而做成食品、保健品、药品或动物饲料，对人和动物的基础身体素质有促进作用。
[0023]本专利技术的有益效果：
[0024](1)利用超声辅助胆碱水杨酸离子液体溶液从杜仲叶中提取多糖，降低提取温度至30
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60℃，保持了多糖的抗氧化活性；单次提取时间缩短为60～90min，单次提取多糖得率在3％
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5％，大大改善了提取效率。
[0025](2)以胆碱水杨酸离子液体溶液
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柠檬酸鉀盐双水相体系分离多糖，多糖大部分分配在上层液中，用水作为抗溶剂稀释后的上层液借助降温和高速离心沉淀出多糖；胆碱水杨酸离子液体溶液
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柠檬酸鉀盐双水相体系比较温和、选择性强，分相迅速，操作简便，分离出的粗多糖纯度和抗氧化活性能稳定保持在较高的程度。
[0026](3)透析袋纯化技术通过半透膜的孔径大小截留大分子、去除小分子杂质而达到纯化多糖的目的，因此本专利技术方法最后得到的杜仲叶提取物中的多糖有较高的纯度。
[0027](4)本专利技术方法对工艺设备及操作环境无过严要求，工艺相对简单，投资成本相对较低。
具体实施方式
[0028]下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术的部分实施例，而不是全部。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0029]实施例1
[0030]一种多糖得率高的杜仲叶提取方法，包括以下步骤：
[0031]步骤1)将干杜仲叶粉碎过100目筛，取10g加入质量浓度为40％的胆碱水杨酸离子液体溶液中浸泡1h得到浸泡液，干杜仲叶与胆碱水杨酸离子液本溶液的固液比为1g:15mL；
[0032]步骤2)对步骤1)的制得的浸泡液超声，超声功率为200W，时间为90min，温度设为5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多糖得率高的杜仲叶提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)将干杜仲叶粉碎过筛，加入胆碱水杨酸离子液体溶液中浸泡得到浸泡液；步骤2)对步骤1)的制得的浸泡液超声，离心，取上清液，加入饱和柠檬酸钾溶液，静置至分层，取上层液稀释，冰箱冷藏过夜，二次离心，收集沉淀并用乙醇洗涤；步骤3)用水溶解步骤2)制备的沉淀，透析得到透析滞留液；步骤4)将步骤3)制备的透析滞留液通过减压蒸馏浓缩得到浓缩液，加入乙醇沉淀出多糖，真空干燥。2.根据权利要求1所述的一种多糖得率高的杜仲叶提取方法，其特征在于，所述步骤1)中干杜仲叶粉碎后过80～150目筛；胆碱水杨酸离子液体溶液的质量浓度为40％。3.根据权利要求1所述的一种多糖得率高的杜仲叶提取方法，其特征在于，步骤1)中所述干杜仲叶与胆碱水杨酸离子液体溶液的固液比为1g:10～30mL，浸泡时间为45min～1.5h。4.根据权利要求1所述的一种多糖得率高的杜仲叶提取方法，其特征在于，所述步骤2)中超声带有恒温循环控制仪，超声功率为200～600W，时间为30～120min，温度设为3...

【专利技术属性】
技术研发人员：王润平，徐新玉，刘应会，吴娇，郑拉，
申请(专利权)人：黔南民族师范学院，
类型：发明
国别省市：