一种丁苯酞及其有关物质检测方法技术

本发明专利技术涉及药物检测分析领域，具体涉及一种丁苯酞及其有关物质的检测方法。本发明专利技术的检测方法采用高效液相色谱法，采用5

【技术实现步骤摘要】
一种丁苯酞及其有关物质检测方法


[0001]本专利技术涉及药物检测分析领域，具体涉及一种丁苯酞及其有关物质的检测方法。

技术介绍

[0002]丁苯酞化学名为3
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丁基
‑
l(H)
‑
异苯并呋喃酮，为消旋
‑3‑
正丁基苯酞，又名芹菜甲素，最早从芹菜籽中被提取发现，其性状为无色或淡黄色的澄清油状液体，有特异香气，在光照和高温条件下容易发生降解。丁苯酞的结构如下：。
[0003]丁苯酞的常见合成工艺主要为如专利CN101962374A所公开的路线：。
[0004]根据丁苯酞的结构性质和主要合成工艺，丁苯酞的有关物质主要分为丁苯酞类似物、降解产物和工艺杂质，其中丁苯酞类似物包括烯基苯酞和烷基苯酞，如烯基苯酞包括甲烯苯酞、乙烯苯酞、丙烯苯酞、丁烯苯酞、戊烯苯酞，烷基苯酞包括苯酞、甲苯酞、乙苯酞、丙苯酞、戊苯酞；降解产物包括羟基丁苯酞、邻戊烯苯甲酸；而工艺杂质包括反应中间体邻戊酰基苯甲酸，以及开环中间体发生副反应的产物，如邻苯二甲酸单丁酯、邻苯二甲酸二丁酯、1,2
‑
二戊酰基苯等。丁苯酞的类似物大部分能够依靠工艺技术除去，而降解杂质和工艺杂质则成为产品质量控制的重点，尤其丁苯酞的主要降解杂质羟基丁苯酞和合成中间体邻戊酰基苯甲酸。目前的现有技术还没有报道有效的具备同时检测上述杂质的检测方法。因此，本领域急需有效检测丁苯酞及其各类杂质的检测方法，以实现产品质量的精准控制。
[0005]丁苯酞的国家药品标准（WS1
>‑
(X
‑
124）
‑
2005Z）记载了一种高效液相色谱法检测有关物质和含量，以甲醇
‑
水(65：35)为流动相，检测波长280nm；但该方法无法有效检测降解杂质。专利CN110108818A的实施例1公开了一种高效液相色谱法同时检测羟基丁苯酞、丁烯苯酞和丙苯酞等多种杂质，但不适合检测工艺杂质如1,2
‑
二戊酰基苯等。文章名称为《反相高效液相色谱法检测丁苯酞原料药中的杂质》（doi：10.16155/j.0254
‑
1793.2020.07.16）中记载了一种反相高效液相色谱法，能同时检测羟基丁苯酞和丙苯酞等杂质，但无法检测烯基苯酞类杂质如丁烯苯酞。
[0006]因此，开发可靠的同时兼顾检测降解杂质、丁苯酞类似物杂质以及工艺中间体等杂质的有关物质检测方法，提高丁苯酞产品的质量研究准确性，提升产品安全可靠性，意义重大。

技术实现思路

[0007]为解决现有技术存在的技术问题，本专利技术提供一种丁苯酞及其有关物质的检测方法。该方法采用液相色谱法，能够同时方便又科学地检测丁苯酞及其降解杂质、丁苯酞类似物杂质和工艺杂质。
[0008]本专利技术提供的丁苯酞及其有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法，以5
‑
氟苯基丙基键合硅胶为填充剂，采用紫外检测器，检测波长210～280nm，以酸性pH值的盐溶液为流动相A，甲醇和乙腈的混合溶液为流动相B，按梯度洗脱。
[0009]进一步地，上述有关物质包含但不限于羟基丁苯酞、丁烯苯酞、邻戊烯苯甲酸、丙苯酞、邻苯二甲酸、邻苯二甲酸单丁酯、邻戊酰基苯甲酸、邻苯二甲酸二丁酯、1,2
‑
二戊酰基苯中的一种或多种。
[0010]进一步地，本专利技术所涉丁苯酞的有关物质代码和结构等信息如下：
。
[0011]进一步地，上述盐溶液的盐包含磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、醋酸铵、醋酸钠或醋酸钾。
[0012]进一步地，上述盐溶液的pH值为1.0～5.0，优选2.0～4.0。
[0013]进一步地，上述盐溶液的pH调节剂包含磷酸、盐酸或乙酸。
[0014]进一步地，上述盐溶液的浓度为1～50mmol/L；优选1～30mmol/L。
[0015]进一步地，上述检测波长为230
±
10nm，优选为230
±
3nm。
[0016]进一步地，上述流动相B中甲醇和乙腈的体积比为1：（0.8～4）。
[0017]进一步地，上述梯度洗脱包含如下程序：。
[0018]优选地，上述梯度洗脱包含如下程序：
。
[0019]进一步地，上述色谱条件的柱温为1～40℃，优选20～40℃。
[0020]进一步地，上述色谱条件的流速为0.5～1.5ml/min，优选1.0ml/min。
[0021]进一步地，上述色谱条件的进样量为5～50μl，优选10～20μl。
[0022]进一步地，上述方法包括如下步骤：（1）精密称取丁苯酞或任选地丁苯酞有关物质适量，用溶剂稀释制成供试品溶液或混合溶液；（2）将供试品溶液或混合溶液注入液相色谱仪中，按照色谱条件检测。
[0023]进一步地，上述溶剂包含甲醇、乙醇、30～60%乙腈水溶液或流动相A与乙腈的体积比为70～40：30～60混合溶液；优选30～60%乙腈水溶液或流动相A与乙腈的体积比为70～40：30～60混合溶液。其中，流动相A的范围同上述色谱条件中流动相A的定义；乙腈水溶液的百分数“%”为体积百分比。
[0024]进一步地，上述供试品的每1ml中含有丁苯酞0.1～10mg；优选0.2～2mg；更优选1mg。
[0025]进一步地，上述混合溶液中，每1ml中含有羟基丁苯酞5～20μg，其它有关物质0.1～10μg；优选每1ml中含有羟基丁苯酞10μg，其它有关物质1μg；有益效果：本专利技术的丁苯酞及其有关物质的检测方法专属性好、灵敏度高，各峰峰型好，杂质峰与主峰以及杂质峰与杂质峰之间的分离度均大于1.5；方法准确度高，重复性和重现性好，精密度高，符合质量分析检测要求，适合用于本品的含量和有关物质的质量研究。
附图说明
[0026]图1：条件1的系统适用性溶液色谱图。
[0027]图2：条件2的系统适用性溶液色谱图。
[0028]图3：条件3的系统适用性溶液色谱图。
具体实施方式
[0029]下面将结合试验例和实施例对本专利技术的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的各例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。各例中未注明的具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用样品、试剂或仪器未注明生产厂商者，均为通过市购获得的本领域常规产品。
[0030]试验例1：丁苯酞有关物质检测方法的方法学考察
⒈
溶液及其配制和计算方法供试品溶液：取本品适量，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成每lml中约含1.0mg的溶液。
[0031]对照溶液：精密量取供试品溶液适量，加溶剂稀释制成每lml中约含1.0μg的溶液。
[0032]对照品溶液：取杂质Z1、Z2、Z3、Z6、M2、M3、M5、M6及M7对照品适量，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成每lml中约含杂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种丁苯酞及其有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法，其特征在于，所述方法采用5
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氟苯基丙基键合硅胶为填充剂，采用紫外检测器，检测波长210nm～280nm，以酸性pH值的盐溶液为流动相A，甲醇和乙腈的混合溶液为流动相B，按梯度洗脱。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述有关物质包含但不限于羟基丁苯酞、丁烯苯酞、邻戊烯苯甲酸、丙苯酞、邻苯二甲酸、邻苯二甲酸单丁酯、邻戊酰基苯甲酸、邻苯二甲酸二丁酯、1,2
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二戊酰基苯中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述盐溶液的盐包含磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、醋酸铵、醋酸钠或醋酸钾。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述盐溶液的浓度为1～50mmol/L。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述盐溶液的pH值为1.0～5.0；所述盐溶液的pH调...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐霞，彭桢利，李连明，文涛，张海，
申请(专利权)人：成都施贝康生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：