一种用于定量检测污泥群落中功能菌的质粒标准品、构建方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种用于定量检测污泥群落中功能菌的质粒标准品、构建方法及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明专利技术提供了一种用于定量检测污泥群落中功能菌的质粒标准品，所述质粒标准品包括如SEQ ID NO.1所示的外源基因，将外源基因通过TA克隆方法构建得到质粒，所述质粒能够作为标准品定量检测环境样本中硝化杆菌的含量。杆菌的含量。杆菌的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种用于定量检测污泥群落中功能菌的质粒标准品、构建方法及其应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，具体涉及一种用于定量检测污泥群落中功能菌的质粒标准品、构建方法及其应用。

技术介绍

[0002]环境样品中微生物数量众多且成分复杂。污水处理过程中，硝化细菌是生物脱氮过程的主要功能菌群，可将亚硝态氮转化为硝态氮。亚硝酸盐氧化菌(Nitrite
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oxidizing bacteria，NOB)可大致可分为5个类群，硝化杆菌属(Nitrobacter)、硝化刺菌属(Nitrospina)、硝化螺菌属(Nitrospira)、硝化球菌属(Nitrococcus)及最近发现的“Candidatus Nitrotoga”，NOB是利用亚硝氮为氮源，CO2作为主要碳源的革兰氏阴性菌。硝化杆菌属Nitrobacter可将亚硝酸盐氧化为硝酸盐，在自然界中，Nitrobacter属分布广，主要分布在水产养殖、沉积物、海洋及土壤中，其中最常见的是在污水处理厂中，可用Nitrobacter的16SrRNA进行表征。
>[0003]PCR本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于定量检测污泥群落中功能菌的质粒标准品，其特征在于，所述质粒标准品包括如SEQ ID NO.1所示的外源基因。2.根据权利要求1所述的质粒标准品，其特征在于，所述功能菌为硝化杆菌Nitrobacter。3.一种大肠杆菌基因工程菌株，其特征在于，所述大肠杆菌基因工程菌株含有权利要求1所述的质粒标准品。4.权利要求1所述质粒标准品的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括如下步骤：利用引物扩增得到外源基因后将其插入pGM
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T载体即得所述质粒标准品。5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述质粒标准品的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：车鉴，王秀文，张万，李振亚，纪峰，
申请(专利权)人：大连鑫玉龙海洋生物种业科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：