一种高效检测透明质酸组合物含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种高效检测透明质酸组合物含量的方法，本发明专利技术首次提出高效分离并检测透明质酸组合物中的透明质酸及降解产物含量的方法，并科学筛选检测方法条件及检测参数，建立了一种特定的间接分析方法，为有效控制产品质量、保障产品有效性和安全性，实现产品质量可控提供了有力保障。可控提供了有力保障。可控提供了有力保障。

【技术实现步骤摘要】
一种高效检测透明质酸组合物含量的方法


[0001]本专利技术属于分析
，具体涉及一种高效检测透明质酸组合物含量的方法。

技术介绍

[0002]透明质酸是由D
‑
葡萄糖醛酸及N
‑
乙酰葡糖胺组成的双糖单位糖胺聚糖。研究表明，透明质酸具有多种生物活性而成为应用最为广泛、市场前景广阔的医用高分子材料。透明质酸类化妆品无须准确检测其透明质酸含量。鉴于组合物中的透明质酸及其它组分的含量直接影响透明质酸组合物的生物活性及医用安全性，为了确保使用者的安全有效性，国家严格要求就有关含有透明质酸的3类医疗器械产品需准确检测其透明质酸含量。但透明质酸组合物的组成复杂且干扰物多，需要研究改进并优化分析方法及检测条件，开发专属性好的检测方法，以保障医用透明质酸及组合物的质量及安全有效性。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种透明质酸组合物的检测方法，包括下述步骤：（1）将待检测的透明质酸组合物置于透析袋中，加水，完成透明质酸组合物的透析后，取透析袋中的样品加水溶解，将其配制成浓度为1
‑
200μg/mL的供试品溶液，其中，所述透明质酸组合物含有透明质酸与氨基酸、维生素、硫辛酸、胶原蛋白的任一种或其组合，透析袋的截留分子量为2000
‑
500000道尔顿，任选不同截留分子量的透析袋进行至少1级截留，所述氨基酸选自谷胱甘肽、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯基丙氨酸、半胱氨酸中的任一种或其组合，所述维生素选自维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B9、维生素B12、维生素C的任一种或其组合，所述每次截留的透析次数为2
‑
5次；（2）称取葡萄糖醛酸对照品，将其配制成浓度为0
‑
200μg/mL的葡萄糖醛酸对照溶液，再根据需要将其配制成葡萄糖醛酸标准液系列；（3）取供试品溶液、葡萄糖醛酸标准液系列，加入浓度为0.01
‑
0.05mol/L的四硼酸钠硫酸溶液，搅拌至反应完全后，再加入浓度为0.05
‑
0.50%的咔唑乙醇溶液，搅拌至反应完全后，采用紫外
‑
可见分光光度计在波长为500
‑
600nm处检测吸光度；（4）采用葡萄糖醛酸标准液系列的吸光度绘制吸光度—浓度曲线，再利用供试品溶液的吸光度在吸光度—浓度曲线上的位置来计算并确定供试品溶液中的葡萄糖醛酸含量，再据此计算待测透明质酸组合物中的透明质酸含量。
[0004]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由水或pH6
‑
9的磷酸盐缓冲液的任一种与选自0.1
‑
50mg/ml透明质酸、1
‑
50mg/ml氨基酸、1
‑
100mg/ml维生素、1
‑
50mg/ml硫辛酸和1
‑
100mg/ml胶原蛋白的任一种或其组合组成。
[0005]本专利技术的优选技术方案中，组合物中的透明质酸含量为0.5
‑
20mg/ml，氨基酸含量为2
‑
40mg/ml，维生素含量为5
‑
50mg/ml，硫辛酸含量为2
‑
25mg/ml，胶原蛋白含量为5
‑
50mg/
ml，磷酸盐缓冲液pH6.5
‑
8。
[0006]本专利技术的优选技术方案中，组合物中的透明质酸含量为1
‑
10mg/ml，氨基酸含量为3
‑
30mg/ml，维生素含量为10
‑
20mg/ml，硫辛酸含量为3
‑
15mg/ml，胶原蛋白含量为10
‑
20mg/ml，磷酸盐缓冲液pH6.5
‑
8。
[0007]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1
‑
10mg/ml透明质酸、3
‑
15mg/ml硫辛酸、10
‑
20mg/ml维生素C和磷酸盐缓冲液pH7
‑
8组成。
[0008]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1mg/ml透明质酸、3mg/ml硫辛酸、10mg/ml维生素C和磷酸盐缓冲液pH8组成。
[0009]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1
‑
10mg/ml透明质酸、3
‑
30mg/ml谷胱甘肽和磷酸盐缓冲液pH7
‑
8组成。
[0010]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1mg/ml透明质酸、3mg/ml谷胱甘肽和磷酸盐缓冲液pH8组成。
[0011]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1
‑
10mg/ml透明质酸、3
‑
30mg/ml维生素和磷酸盐缓冲液pH7
‑
8组成。
[0012]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1mg/ml透明质酸、3mg/ml维生素B12、10mg/ml维生素B2和磷酸盐缓冲液pH8组成。
[0013]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1
‑
10mg/ml透明质酸、3
‑
30mg/ml氨基酸和磷酸盐缓冲液pH7
‑
8组成。
[0014]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1mg/ml透明质酸、3mg/ml甘氨酸、10mg/ml脯氨酸和磷酸盐缓冲液pH8组成。
[0015]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1
‑
10mg/ml透明质酸、10
‑
20mg/ml胶原蛋白、10
‑
20mg/ml维生素C和磷酸盐缓冲液pH6.5
‑
7.5组成。
[0016]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1mg/ml透明质酸、10mg/ml胶原蛋白、10mg/ml维生素C和磷酸盐缓冲液pH6.5组成。
[0017]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1
‑
10mg/ml透明质酸、3
‑
30mg/ml氨基酸和水组成。
[0018]本专利技术的优选技术方案中，所述透明质酸组合物由1mg/ml透明质酸、3mg/ml甘氨酸、10mg/ml脯氨酸和水组成。
[0019]本专利技术的优选技术方案中，所述供试品溶液、葡萄糖醛酸标准液系列的配制顺序没有先后之分。
[0020]本专利技术的优选技术方案中，透析袋的截留分子量为3500
‑
200000道尔顿，优选为10000
‑
100000道尔顿，更优选为50000
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80000道尔顿本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种透明质酸组合物的检测方法，包括下述步骤：（1）将待检测的透明质酸组合物置于透析袋中，加水，完成透明质酸组合物的透析后，取透析袋中的样品加水溶解，将其配制成浓度为1
‑
200μg/mL的供试品溶液，其中，所述透明质酸组合物含有透明质酸与氨基酸、维生素、硫辛酸、胶原蛋白的任一种或其组合，透析袋的截留分子量为2000
‑
500000道尔顿，任选不同截留分子量的透析袋进行至少1级截留，所述氨基酸选自谷胱甘肽、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯基丙氨酸、半胱氨酸中的任一种或其组合，所述维生素选自维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B9、维生素B12、维生素C的任一种或其组合，每次截留的透析次数为2
‑
5次；（2）称取葡萄糖醛酸对照品，将其配制成浓度为0
‑
200μg/mL的葡萄糖醛酸对照溶液，再根据需要将其配制成葡萄糖醛酸标准液系列；（3）取供试品溶液、葡萄糖醛酸标准液系列，加入浓度为0.01
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0.05mol/L的四硼酸钠硫酸溶液，搅拌至反应完全后，再加入浓度为0.05
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0.50%的咔唑乙醇溶液，搅拌至反应完全后，采用紫外
‑
可见分光光度计在波长为500
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600nm处检测吸光度；（4）采用葡萄糖醛酸标准液系列的吸光度绘制吸光度—浓度曲线，再利用供试品溶液的吸光度在吸光度—浓度曲线上的位置来计算并确定供试品溶液中的葡萄糖醛酸含量，再据此计算待测透明质酸组合物中的透明质酸含量。2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述透明质酸组合物由水或pH6
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9的磷酸盐缓冲液的任一种与选自0.1
‑
50mg/ml透明质酸、1
‑
50mg/ml氨基酸、1
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【专利技术属性】
技术研发人员：王晔，武秋红，覃慧薇，郭华，
申请(专利权)人：渼颜空间河北生物科技有限公司渼颜空间生物科技吉林有限公司，
类型：发明
国别省市：