一种耻垢分枝杆菌菌液及其制备方法和在制备甾体类药物中间体中的应用技术

本发明专利技术涉及甾体类药物中间体制备技术领域。本发明专利技术提供了一种耻垢分枝杆菌菌液及其制备方法和在制备甾体类药物中间体中的应用，所述耻垢分枝杆菌菌液的制备方法包括如下步骤：(1)将耻垢分枝杆菌接种到预培养基中培育，得到预培养的耻垢分枝杆菌；(2)将预培养的耻垢分枝杆菌接种到液体培养基中培育，得到耻垢分枝杆菌菌液。本发明专利技术制备的耻垢分枝杆菌菌液能够用于甾体类药物中间体的生产，高效催化甾体类药物中间体原料的转化，有效降低生产过程中的污染。的污染。

【技术实现步骤摘要】
一种耻垢分枝杆菌菌液及其制备方法和在制备甾体类药物中间体中的应用


[0001]本专利技术涉及甾体类药物中间体制备
，尤其涉及一种耻垢分枝杆菌菌液及其制备方法和在制备甾体类药物中间体中的应用。

技术介绍

[0002]甾体就是类固醇类物质，通常指这一类的激素：肾上腺皮质激素、雄激素、雌激素，具有一定的抗炎作用。与甾体类药物对应的一般说的是肾上腺皮质激素，各种名字以“松”结尾的药物，具有一定的抗炎作用。非甾体类药物主要是双氯芬酸类还有布洛芬类还有COX2抑制剂。
[0003]甾体类药物使用广泛，但是其生产过程中存在诸多问题，如产出率低、生产过程中污染严重，这些都制约着甾体类药物的发展。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种耻垢分枝杆菌菌液及其制备方法和在制备甾体类药物中间体中的应用，能够高效催化甾体类药物中间体原料的转化，有效降低生产过程中的污染。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种耻垢分枝杆菌菌液的制备方法，包括如下步骤：
[0007](1)将耻垢分枝杆菌接种到预培养基中培育，得到预培养的耻垢分枝杆菌；
[0008](2)将预培养的耻垢分枝杆菌接种到液体培养基中培育，得到耻垢分枝杆菌菌液。
[0009]作为优选，步骤(1)中所述预培养基的配方为：葡萄糖20～30g/L、蛋白胨15～20g/L、糖蜜5～15g/L、蔗糖10～20g/L、琼脂20～30g/L，步骤(1)中所述预培养基的pH值为5.3～5.5。
[0010]作为优选，步骤(1)中所述培育的温度为30～32℃，步骤(1)中所述培育的时间为5～7d。
[0011]作为优选，步骤(2)中所述液体培养基的配方为：葡萄糖10～15g/L、蛋白胨30～35g/L、麦芽糖20～30g/L、牛肉膏5～7g/L、麦芽膏粉40～60g/L，步骤(2)中所述液体培养基的pH值为5.5～5.8。
[0012]作为优选，步骤(2)中所述培育的温度为30～34℃，步骤(2)中所述培育的时间为18～30h。
[0013]作为优选，步骤(2)中所述培育时采用摇床培养，所述摇床培养过程中的转速为120～140r/min。
[0014]本专利技术还提供了一种耻垢分枝杆菌菌液。
[0015]本专利技术还提供了所述耻垢分枝杆菌菌液在制备甾体类药物中间体中的应用。
[0016]作为优选，所述甾体类药物中间体为11α,17α
‑
双羟黄体酮、11α
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羟基坎利酮、11α
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羟基
‑4‑
熊烯二酮或11α
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羟基黄体酮。
[0017]本专利技术提供了一种耻垢分枝杆菌菌液及其制备方法和在制备甾体类药物中间体中的应用，所述耻垢分枝杆菌菌液的制备方法包括如下步骤：(1)将耻垢分枝杆菌接种到预培养基中培育，得到预培养的耻垢分枝杆菌；(2)将预培养的耻垢分枝杆菌接种到液体培养基中培育，得到耻垢分枝杆菌菌液。本专利技术制备的耻垢分枝杆菌菌液能够用于甾体类药物中间体的生产，高效催化甾体类药物中间体原料的转化，有效降低生产过程中的污染。
具体实施方式
[0018]本专利技术提供了一种耻垢分枝杆菌菌液的制备方法，包括如下步骤：
[0019](1)将耻垢分枝杆菌接种到预培养基中培育，得到预培养的耻垢分枝杆菌；
[0020](2)将预培养的耻垢分枝杆菌接种到液体培养基中培育，得到耻垢分枝杆菌菌液。
[0021]在本专利技术中，步骤(1)中所述预培养基的配方优选为：葡萄糖20～30g/L、蛋白胨15～20g/L、糖蜜5～15g/L、蔗糖10～20g/L、琼脂20～30g/L，进一步优选为葡萄糖25g/L、蛋白胨17～18g/L、糖蜜10g/L、蔗糖15g/L、琼脂25g/L。
[0022]在本专利技术中，步骤(1)中所述预培养基的pH值优选为5.3～5.5，进一步优选为5.4。
[0023]在本专利技术中，步骤(1)中所述培育的温度优选为30～32℃，进一步优选为31℃。
[0024]在本专利技术中，步骤(1)中所述培育的时间优选为5～7d，进一步优选为6d。
[0025]在本专利技术中，步骤(2)中所述液体培养基的配方优选为：葡萄糖10～15g/L、蛋白胨30～35g/L、麦芽糖20～30g/L、牛肉膏5～7g/L、麦芽膏粉40～60g/L，进一步优选为葡萄糖12～13g/L、蛋白胨32～33g/L、麦芽糖25g/L、牛肉膏6g/L、麦芽膏粉50g/L。
[0026]在本专利技术中，步骤(2)中所述液体培养基的pH值优选为5.5～5.8，进一步优选为5.9。
[0027]在本专利技术中，步骤(2)中所述培育的温度优选为30～34℃，进一步优选为32℃。
[0028]在本专利技术中，步骤(2)中所述培育的时间优选为18～30h，进一步优选为24h。
[0029]在本专利技术中，步骤(2)中所述培育时优选采用摇床培养。
[0030]在本专利技术中，所述摇床培养过程中的转速优选为120～140r/min，进一步优选为130r/min。
[0031]本专利技术还提供了一种耻垢分枝杆菌菌液。
[0032]本专利技术还提供了所述耻垢分枝杆菌菌液在制备甾体类药物中间体中的应用。
[0033]在本专利技术中，所述甾体类药物中间体优选为11α,17α
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双羟黄体酮、11α
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羟基坎利酮、11α
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羟基
‑4‑
熊烯二酮或11α
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羟基黄体酮，进一步优选为11α,17α
‑
双羟黄体酮或11α
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羟基坎利酮。
[0034]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0035]实施例1
[0036](1)按照葡萄糖20g/L、蛋白胨20g/L、糖蜜15g/L、蔗糖20g/L、琼脂20g/L的配方制备预培养基，将预培养基的pH值调整至5.3备用；
[0037]按照葡萄糖15g/L、蛋白胨30g/L、麦芽糖20g/L、牛肉膏5g/L、麦芽膏粉60g/L的配方制备液体培养基，将液体培养基的pH值调整至5.5备用；
[0038](2)将耻垢分枝杆菌接种到预培养基中，在30℃条件下培育7d，得到预培养的耻垢分枝杆菌；
[0039](3)将预培养的耻垢分枝杆菌接种到液体培养基中培育，在34℃、120r/min的条件下培育18h，得到耻垢分枝杆菌菌液；
[0040](4)将耻垢分枝杆菌菌液12份、葡萄糖2份、牛肉膏1份、水60份和17α
‑
羟基黄体酮25份的体积比混合，培育得到11α,17α
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双羟黄体酮。
[0041]结果：利用高效液相色谱检测，结果显示17α
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种耻垢分枝杆菌菌液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将耻垢分枝杆菌接种到预培养基中培育，得到预培养的耻垢分枝杆菌；(2)将预培养的耻垢分枝杆菌接种到液体培养基中培育，得到耻垢分枝杆菌菌液。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述预培养基的配方为：葡萄糖20～30g/L、蛋白胨15～20g/L、糖蜜5～15g/L、蔗糖10～20g/L、琼脂20～30g/L，步骤(1)中所述预培养基的pH值为5.3～5.5。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述培育的温度为30～32℃，步骤(1)中所述培育的时间为5～7d。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述液体培养基的配方为：葡萄糖10～15g/L、蛋白胨30～35g/L、麦芽糖20～30g/L、牛肉膏5～7g/L、麦芽膏粉40～60g/L，...

【专利技术属性】
技术研发人员：系祖斌，艾文，陶琳，马雷，杨兵，
申请(专利权)人：湖北共同药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：