EMC8基因的检测试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用及预后评估试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及EMC8基因的检测试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用及预后评估试剂盒。本发明专利技术首次揭示了EMC8基因与老年胃癌淋巴结转移相关，在老年胃癌淋巴结转移患者中EMC8基因的表达水平显著升高且具有统计学意义。本发明专利技术中所述EMC8基因作为评估胃癌患者预后的标志物，对于胃癌预后评估具有重要参考价值。基于此，本发明专利技术将EMC8基因的检测试剂应用于制备胃癌预后评估试剂盒，制备得到的试剂盒具有方便、快捷等特点，可用于胃癌的淋巴结转移预警、以及评估胃癌患者预后情况，为胃癌患者的治疗提供指导。提供指导。

【技术实现步骤摘要】
EMC8基因的检测试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用及预后评估试剂盒


[0001]本专利技术涉及EMC8基因的检测试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用及预后评估试剂盒，属于生物医学


技术介绍

[0002]胃癌具有高发病率和高死亡率的特点，是世界上主要的癌症之一，也是重要的全球医疗保健问题，对全人类的健康造成了重要影响。有资料显示，超过70％的胃癌发生在发展中国家，胃癌发病例数绝对值最大的国家是中国。中国的胃癌发病例数和死亡例数分别占全球胃癌发病和死亡的42.6％和45.0％，疾病负担严重是癌症防治的难点和重点。胃癌患者具有发病率高、转移率高、死亡率高，早诊率低、根治性切除率低、5年生存率低的特点。另一方面，有研究显示，淋巴结转移是胃癌患者预后的危险因素之一，淋巴结转移阳性相对于淋巴结转移阴性，患者往往预后不佳。影像学检查是判断淋巴结转移的主要方法之一，但是一些患者术前CT检查并没有显示出明显肿大的淋巴结，然而患者的术后病理却证实为淋巴结阳性。采用新的技术手段，帮助明确患者否确实存在淋巴结转移，对于指导手术及围手术期化疗，和改善患者预后都有帮助，并对提高患者生存质量具有重要意义。目前在胃癌领域，仍然十分缺乏有效的检测胃癌的试剂盒，以及预后评估的肿瘤标记物，因此迫切的需要这方面的标志物，为胃癌的预后评估提供客观依据。
[0003]聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一种体外特异性扩增目的DNA片段的技术，其基本原理是利用碱基互补配对原则。实时荧光定量PCR是以cDNA作为模板，在DNA Polymerase(聚合酶)作用下，参照目的片段的特异性引物序列，特异性合成上、下游引物之间的目的片段。检测结合在DNA双链中的荧光信号，根据Ct值等可以对目的mRNA进行定量检测。因此设计出能够识别目的片段的特异性引物序列，是保证目的mRNA定量准确的重要保证和重要环节。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的不足，本专利技术提供了EMC8基因的检测试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用及预后评估试剂盒。
[0005]本专利技术的技术方案如下：
[0006]EMC8基因的检测试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用。
[0007]根据本专利技术优选的，所述EMC8基因的NCBI Gene数据库Gene ID为10328。
[0008]根据本专利技术优选的，所述胃癌预后评估试剂盒为荧光定量PCR检测试剂盒。
[0009]根据本专利技术优选的，所述胃癌预后评估试剂盒用于检测细胞、组织、血浆或血清中的EMC8基因。
[0010]一种胃癌预后评估试剂盒，包括EMC8基因的荧光定量PCR反应试剂。
[0011]根据本专利技术优选的，所述EMC8基因的荧光定量PCR反应试剂包括EMC8基因的上游
引物和下游引物；所述上游引物和下游引物的序列如下：
[0012]EMC8_F：5
’‑
CCCATGCTGGAGGTGGCTCT
‑3’
，
[0013]EMC8_R：5
’‑
GGACTGGCATCCTTTACTCG
‑3’
。
[0014]根据本专利技术优选的，所述胃癌诊断试剂盒还包括内参体系。
[0015]进一步优选的，所述内参体系为内参基因β
‑
actin(beta
‑
actin)的荧光定量PCR的检测体系，包括β
‑
actin基因的上游引物和下游引物；所述上游引物和下游引物的序列如下：
[0016]β
‑
actin_F：5
’‑
GAAGAGCTACGAGCTGCCTGA
‑3’
，
[0017]β
‑
actin_R：5
’‑
CAGACAGCACTGTGTTGGCG
‑3’
。
[0018]根据本专利技术优选的，所述试剂盒中还包括用于荧光定量PCR的酶液和缓冲液体系，为现有的市购产品。
[0019]上述胃癌预后评估试剂盒在预警老年胃癌患者的淋巴结转移中的应用。
[0020]上述胃癌预后评估试剂盒在胃癌预后评估中的应用。
[0021]有益效果：
[0022]1、本专利技术首次揭示了EMC8基因与胃癌淋巴结转移相关，在胃癌淋巴结转移患者中EMC8基因的表达水平显著升高且具有统计学意义。基于此，本专利技术将EMC8基因的检测试剂应用于制备胃癌淋巴结转移评估试剂盒，制备得到的试剂盒具有方便、快捷等特点，可用于胃癌的淋巴结转移预警领域，为胃癌患者的治疗提供指导。
[0023]2、本专利技术中所述EMC8基因作为评估胃癌患者预后的标志物，对于胃癌预后评估具有重要参考价值。根据EMC8基因设计的试剂盒可用于评估胃癌患者预后情况，辅助胃癌患者治疗，有着较高的临床使用价值及推广价值。
附图说明
[0024]图1是实施例1中秩和检验分析结果图。
[0025]图2是在GEO数据库(Gene Expression Omnibus，http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)中下载数据集GSE14208，在KM plotter(www.kmplot.com)数据库中下载胃癌患者预后信息以及EMC8表达数据，分析EMC8基因表达水平对胃癌患者预后的影响，应用Log
‑
rank检验EMC8基因高表达与低表达胃癌患者之间预后差异是否具有统计学意义的示意图；
[0026]图中：A为总生存率分析一，B为复发生存期分析，C为总生存率分析二，D为首次进展期分析。
具体实施方式
[0027]下面结合实验例对本专利技术的技术方案作进一步描述，但是本专利技术的保护范围并不仅限于此。实施例中涉及的试剂及药品，若无特殊说明，均为普通市售产品；实施例中涉及的实验步骤，若无特殊说明，均为本领域常规操作。
[0028]实施例1、EMC8基因在老年(大于65岁)胃癌有、无淋巴结转移患者中的表达水平差异
[0029]1、检测90个样本，分别来自45例胃癌患者，其中每例患者均取癌组织和癌旁组织样本，共90个样本(45对癌组织和癌旁组织)的cDNA。该90个样本的cDNA购买于上海芯超生
物科技有限公司，型号为胃癌MecDNA
‑
HStmA030CS01和MecDNA
‑
HStmA060CS01。其中，患者年纪大于65岁共19例。这19例老年患者中，14例患者有淋巴结转移，5例患者无淋巴结转移。
[0030]2、荧光定量PCR：
[0031]根据NCBI Gene数据库Gene ID为10328所示的EMC8基因设计引物，具体如下：
[0032]EMC8_F：5
’‑
CCCATGCTGGAGGTGGCTCT
‑3’
，
[0033]EMC8本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.EMC8基因的检测试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述EMC8基因的NCBI Gene数据库Gene ID为10328。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胃癌预后评估试剂盒为荧光定量PCR检测试剂盒。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胃癌预后评估试剂盒用于检测细胞、组织、血浆或血清中的EMC8基因。5.一种胃癌预后评估试剂盒，其特征在于，包括EMC8基因的荧光定量PCR反应试剂。6.如权利要求5所述的胃癌预后评估试剂盒，其特征在于，所述EMC8基因的荧光定量PCR反应试剂包括EMC8基因的上游引物和下游引物；所述上游引物和下游引物的序列如下：EMC8_F：5
’‑
CCCATGCTGGAGGTGGCTCT
‑3’
，EMC8_R：5
’‑
GGACTGGCATCCTTTACTCG

【专利技术属性】
技术研发人员：刘新泳，王大志，展鹏，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：