RCN3基因的检测试剂在制备胃癌检测试剂盒中的应用及胃癌检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及RCN3基因的检测试剂在制备胃癌检测试剂盒中的应用及胃癌检测试剂盒。本发明专利技术首次揭示了RCN3基因与胃癌、胃癌预后情况相关。在胃癌患者中RCN3基因的表达水平显著升高且具有统计学意义。RCN3基因的表达水平高的胃癌患者比RCN3基因的表达水平低的胃癌患者预后差，具有统计学意义。基于此，本发明专利技术将RCN3基因的检测试剂应用于制备胃癌的检测试剂盒，制备得到的试剂盒具有方便、快捷等特点，可用于胃癌的早期诊断、评估胃癌患者预后情况等领域，为胃癌患者的治疗提供指导。为胃癌患者的治疗提供指导。

【技术实现步骤摘要】
RCN3基因的检测试剂在制备胃癌检测试剂盒中的应用及胃癌检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及RCN3基因的检测试剂在制备胃癌检测试剂盒中的应用及胃癌检测试剂盒，属于生物医学


技术介绍

[0002]胃癌具有高发病率和高死亡率的特点，是世界上主要的癌症之一，也是重要的全球医疗保健问题，对全人类的健康造成了重要影响。有资料显示，超过70％的胃癌发生在发展中国家，胃癌发病例数绝对值最大的国家是中国。中国的胃癌发病例数和死亡例数分别占全球胃癌发病和死亡的42.6％和45.0％，疾病负担严重是癌症防治的难点和重点。胃癌患者具有发病率高、转移率高、死亡率高，早诊率低、根治性切除率低、5年生存率低的特点。与英国和美国相比，不仅中国的胃癌的发病率更高，并且5年总生存率还较低。目前在胃癌领域，仍然十分缺乏有效的检测胃癌的试剂盒，以及早期诊断和预后评估相关的肿瘤标记物，因此迫切的需要一种较为敏感的标志物，为胃癌的早期诊断和预后评估提供客观依据。
[0003]聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一种是一种体外特异性扩增目的DNA片段的技术，其基本原理是利用碱基互补配对原则。实时荧光定量PCR是以cDNA作为模板，在DNA Polymerase(聚合酶)作用下，参照目的片段的特异性引物序列，特异性合成上、下游引物之间的目的片段。检测结合在DNA双链中的荧光信号，根据Ct值等可以对目的mRNA进行定量检测。因此设计出能够识别目的片段的特异性引物序列，是保证目的mRNA定量准确的重要保证和重要环节。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的不足，本专利技术提供了RCN3基因的检测试剂在制备胃癌检测试剂盒中的应用及胃癌检测试剂盒。
[0005]本专利技术的技术方案如下：
[0006]RCN3基因的检测试剂在制备胃癌检测试剂盒中的应用。
[0007]根据本专利技术优选的，所述RCN3基因的NCBI Gene数据库Gene ID为57333。
[0008]根据本专利技术优选的，所述胃癌检测试剂盒为荧光定量PCR检测试剂盒。
[0009]根据本专利技术优选的，所述胃癌检测试剂盒用于检测细胞、组织、血浆或血清中的RCN3基因。
[0010]一种胃癌检测试剂盒，包括RCN3基因的荧光定量PCR反应试剂。
[0011]根据本专利技术优选的，所述RCN3基因的荧光定量PCR反应试剂包括RCN3基因的上游引物和下游引物；所述上游引物和下游引物的序列如RCN3_F1/R1或RCN3_F2/R2所示；
[0012]所述RCN3_F1/R1和RCN3_F2/R2的序列如下：
[0013]RCN3_F1：5
’‑
CCTGGATGGGAGTGAGGTG
‑3’
，
[0014]RCN3_R1：5
’‑
CAGGATTTCCGCTTTGCT
‑3’
；
[0015]RCN3_F2：5
’‑
TGGAAGCCAACCACCTG
‑3’
，
[0016]RCN3_R2：5
’‑
CCTGACTGCCCACAAACAT
‑3’
。
[0017]根据本专利技术优选的，所述胃癌检测试剂盒还包括内参体系。
[0018]进一步优选的，所述内参体系为内参基因β
‑
actin(beta
‑
actin)的荧光定量PCR的检测体系，包括β
‑
actin基因的上游引物和下游引物；所述上游引物和下游引物的序列如下：
[0019]β
‑
actin_F：5
’‑
GAAGAGCTACGAGCTGCCTGA
‑3’
，
[0020]β
‑
actin_R：5
’‑
CAGACAGCACTGTGTTGGCG
‑3’
。
[0021]根据本专利技术优选的，所述试剂盒中还包括用于荧光定量PCR的酶液和缓冲液体系，为现有的市购产品。
[0022]上述胃癌检测试剂盒在胃癌早期诊断中的应用。
[0023]上述胃癌检测试剂盒在胃癌预后评估中的应用。
[0024]有益效果：
[0025]1、本专利技术首次揭示了RCN3基因与胃癌、胃癌预后情况相关。在胃癌患者中RCN3基因的表达水平显著升高且具有统计学意义。RCN3基因的表达水平高的胃癌患者比RCN3基因的表达水平低的胃癌患者预后差，具有统计学意义。基于此，本专利技术将RCN3基因的检测试剂应用于制备胃癌的检测试剂盒，制备得到的试剂盒具有方便、快捷等特点，可用于胃癌的早期诊断和评估胃癌患者预后情况等领域，为胃癌患者的治疗提供指导。
[0026]2、本专利技术中所述RCN3基因作为胃癌早期诊断及判断胃癌预后的标志物具有重要参考价值。根据RCN3基因设计的试剂盒不仅可用于胃癌的筛查，同时可用于评估胃癌患者预后情况，辅助胃癌患者治疗，有着较高的临床使用价值及推广价值。
附图说明
[0027]图1是实施例1中以RCN3_F1/R1为引物所得数据统计学检验分析结果图。
[0028]图2是实施例1中以RCN3_F2/R2为引物所得数据统计学检验分析结果图。
[0029]图3是应用在GEO数据库(Gene Expression Omnibus，http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)中下载数据集GSE15459，使用Kaplan
‑
Meier和log
‑
rank检验分析RCN3基因表达水平对胃癌患者预后的影响，应用Log
‑
rank检验RCN3基因高表达与低表达胃癌患者之间预后差异是否具有统计学意义的示意图。
具体实施方式
[0030]下面结合实验例对本专利技术的技术方案作进一步描述，但是本专利技术的保护范围并不仅限于此。实施例中涉及的试剂及药品，若无特殊说明，均为普通市售产品；实施例中涉及的实验步骤，若无特殊说明，均为本领域常规操作。
[0031]实施例1、RCN3基因在胃癌患者中的表达水平
[0032]1、检测30个样本，分别来自15例胃癌患者，其中每例患者均取癌组织和癌旁组织样本，共30个样本(15对癌组织和癌旁组织)的cDNA。该30个样本的cDNA购买于上海芯超生物科技有限公司，型号为胃癌cDNA
‑
HStmA030CS01。
[0033]2、荧光定量PCR：
[0034]根据NCBI Gene数据库Gene ID为57333所示的RCN3基因设计两对引物，具体如下：
[0035]RCN3_F1：5
’‑
CCTGGATGGGAGTGAGGTG
‑3’
，
[0036]RCN3_R1：5
’‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.RCN3基因的检测试剂在制备胃癌检测试剂盒中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述RCN3基因的NCBI Gene数据库Gene ID为57333。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胃癌检测试剂盒为实时荧光定量PCR检测试剂盒。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胃癌检测试剂盒用于检测细胞、组织、血浆或血清中的RCN3基因。5.一种胃癌检测试剂盒，其特征在于，包括RCN3基因的荧光定量PCR反应试剂。6.如权利要求5所述的胃癌检测试剂盒，其特征在于，所述RCN3基因的荧光定量PCR反应试剂包括RCN3基因的上游引物和下游引物；所述上游引物和下游引物的序列如RCN3_F1/R1或RCN3_F2/R2所示；所述RCN3_F1/R1和RCN3_F2/R2的序列如下：RCN3_F1：5
’‑
CCTGGATGGGAGTGAGGTG
‑3’
，RCN3_R1：5
’‑
CAGGATTTCCGCTTTGCT
‑3’
；RCN3_F2：5
’‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘新泳，王大志，展鹏，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：