一种植物外泌体、制备方法及在抗皮肤老化产品中的应用技术

本发明专利技术属于植物提取领域，具体涉及一种植物外泌体、制备方法及在抗皮肤老化产品的应用。本发明专利技术的产品其制备工艺如下：将具有抗老化功效的植物原料分别清洗破碎后，加入复合酶酶解处理，获得酶解液；将酶解液在0～4℃下一次低温固液分离后取上清，再在4～10℃下二次低温固液分离取上清，然后加入外泌体络合剂，过夜孵育后，在2～10℃下三次低温固液分离后真空冷冻干燥制得植物外泌体粉剂。本发明专利技术所制备不同植物外泌体能够有效抑制由紫外引起的成纤维细胞存活率下降，使人的皮肤年轻化，并通过植物外泌体的转化应用研究挖掘了其在抗皮肤老化领域的开发潜力。皮肤老化领域的开发潜力。皮肤老化领域的开发潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种植物外泌体、制备方法及在抗皮肤老化产品中的应用


[0001]本专利技术属于植物提取领域，具体涉及一种植物外泌体、制备方法及其在抗皮肤老化产品中的应用。

技术介绍

[0002]随着年龄的增长，我们的皮肤的胶原蛋白和弹性蛋白水平会逐渐流失，导致皮肤下垂、皱纹加深，导致“眼袋”形成。因此在日常生活中要时常保持皮肤的干净、清洁，还可以使用较好的去皱产品。
[0003]部分植物外泌体具有抗皮肤衰老的作用，能够促进细胞新生和胶原合成、修复细胞和组织老化损伤、降低皮肤基质降解并维持皮肤紧实弹性等。当外泌体将信息传递到受体细胞的时候，受体细胞就会接收这些信息并按照要求快速地行动起来，从而实现我们对受体细胞的调节和改善，能够减缓衰老。
[0004]关于植物外泌体的抗老化功效，以下文献进行过相关披露：
[0005]CN 108686052A公开了一种调节内分泌的抗衰老生物制剂、制备方法及其应用。上述的专利文献中披露，其能够改善内分泌系统、抗老消斑，改善皮肤黄、黑、松弛状态，淡化黑色素。
[0006]但该文献中的技术方案存在以下不足：文献中使用的是传统的酶解醇提提取方法，然后再对提取物进行微生物发酵，通过这种方法得到的植物提取物，其活性成分一般为蛋白质、糖类、萜类、黄酮、生物碱、甾体等。但是发挥作用的小RNA等遗传物质通过上述方法是无法得到的。

技术实现思路

[0007]为了解决上述的技术问题，本专利技术提供了一种植物外泌体及其在抗皮肤老化方面的应用。通过所制备的植物外泌体处理人皮肤成纤维细胞，可获得具有年轻化特征的人皮肤成纤维细胞。
[0008]本申请中，所获得的植物外泌体中不仅包含多肽类、脂质、小分子代谢物，更主要的含有小RNA等遗传物质，这是上述文献所不具备的。同时本专利技术提取的植物外泌体，活性物质被包裹在双层脂质囊泡中，更有利于活性物质被机体所吸收而发挥作用，这也是
技术介绍
中所提到的技术方案不具备的优势。
[0009]本专利技术的技术方案如下：
[0010]本专利技术所提供的植物外泌体是将植物原料通过酶解后加入外泌体络合剂孵育后获得的，所述的植物外泌体的植物原料为何首乌、黄芪、人参、三七、剌五加、灵芝、枸杞子、红景天、绞股蓝、葛根、葡萄、桑葚、麦冬中的至少一种。
[0011]其中，优选植物原料为何首乌、枸杞子、麦冬、刺五加，其具体重量份为：何首乌10～40份，枸杞子5～20份，麦冬5～20份，刺五加1～10份。
[0012]何首乌，具有补益精血、解毒的功效；主治精血亏虚，头晕眼花，须发早白；
[0013]黄芪有着补气固表，生肌利尿的作用，三七有较好的祛瘀止血的作用，这二味药都有着改善血管循环的作用；
[0014]人参，大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津安神，治一切气血津液不足之症；
[0015]剌五加，具有增强免疫能力的作用，同时还能够抗疲劳、耐缺氧、抗高低温、抗放射、抗应激；
[0016]灵芝，具有免疫调节、降血糖、降血脂、抗氧化、抗衰老及抗肿瘤作用；三萜类化合物能净化血液，保护肝功能；
[0017]枸杞子，具有增强免疫的作用，枸杞中含有枸杞多糖，可以帮助增强机体免疫细胞的活性，提高免疫力；
[0018]红景天，有较强的抗氧化物质，能有效清除自由基，延缓大脑皮质老化，对皮肤也有抗老化作用；
[0019]绞股蓝，有保肝护肝、降血压、降血脂血糖以及安神助眠的功效；
[0020]葛根，甘、辛，凉；有解肌退热，透疹，生津止渴，升阳止泻之功；常用于表证发热，项背强痛，麻疹不透，热病口渴，阴虚消渴，热泻热痢，脾虚泄泻；
[0021]葡萄中含有矿物质钙、钾、磷、铁、蛋白质以及多种维生素B1、B2、B6、C和P等，还含有多种人体所需的氨基酸，对疲劳过度大有裨益；
[0022]桑葚中含有芸香苷、花青素、葡萄糖、果糖、苹果酸、钙质、无机盐、胡萝卜素、多种维生素及烟酸等成分，营养价值高；同时还能够补血清血，促进造血细胞生长；
[0023]麦冬，具有抗疲劳、清除自由基、提高细胞免疫功能以及降血糖的作用，还具有镇静、催眠等作用。
[0024]本专利技术所述的一种植物外泌体是通过如下的制备方法获得的：
[0025](1)将植物原料依次进行清洗、干燥粉碎、打浆，获得匀浆液；
[0026](2)在(1)获得的匀浆液中加入复合酶，并调节pH进行酶解处理，获得酶解液；
[0027](3)将获得的酶解液进行一次固液分离，获得一次分离上清；
[0028](4)将获得的一次分离上清进行二次低温固液分离，获得二次分离上清；
[0029](5)向获得的二次分离上清中加入外泌体络合剂过夜孵育，然后固液分离，分别获得三次分离上清和沉淀；
[0030](6)将(5)中获得的沉淀进行干燥，获得植物外泌体粉剂。
[0031]优选的，(1)中所述的干燥为：在40～60℃下低温干燥；粉碎至80～120目；粉碎后加入3～5倍体积的蒸馏水，用组织匀浆机打浆处理10～30min。
[0032]优选的，(2)中加入占(1)中粉末重量0.1～0.5％的复合酶，复合酶为淀粉酶、麦芽糖酶和酸性纤维素酶、酸性果胶酶、碱性纤维素酶、碱性果胶酶中的至少一种，调节pH至5.5～6.0，酶解处理0.5～3h。
[0033]优选的，(3)中的固液分离为低温固液分离，分离温度0～4℃；分离方法：离心或膜过滤；离心条件：离心力1000～5000g，时间5～40min；膜过滤孔径为50～100目。
[0034]优选的，(4)中，将(3)获得的一次分离上清进行二次低温固液分离，分离温度为4～10℃；分离方法为离心或膜过滤；离心条件：离心力8000～20000g，离心时间20～120min；膜过滤孔径为120～400目。
[0035]优选的，(5)中外泌体络合剂为：按重量份计，聚乙烯醇(2％)、聚丙烯酰胺(2％)、
聚丙烯酸(4％)、聚乙二醇(8％)、明胶(1％)、聚谷氨酸(5％)、聚合硫酸铁(1％)、聚合氯化铝(2％)中的至少一种；过夜孵育温度4℃；分离温度2～10℃；固液分离方式为离心或膜过滤；离心条件：离心力8000～20000g，离心时间20～120min；膜过滤孔径为120～400目。
[0036]优选的，(6)中采用真空冷冻干燥。
[0037]优选的，本专利技术的植物外泌体可以应用于抗皮肤老化产品/制备抗皮肤老化产品。
[0038]优选的，植物外泌体在抗皮肤老化产品/制备抗皮肤老化产品中的应用，所述的植物外泌体是通过如下的制备方法获得的：
[0039](1)将植物原料清洗、干燥、粉碎、打浆，获得匀浆液；所述的植物原料为何首乌、黄芪、人参、三七、剌五加、灵芝、枸杞子、红景天、绞股蓝、葛根、葡萄、桑葚、麦冬中的至少一种；
[0040](2)在(1)获得的匀浆液中加入复合酶，并调节pH进行酶解处理，获得酶解液；
[0041](3)将获得的酶解液进行本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物外泌体，其特征在于，是将植物原料通过酶解后加入外泌体络合剂孵育后获得的，所述的植物原料为：何首乌、黄芪、人参、三七、剌五加、灵芝、枸杞子、红景天、绞股蓝、葛根、葡萄、桑葚、麦冬中的至少一种。2.如权利要求1所述的一种植物外泌体，其特征在于，所述的植物原料为：按重量份计，首乌10～40份，枸杞子5～20份，麦冬5～20份，刺五加1～10份。3.如权利要求1所述的一种植物外泌体，其特征在于，所述外泌体络合剂为：按质量百分比计，2%聚乙烯醇、2%聚丙烯酰胺、4%聚丙烯酸、8%聚乙二醇、1%明胶、5%聚谷氨酸、1%聚合硫酸铁、2%聚合氯化铝中的至少一种。4.如权利要求1所述的一种植物外泌体，其特征在于，所述的植物外泌体由以下方法制备获得：（1）将植物原料清洗、干燥、粉碎、打浆，获得匀浆液；（2）在（1）获得的匀浆液中加入复合酶，并调节pH进行酶解处理，获得酶解液；（3）将获得的酶解液进行一次固液分离，获得一次分离上清；（4）将获得的一次分离上清进行二次低温固液分离，获得二次分离上清；（5）向获得的二次分离上清中加入外泌体络合剂过夜孵育，然后固液分离，分别获得三次分离上清和沉淀；（6）将（5）中获得的沉淀进行干燥，获得植物外泌体粉剂。5.如权利要求4所述的一种植物外泌体，其特征在于，（1）中，所述的植物原料为：按重量份计，首乌10～40份，枸杞子5～20份，麦冬5～20份，刺五加1～10份；干燥时，在40～60℃下低温干燥；粉碎至80～120目；在粉碎后的粉末中加入其3～5倍体积的蒸馏水，用组织匀浆机打浆处理10～30min。6.如权利要求4所述的一种植物外泌体，其特征在于，（2）中加入占（1）中粉末重量0.1～0.5%的复合酶，复合酶为淀粉酶、麦芽糖酶和酸性纤维素酶、酸性果胶酶、碱性纤维素酶、碱性果胶酶中的至少一种，调节pH至5.5～6.0，酶解处理0.5～3h；（3）中的固液分离时温度为0～4℃；分离方法为：离心或膜过滤；离心条件：离心力1000～5000g，时间5～40min；膜过滤孔径为50～100目；（4）中，将（3）获得的一次分离上清进行二次低温固液分离，分离温度为4～10℃；分离方法为离心或膜过滤；离心条件：离心力8000～20000g，离心...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏乐，赵林，李昆仑，岳秋林，李宝君，赵晨，张松，孙欣，
申请(专利权)人：齐鲁工业大学山东卓苒生物科技有限公司山东筱萤生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：