用于纯化腺相关病毒颗粒或腺病毒的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及用于使用选自烷基二甲基氧化胺的去污剂裂解细胞并分离和/或纯化腺相关病毒颗粒或腺病毒颗粒的组合物和方法。毒颗粒或腺病毒颗粒的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于纯化腺相关病毒颗粒或腺病毒的方法和组合物


[0001]本专利技术涉及用于使用选自烷基二甲基氧化胺的去污剂裂解细胞并因此纯化腺相关病毒颗粒或腺病毒的组合物和方法。

技术介绍

[0002]腺相关病毒(AAV)以及腺病毒(AdV)已经被表征并开发为体外在培养的细胞中递送基因以及体内递送基因的有效病毒载体。AAV同时是用于体内递送基因疗法的主要平台。AdV用于基因疗法以及用作疫苗。AAV是小的无包膜病毒，其含有大约4.7 kb的单链DNA基因组，由两个能够形成T形二级结构并充当基因组复制起点的反向末端重复(ITR)、一个编码四种重叠复制蛋白Rep78、Rep68、Rep52和Rep40的rep区和一个编码三种结构蛋白VP1、VP2和VP3的帽区(cap region)以及装配激活蛋白(AAP)组成。AAV病毒的天然分离的血清型1
‑
9共享基因组结构，尽管这些血清型可能显示不同的组织嗜性。由于AAV似乎是非致病的，显示出有效的转导和稳定的表达，所以它们被认为是最有前途的基因递送载体之一。腺病毒(AdV)是中等大小的无包膜病毒，具有含本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于裂解包封腺相关病毒(AAV)颗粒或腺病毒(AdV)颗粒的细胞的方法，所述方法通过以下步骤进行：使所述细胞的悬浮液与有效量的包含烷基二甲基氧化胺的组合物接触，以促进细胞裂解和所述AAV或AdV颗粒从所述细胞中释放。2.一种用于从包含包封病毒颗粒的细胞的样品中纯化腺相关病毒(AAV)或腺病毒(AdV)的病毒颗粒的方法，所述方法通过以下步骤进行：a)使所述细胞和所述病毒颗粒的悬浮液与有效量的包含烷基二甲基氧化胺的组合物接触，以促进细胞裂解和从所述细胞中释放所述病毒颗粒，b)分离和/或纯化所述病毒颗粒。3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述组合物包含LDAO (月桂基二甲基胺
‑
N
‑
氧化物)和/或TDAO (十四烷基二甲基胺
‑
N
‑
氧化物)和氯化钠。4.根据权利要求2或权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤a)中，使所述细胞与所述组合物接触30至180分钟。5.根据权利要求2至4中一项或多项所述的方法，其特征在于，所述病毒颗粒为重组腺相关病毒(AAV)颗粒。6. 根据权利要求2至5中一项或多项所述的方法，其特征在于，在步骤a)中获得的所述细胞和所述病毒颗粒的悬浮液与有效量的组合物的混合物中烷基二甲基氧化胺的浓度在1%至4% (w/w)之间。7. 根据权利要求2至6中一项或多项所述的方法，其特征在于，在步骤a)中获得的所述细胞和所述病毒颗粒的悬浮液与有效量的组合物的混合物中，包含选自K
+
、Na
+
、Li
+
、Mg
2+
、Ca
2+
的金属阳离子和选自F
‑
、SO
42
‑
、HPO
42
‑
、乙酸根、Cl
‑
的阴离子组分的盐的浓度在0.05...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：默克专利股份公司，
类型：发明
国别省市：